Objective: To assess induction effects of Chlamydia pneumoniae (Cpn) on lung cancer in rats. Methods: A lung cancer animal model was developed through repeated intratracheal injection of Cpn (TW-183) into the lungs of rats, with or without exposure to benzo(a)pyrene (Bp). Cpn antibodies (Cpn-IgA, -IgG, and -IgM) in serum were measured by microimmunofluorescence. Cpn-DNA or Cpn-Ag of rat lung cancer was detected through polymerase chain reaction or enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The prevalence of Cpn infection was 72.9% (35/48) in the Cpn group and 76.7% (33/43) in the Cpn plus benzo(a)pyrene (Bp) group, with incidences of lung carcinomas in the two groups of 14.6% (7/48) and 44.2% (19/43), respectively (P-values 0.001 and <0.000 compared with normal controls). Conclusions: A rat model of lung carcinoma induced by Cpn infection was successfully established in the laboratory for future studies on the treatment, prevention, and mechanisms of the disease.
Seo, Mi Hyun;Lee, Min Young;Eo, Mi Young;Lee, Suk Keun;Woo, Kyung Mi;Kim, Soung Min
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.46
no.4
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pp.240-249
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2020
Objectives: Although the side effects of radiation therapy vary from mucositis to osteomyelitis depending on the dose of radiation therapy, to date, an experimental animal model has not yet been proposed. The aim of this study was to develop an animal model for assessing complications of irradiated bone, especially to quantify the dose of radiation needed to develop a rat model. Materials and Methods: Sixteen Sprague-Dawley rats aged seven weeks with a mean weight of 267.59 g were used. Atraumatic extraction of a right mandibular first molar was performed. At one week after the extraction, the rats were randomized into four groups and received a single dose of external radiation administered to the right lower jaw at a level of 14, 16, 18, or 20 Gy, respectively. Clinical alopecia with body weight changes were compared and bony volumetric analysis with micro-computed tomography (CT), histologic analysis with H&E were performed. Results: The progression of the skin alopecia was different depending on the irradiation dose. Micro-CT parameters including bone volume, bone volume/tissue volume, bone mineral density, and trabecular spaces, showed no significant differences. The progression of osteoradionecrosis (ORN) along with that of inflammation, fibrosis, and bone resorption, was found with increased osteoclast or fibrosis in the radiated group. As the radiation dose increases, osteoclast numbers begin to decrease and osteoclast tends to increase. Osteoclasts respond more sensitively to the radiation dose, and osteoblasts are degraded at doses above 18 Gy. Conclusion: A standardized animal model clinically comparable to ORN of the jaw is a valuable tool that can be used to examine the pathophysiology of the disease and trial any potential treatment modalities. We present a methodology for the use of an experimental rat model that incorporates a guideline regarding radiation dose.
Murine mycoplasmosis, caused by Mycoplasma (M.) pulmonis, is a prominent disease in rodent animals. The aim of this study was to develop a sensitive and specific PCR assay to detect M. pulmonis in animals and to assess the suitability of this assay for the detection of mycoplasmal infection in rats experimentally infected with M. pulmonis. A new PCR assay using the M. pulmonis-specific primer pairs MPul-F and MPul-R was developed. The primers and probe for the assay were designed from regions in the 16S rRNA gene that are unique to M. pulmonis. The novel PCR assay was very specific and sensitive for M. pulmonis, detecting the equivalent of 5 pg of target template DNA. It detected only M. pulmonis and no other Mycoplasma species or other bacterial species. The newly developed PCR assay also effectively detected M. pulmonis infection in rats. These results suggest that this PCR assay using M. pulmonis-specific primer pairs of MPul-F and MPul-R will be useful and effective for monitoring M. pulmonis infection in animals.
The gut is the largest organ that helps with the immune function. Gut health, especially in young pigs has a significant benefit to health and performance. In an attempt to maintain and enhance intestinal health in pigs and improve productivity in the absence of in-feed antibiotics, researchers have evaluated a wide range of feed additives. Some of these additives such as zinc oxide, copper sulphate, egg yolk antibodies, mannan-oligosaccharides and spray dried porcine plasma and their effectiveness are discussed in this review. One approach to evaluate the effectiveness of these additives in vivo is to use an appropriate disease challenge model. Over the years, researchers have used a number of challenge models which include the use of specific strains of enterotoxigenic Escherichia coli, bacteria lipopolysaccharide challenge, oral challenge with Salmonella enteric serotype Typhimurium, sanitation challenge, and Lawsonia intercellularis challenge. These challenge models together with the criteria used to evaluate the responses of the animals to them are also discussed in this review.
