• 제목/요약/키워드: disc-PAGE

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인체 유구낭미충증 환자에서 수거한 낭미충 낭액의 성분 단백질의 양상 (Component proteins in cystic fluid of Taenia sodium metacestodes collected surgically from neurocysticercosis patients)

  • Yoon Kong;Shin-Yong Kang;Seung-Yull Cho
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제28권2호
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    • pp.101-108
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    • 1990
  • 포도낭미충증을 포함한 유구낭미충증 환자의 신경외과적 수술 과정에서 수거한 낭미충 낭액의 성분 단백질을 비교 검토하였다. 7.5% gel에서 Disc-PAGE와 reducing condition의 10~15% gel에 SDS-PAGE를 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 7.5% gel에서 실시한 Disc-PAGE 소견상 제주도와 Ecuador에서 수집한 돼지의 유구낭미충 낭액은 U, A, B, C, E, S의 6개 band로 구성되어 있었고 그 중 band C가 주 구성 성분이었다. 그리고 인체에서 수집한 낭액 은 band C가 주 구성 성분이었고 경우에 따라 band E가 주 구성 성분으로 관찰되고 있었다. 정상 뇌척수액은 band C, E 위치에서 ${\gamma}-globulin$과 albumin이 보이고 있었다. 2. 10~15% gel에서 실시한 SDS-PAGE상 제주도 낭액은 최소 25개 이상의 subunit로 구성되어 있었고 그 중 95, 64, 48, 39, 34, 24, 15, 10및 7 kDa band가 주 구성 성분이었다. 그리고 Ecuador감염 돼지의 유구낭미충 낭액은 전체적으로 비슷했으나 48, 39, 34, 24 kDa band가 의미한 반면 21, 17 kDa가 진하게 염색되었다. 인체 뇌낭미충증 환자에서 수집한 낭액들은 15~21개 정도의 band가 보이고 있었다. 그 중 94, 64, 15, 10 그리고 7 kDa band는 모든 낭액에 공통적으로 포함되어 있었다. 한편, 정상 뇌척수액의 SDS-PAGE에서는 77, 66 (albumin), 55 (heavy chain of ${\gamma}-globulin$), 22.5 (light chain of ${\gamma}-globulin$) 그리고 17 kDa band가 보였다. 환자의 낭액은 77, 66, 55, 22.5 kDa에서 진하게 염색되는 경우가 있었다. 이상의 결과로 인채 유구낭미충증에서 수집한 낭액에도 15, 10, 7kDa의 subunit로 구성된 150kDa의 band C protein이 주 성분으로 구성되어 있으며 수술장에서 수집하는 과정에서 뇌척수액이 섞이는 경우가 많음을 알 수 있었다.

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인삼 단백질분획에 대한 폴리아크릴아미드 전기영동 (Polyacrylamide Gel Electrophoresis on Ginseng Proteins)

  • 김춘미;황정주
    • 약학회지
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    • 제30권6호
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    • pp.343-347
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    • 1986
  • Korean ginseng was purified to obtain radioprotective protein fractions by buffer extraction, ammonium sulfate fractionation, CM-cellulose column chromatography, heat inactivation and Sephadex G-75 column chromatography. The final three fractions, GI, GII and GIII were subjected to Disc-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and SDS-PAGE. The molecular weights(M.W.) of native and denatured proteins were estimated by using regression line equations obtained from the mobilities of standard proteins. As the results, in Disc-PAGE, the GI fraction showed two protein bands with M.W. of above 213, 000 and 55, 000, GII showed one band with M.W. of 44, 000 and GIII, also one band with M.W. of 19, 000. In SDS-PAGE, GI fraction gave four subunit bands with M.W. of above 114, 000, 27, 000, 24, 000 and 19, 000, GII gave two bands with M.W. of 46, 000 and 22, 000, and GIII, one band of 19, 000.