J. R. Chun;S. J. Song;J. T. Do;K. S. Chung;Lee, H. T.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.99-99
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2002
The hormone resistin is associated with typeII diabetes mellitus in rodent model. Resistin impairs glucose tolerance and insulin action. A new class of anti-diabetic drugs were called thiazolidinediones (TZDs) downregulates a resistin which is induced during adipocyte differentiation. But the connection between increased adiposity and resistin remains unknown. The objectives of this study was to clone a mouse resistin cDNA and to generate transgenic mice overexpressing mouse resistin gene. The 555 bp of mouse resistin was amplified from mob cDNAS by polymerase chain reaction (PCR) and cloned into pCR$\^$(R)/ 2.1 TOPO T-vector. Mouse resistin mRNA on the basis of Genbank sequence (acession no. AF323080). Then, the PCR product was cloned into pTargeT$\^$TM/ mammalian expression vector that has pCMV promoter and chimeric intron. Restriction enzyme analysis with BamH I and Not I was carried out to determine an orientation of the insert in the vector. The pCMV-mus/resistin gene was prepared from previous recombinant pTargeT$\^$TM/-mus/resistin by digestion of Bgl II, and has used for microinjection into pronuclei of one cell embryos. The microinjected embryos were transfered to pseudopregnant foster-mother. Mouse resistin expression was detected in transgenic F1 mice by Reverse Transcriptase- Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). Resistin gene expression mouse has heavier body weight which was measured higher level of plasma glucose than that of normal mouse. And in diet-induced experiments, the abdominal fat pads were isolated from each 24h starvation and re-feeding after fasting group mice that were assessed by RT-PCR analysis. In fasting group mice, resistin expression was higher than that of re-feeding group mice. This result suggests that the resistin gene overexpressing mice may be became to obesity and be useful as an animal disease model to be diabetes mellitus caused by insulin resistance of resistin.
Transcription factor AP-$2{\alpha}$ involves in the process of mammalian embryonic development and tumorigenesis. Many studies have shown that AP-$2{\alpha}$ functions in association with other interacting proteins. In a two-hybrid screening, the regulatory subunit ${\beta}$ of protein casein kinase 2 ($CK2{\beta}$) was identified as an interacting protein of AP-$2{\alpha}$; we confirmed this interaction using in-vitro GST pull-down and in-vivo co-immunoprecipitation assays; in an endogenous co-immunoprecipitation experiment, we further found the catalytic subunit ${\alpha}$ of protein casein kinase 2 ($CK2{\alpha}$) also exists in the complex. Phosphorylation analysis revealed that AP-$2{\alpha}$ was phosphorylated by CK2 kinase majorly at the site of Ser429, and such phosphorylation could be blocked by CK2 specific inhibitor 4,5,6,7-tetrabromobenzotriazole (TBB) in a dose-dependent manner. Luciferase assays demonstrated that both $CK2{\alpha}$ and $CK2{\beta}$ enhanced the transcription activity of AP-$2{\alpha}$; moreover, $CK2{\beta}$ increased the stability of AP-$2{\alpha}$. Our data suggest a novel cellular function of CK-2 as a transcriptional co-activator of AP-$2{\alpha}$.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.95-95
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2002
Human embryonic stem (hES) cells can be induced to differentiate into tyrosine hydroxylase expressing (TH+) cells that may serve as an alternative for cell replacement therapy for Parkinson's disease (PD). To examine in vitro differentiation of hES (MB03, registered in NIH) cells into TH+ cells, hES cells were induced to differentiate according to the 4-/4+ protocol using retinoic acid (RA), ascorbic acid (AA), and/or lithium chloride (LiCl) followed by culture in N2 medium for 14 days, during which time the differentiation occurs. Immunocytochemical stainings of the cells revealed that approximately 21.1% of cells treated with RA plus AA expressed TH protein that is higher than the ratio of TH+ cells seen in any other treatment groups (RA, RA+LiCl or RA+AA+LiCl). In order to see the differentiation pattern in vivo and the ability of in vitro differentiation-induced cells in easing symptomatic motor function of PD animal model, cells (2 $\times$ 10$^{5}$ cells/2${mu}ell$) undergone 4-/4+ protocol using RA plus AA without any further treatment were transplanted into unilateral striatum of MPTP-lesioned PD animal model (C57BL/6). Following the surgery, motor behavior of the animals was examined by measuring the retention time on an accelerating rotar-rod far next 10 weeks. No significant differences in retention time of the animals were noticed until 2 weeks post-graft; however, it increased markedly at 6 weeks and 10 weeks time point after the surgery. Immunohistochemical studies confirmed that a reasonable number of TH+ cells were found at the graft site as well as other remote sites, showing the migrating nature of embryonic stem cells. These results suggest that in viかo differentiated hES cells relieve symptomatic motor behavior of PD animal model and should be considered as a promising alternative for the treatment of PD.