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폐쇄에 따른 돼지 여포액내 단백질의 전기영동 양상에 관한 연구 (A Study on the Pattern of Proteins on Electrophoresis in the Porcine Follicular Fluid During Atresia)

  • 김종흡;윤용달;김문규
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제13권1호
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    • pp.39-51
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    • 1986
  • This experiment has been done to evaluate the relationship between the follicular atresia and the protein patterns on electrophoreais of the follicular fluids in porcine ovary. The protein concentration of the follicular fluids was lower than that of serum, and gradually decreased as the follicle siae became larger. The number of protein bands of follicular fluid on electrophoresis was less than that of serum, and gradually increased as follicle size became larger. Three specific bands were detected on disc PAGE and one band(M W. 75,000) on SDS PAGE in the follicular fluids, while not in serum. One band (A) at ${\beta}$-globulin region on disc PAGE became heavier, as follicles became atretic. Two bands less than(M. W. 20,000) were detected only in the large follicular fluid. Another band(M. W. 43,000) was not detected in necrotic group, whereas all other groups showed it. It could be concluded that the component and composition of the proteins follicular fluids changes according to the follicular size during atresia. Therefore detection of the changing pattern of proteins in the follicular fluid can be used as a basic criterion for the identification of follicular atretic stage.

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친화성크로마토그래피로 순수분리한 폐흡충 성충 성분단백질의 성상 (Component proteins in crud extract of adult Paragonimus westermani purified by immunoaffinity chromatography using monoclonal antibodes)

  • 강신영;공윤;조승열
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제29권4호
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    • pp.363-370
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    • 1991
  • 인체감염이 다발하는 폐흡충증의 혈청학적 진단에서 항원으로 사용하는 성충추출액은 여러단계의 질환 이행과정을 진단하는 항원으로서 문제가 있다. 이를 해결하려면 먼저 추출액내의 성분단백질의 성상을 파악할 필요가 있다. 이 연구에서는 폐흡충 성충 추출액으로 면역시킨 BALB/c mice의 비장세포와 SP2/0 형질세포종 세포를 세포융합하여 제작한 단세포군항체를 이용하여 친화성크로마토그래피로 폐흡충 성충의 구성단백질의 일부를 순수분리하고 성상을 관찰하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 세포융합으로 PFCK-21, PFCK-44, PFCK-136, PFCK-189 등 4종류의 단세포군 항체를 얻었다. 그중 PFCK-21과 PFCK44는 17k Da, PFCK-136은 23, 46, 92 kDa 단백질에 반응하였고 PFCK-189는 여러종류의 단백질에 반응하였다. 2. PFCK-44 단세포군항체를 고리로 친화성 크로마토그래피를 실시하여 분리한 성분 단백질은 disc-PAGE상 4번째에 위치하고 분자량이 17 kDa로 알려진 단밸질이었다. 이 단밸질은 17 kDa의 monomer로 판단하였다. 면역조직화학염색을 실시한 결과 이 단밸질은 장관 상피세포에 반응하고 있었다. 3. PFCK-136 단세포군항체로 순수분리한 단밸질은 disc-PAGE상 1번 단밸질(440 kDa)이었으며 환원성 SDS-PAGE에서는 23 kDa 단밸질이었다. 면역조직화학염색으로 이 단세포군항체는 충란내 세포에 강하게 반응하고 있었다.

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각 다중화 방식의 홀로그래픽 정보저장기기의 양방향틸트 보상시스템 설계 (Design of 2-axis compensation servo system for angle multiplexing Holographic Data Storage)

  • 임성용;김낙영;한초록;박경수;박노철;양현석;박영필
    • 정보저장시스템학회논문집
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    • 제7권1호
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    • pp.19-24
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    • 2011
  • Holographic Data Storage System, one of the next generation data storage devices, is a 2-dimensional page oriented memory system using volume holograms in writing and retrieving process. Recently photopolymer with disc type substrate was selected as a media for the Holographic Data Storage System. The disc tilt occurs when the media rotates and the external disturbance applies. The disc tilt causes the change of the angle between the reference beam and the media, the data cannot be retrieved with the right angle or other data page is retrieved. The tilt is generated in a 2-axis direction (tangential, radial). The tangential tilt direction is the same with the multiplexing plane, while the radial tilt direction is a perpendicular to the multiplexing plane. In this research we propose 2-axis tilt angle servo system. The tilt errors are measured by using external photo detector and the additional red laser. Then the tangential direction tilt is compensated by using the galvano mirror. Also the radial direction tilt is compensated by the rotating prism between the relay lens in the reference field. Finally we confirm the compensation results through the Signal to Noise Ratio(SNR) and Bit Error Rate(BER).