Kim, Eu-Tteum;Lee, Kyoung-Ki;Kim, Seong-Hee;Pak, Son-Il
Journal of Veterinary Clinics
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v.34
no.2
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pp.140-145
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2017
The goal of this study was to investigate risk factors associated with porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) in pig farms in the Republic of Korea using logistic regression and a multilevel model. A cross-sectional study was applied to 305 pig farms with a questionnaire-based interview by veterinarians between March 2014 and February 2015. The questionnaire comprised eight categories: proximity to neighbors, disinfection, visitors, vehicles, insecticides, wild animals, gilts, and feeding. In total, 61 questions in eight categories related to pig farm biosecurity were investigated. Farms were classified as PRRS stable or unstable based on the results of an antibody test and PCR. For univariate analysis, keeping production records with computers (OR = 0.283, 95% CI = 0.056 - 1.425), accredited farm with no use of antibiotics (OR = 0.412, 95% CI = 0.134 - 1.269), reviewing health record of semen prior to purchasing (OR = 0.492, 95% CI = 0.152 - 1.589), complete isolation of runt pigs (OR = 0.264, 95% CI = 0.084 - 0.829), compulsory registering for visitors (OR = 0.424, 95% CI = 0.111 - 1.612), keeping records of insecticide history (OR = 0.406, 95% CI = 0.089 - 1.846), routine on-farm monitoring by veterinarians (OR = 0.314, 95% CI = 0.069 - 1.423), and use of on-farm checklist for biosecurity monitoring (OR = 0.313, 95% CI = 0.063 - 1.553) were found to decrease the probability of PRRS infection. Multivariate and multilevel analysis revealed only two factors, complete isolation of runt pigs (OR = 0.165, 95% CI = 0.045 - 0.602 and OR = 0.208, 95% CI = 0.055 - 0.782) and compulsory registering for visitors (OR = 0.106, 95% CI = 0.017 - 0.655 and OR = 0.119, 95% CI = 0.017 - 0.809) were found to decrease the probability of PRRS infection. The intracluster correlation coefficient of a province for multilevel model was 0.05. The results of this study might facilitate biosecurity measures for individual farms to reduce the probability of PRRS infection.
Alkaline reduced water (ARW) has been used for drinking widely in several countries of Asia. The safety and clinical effects of ARW has been reported including anti-oxidative effect and intestinal abnormal fermentation. To confirm the effect of ARW on DSS-induced acute inflammatory bowel disease (IBD) mouse model, we observed the length of total large intestine and the histopathological changes after supplying mineral induced-ARW (MARW) for 2 weeks and oral administration of 4% DSS (dextran sulfate sodium). As the result, the length of total large intestine and the disease scores by macro and microscopical access in the ARWsupplied group showed no significant differences compared with those in the control group. This result suggests that the supply of ARW for 2 weeks exerted no effect on amelioration in the DSS-induced acute IBD model. However, in consideration of the effect of ARW on the improvement of intestinal environment and gastrointestinal disease, this result seems that acute IBD animal model is not suitable or the period of ARW supply is not enough to prove the effect of ARW. The ameliorative effect of ARW on the intestinal abnormal fermentation has been confirmed by some researchers, but the precise mechanism also remain unclear. In conclusion, although MARW had no effect on the DSS-induced acute experimental colitis model, further studies on the verification of the effects of ARW by using other intestinal disease model and by long-term supply of ARW will be required. Also, It needs to clear the mechanism of ARW on the intestinal environment.
Park, Jun-Hong;Kim, Kil-Soo;Lee, Eun-Ju;Kim, Myoung-Ok;Kim, Sung-Hyun;Kyoungin-Cho;Jung, Boo-Kyung;Kim, Hee-Chul;Sol ha Hwang
Proceedings of the KSAR Conference
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2003.06a
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pp.54-54
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2003
The activation of protooncogenes or the inactivation of their gene products may be a specific and effective functional study for human neoplasia. To examine this possibility, we have used the tetracycline regulatory system to generate transgenic mice that conditionally express the HccR-2 protooncogene in vivo. The new human cervical cancer protooncogene (HccR-2) was detected from cervical cancer cell line. To elucidate its biological functions, we generated transgenic mice that expressed the HccR-2 gene. The sustained expression of the HccR-2 transgene culminated chronic neutrophilic leukemia (CNL). CNL is a rare chronic myeloproliferative disorder that presents as a sustained, mature neutrophilic leukocytosis with few or no circulating immature granulocytes, the absence of peripheral blood monocytosis, basophilia, or eosinophilia, and infiltration of neutrophils at the liver, spleen and kidney. Mice expressing the HccR-2 and tetracycline-transactivating protein (tTa) transgene were found to have altered myeloid development that was characterized by increased percentages of mature neutrophil and band form neutrophil in the peripheral blood, liver and spleen. Activation of the transgene causes CNL. In our model, expression of HccR-2 transgene mice was similar in many respects to the human CNL. This model will be valuable not only for investigating the biological properties of the HccR-2 and other protooncogenes in vivo but also for analyzing the mechanism involved in the progression of CNL.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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