Bacillus cereus $\beta$-아밀라아제의 정제 및 이화학적 성질 (Purification and Some Physicochemical Study of Bacillus cereus $\beta$-Amylase)

  • 송예헌
    • 한국식품영양학회지
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    • 제6권4호
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    • pp.307-313
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    • 1993
  • Bacillus cereus $\beta$-amylase was purified by Sephadex G-100 gel filtration, CM Sephadex C-50 ion exchange chromatography and CM Sephadex C-50 ion exchange rechromatography The purified enzyme showed 871 unit/mg of specific activity. The purified enzyme was identified as homogenious by disc PAGE, SDS-PAGE and analysis of reaction product. The purified enzyme showed optimum pH 7.0. optimum temperature 5$0^{\circ}C$, and was stable at 0~5$0^{\circ}C$ and at pH range of 6~10.

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김치에서 분리한 Lactobacillus plantarum과 Leuconostoc mesenteroides에 대한 향신료 에탄올추출물의 선택적 항균효과 (Selective Antimicrobial Effects of Spice Extracts Against Lactobacillus plantarum and Leuconostoc mesenteroides Isolated from Kimchi.)

  • 김옥미;김미경;이갑랑;김순동
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제26권5호
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    • pp.373-378
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    • 1998
  • 김치가 젖산발효식품으로서의 특성을 유지하면서 보존성을 증진시키는 방안의 일환으로, 김치의 젖산 생성량이 낮은 초기 숙성균인 Leuconostoc mesenteroides의 생육에는 무관하면서 김치의 산패에 관여하는 Lactobacillus plantarum을 선택적으로 저해할 수 있는 항균제를 탐색하기 위하여 10여종의 향신료로부터 얻은 에탄올추출물의 항균효과를 조사하였다. Paper disc법에 의한 향신료 추출물의 항균력을 측정한 결과 10여종의 향신료 추출물중 cardamon, thyme 및 cumin의 에탄올추출물은 Lac. plantarum을 선택적으로 저해시키는 항균효과를 나타내었다. 또한 농도별에 따른 cardamon 및 thyme 추출물은 4%에서, cumin 추출물은 1% 이상의 농도에서 항균효과를 나타내었다. SDS-PAGE 및 투과전자현미경의 결과의 분석을 통하여 향신료 에탄을 추출물의 주요 항균작용은 균체 세포벽 및 세포막을 약화시키며 이로 인하여 균체세포의 내용물을 세포외로 유출시킴으로서 성장을 저해 또는 사멸시키는 것으로 나타났다.

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유조낭고충 낭액에서 친화성 크로마토그래피로 분리한 항원 단백질의 생화학적 성상 (Biochemical properties of a purified protein in cystic quid of Taenia solium metacestodes)

  • 조승열;김석일;강신영;공윤
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제26권2호
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    • pp.87-94
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    • 1988
  • Kim et at.(1986)은 유구낭미충 낭액을 감작시켜 만든 단세포군 항체를 CNBr활성화 Sepharose 4B에 연결시켜 친화성 크로마토그래피를 실시하고 낭액에서 A-항원을 분리한 바 있다. 이 연구는 그 항원 단백질의 생화학적 성상을 관찰한 것이다. Disc-PAGE에 의해 4.5~10% 폴리아크릴아마이드 젤에서 나타내는 Rf간을 기초로 분자량을 측정한 결과 A 항원의 분자량은 150,000 dalton이었다. A-항원은 SDS-PAGE에서 15,000, 10,000, 7,000 dalton에 해당하는 polypeptide로 분획이 구별되었다. 10% 2-mcrcaptoethanol로 처리하지 않거나 $95^{\circ}C$에서 5분간 처리하지 않은 A-항원의 SDS-PAGE에서는 7,000 dalton의 polypeptide가 분리되지 않았다. A-항원의 등전점(PI)은 pH6.8이었다. 낭액항원의 각 분획에 반응하는 항체를 갖는 환자혈청으로 A-항원을 SDS-PAGE/EITB한 바 환자혈청은 15,000, 10,000, 7,000 dalton에 해당하는 부위에서만 반응하였다. 낭액 단백질의 약70%를 차지하는 A-항원은 면역학적으로 내열성을 가졌으며 포충(hydatid cyst) 낭액 항원중 Oriol et at.(1971)의 "Antigen B"와 생화학적 성상이 비슷한 단백질이었다.

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미뢰함유설상피와 비함유설상피 단백질에 관한 SDS-PAGE적 비교 연구 (SDS-PAGE OF THE LINGUAL EPITHELIUM WITH SPECIAL REFERENCE TO TASTE BUDS)

  • 김현만;황성명;고재승;김정근
    • 대한치과의사협회지
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    • 제22권12호통권187호
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    • pp.1083-1089
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    • 1984
  • As a study to elucidate whether taste buds contain specific proteins, rat dorsal lingual epithelium was analysed by electrophoresis. The epithelium of the vallate papilla (with numerous taste buds), the area of the fungiform papilla 9with a few taste buds), and the area between vallate papilla and large filiform papilla (not containing taste buds) were strippled off by treatment with 0.7% EDTA. The epithelial protein was extracted by 1% SDS and 1% Mercaptoethanol in 0.01M phosphate buffer (pH7.2). Extracts were analysed by disc SDS-PAGE. Because the patterns of protein composition from each site were similar with each other as a whole, it is concluded that taste buds do not contain specific protein detected by SDS-PAGE in adult rat. But a protein on M.W. 49000 which lies in the area of molecular weight of keratin molecules was found only in the epithelium containing taste buds. This results suggested that the epithelium containing taste buds differentiate dissimilarly to the epithelium not containing taste buds.

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폐흡충 성충 생리식염수 추출액의 성분 단백질의 분자량 (Molecular weight of major component proteins in crude saline extract of adult Paragonimus westermani)

  • Yoon Kong;Woong Bong Kim;Shin-Yong Kang;Seung-Yull Cho
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제29권2호
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    • pp.113-120
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    • 1991
  • 혈청내 특이 항체가를 측정하여 폐흡충증을 면역학적으로 진단할 경우 그 민감도와 특이도가 뛰어난 것은 이미 잘 알려져 있다. 이때에 항원으로 사용하는 폐홉충 추출액의 구성 단백질 중 항원성과 특이성이 높은 단백질을 알면 항원을 질적으로 향상시킬 수 있을 것으로 기대하고 있다. 최근 SDS-PAGE/immuoblot을 이용하여 환자 혈청내의 특이 항체(IgG)와 민감하게 반응하는 폐흡충의 수용성(수준성) 항원 단백질 분획이 보고되고 있다. 그러나 이 단백질 분획은 SDS-PAGE 후 특이항체와 반응한 polypeptide 수준의 subunit이어서 이들이 분해되기 전 성분 단백질 어느 것에서 유래한 것인지를 전혀 알 수 없는 단점이 있다. 따라서, 이와 같은 문제를 해결하고 나아가 종특이(종특리) 항원 단백질을 찾기 위해서는 분해, 변성되기 전의 성분 단백질의 성질을 파악할 필요가 있다. 이 실험에서는 폐흡충 성충 생리식염수 추출액내의 구성 단백질을 파악하고 그 분자량을 측정하기 위하여 Disc-PAGE를 이용한 Ferguson plot과 column chromatography를 실시하였다. 우선 폐홉충 추출액을 4.5~10%까지의 각기 다른 gel 농도에서 전기영동을 실시한 결과 추출액은 최소 8개 이상의 주요 성분 단백질로 구성되어 있었고 각각의 분자량은 band 1은 440kDa, band 2는 386kDa, band 3은 17.4kDa, band 4는 17k3a, band 5는 14.3kDa, band 6은 46kDa, band 7은 38kDa 그리고 band 8은 23k3a 이었다. 이어 추출액을 $1.6({\Phi}){\times}70cm$의 Sephacryl S-300 Supcrfne column을 통과시켜 7분획을 얻은 후 각 분 획을 다시 85 gel에서 전기영동으로 확인한 결과 band 1은 1~3분회, band 2는 2,3분회, band 3은 5분획, band 4는 5,6분획, band 5는 5분획, band 6,7은 3,4분획, band 8은 5분회에서 각각 관찰되어 Ferguson plot에 의해 계산한 분자량과 유사한 결과를 보이고 있었다.

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