An analytical method was developed to determine tricyclazole residues in rice grain, straw, and soil using high-performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet absorption detection. Tricyclazole was extracted with methanol from moist rice grain, straw, and soil samples. n-Hexane washing was employed to remove nonpolar co-extractives during liquid-liquid partition. Tricyclazole was then extracted with dichloromethane from alkaline aqueous phase, while acidic interferences remained in the phase. Dichloromethane extract was further purified by silica gel column chromatography prior to HPLC determination. Reverse-phase HPLC using an octadecylsilyl column was successfully applied to separate and quantitate the tricyclazole residue in sample extracts monitored at ${\lambda}_{max}$ 225nm. Recoveries from fortified samples averaged $95.5{\pm}3.0%\;(n=6),\;87.5{\pm}20.%\;(n=6),\;and\;84.3{\pm}2.8%$ (n=12) for rice grain, straw, and soil, respectively. Detection limit of the method was 0.02 mg/kg for rice grain and soil samples while 0.05 mg/kg for rice straw samples. The proposed method was reproducible and sensitive enough to evaluate the safety of tricyclazole residues in rice grain, straw, and soil.
In order to determine the contents of ethyl carbamate in Korean traditional alcoholic beverages and general beverages, GC/MS-SIM method was used after extraction of beverages with dichloromethane. The contents of ethyl carbamate in Korean traditional alcoholic beverages, non-distilled alcohol, and whisky were detected in the range of $4.6-50.2{\mu}g/L$, $27.8-45.4{\mu}g/L$, and $24.8-55.1{\mu}g/L$, respectively. The recoveries were ranged from 83.3 to 104.8 %. The values of relative standard deviation were ranged from 1.8 to 14.8 % and the detection limit was $0.3{\mu}g/L$.
Methyl trans-cinnamate is a significant flavor compound of Tricholoma matsutake. Attempts were made to produce this compound by culturing the mycelium using submerged culture. No methyl trans-cinnamate could be detected when the mycelium was cultured in the basal liquid medium. However, the addition of Pinus desiflora extracts to the medium, methyl trans-cinnamate was largely produced. To find out compounds or fractions inducing methyl trans-cinnamate, dichloromethane fraction obtained from the wood extracts of P. densiflora was subjected to column chromatography. Three sub-fractions were obtained from the $CH_2CI_2$ fraction. Submerged cultured mycelium treated with sub-fraction 1 has the highest content of methyl trans-cinnamate. Maximum methyl trans-cinnamate $(470.2{\mu}g/g)$ was obtained when the first sub-fraction of dichloromethane fraction of the P. densiflora wood extracts was added to the medium. This indicates that wood extracts of P. densiflora contains inducer of the methyl trans-cinnamate production in the T. matsutake submerged culture.
Jung, Yeon Woo;Seo, Chan Gon;Lee, Ji Eun;Hong, Seong Su;Kwon, Jin Gwan;Shin, Hyun Tak;Jung, Su Young;Choi, Jeong Jun;Choi, Chun Whan;Kim, Jin Kyu
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.92-92
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2018
Silene seulensis Nakai was used as traditional medicines in Korea, we collected plant from demilitarized zone (DMZ). S. seulensis was extracted with 30, 50, and 70% ethanol and partitioned successively with n-hexane, EtOAc, dichloromethane and BuOH. These extracts (30, 50 and 70% ethanol) were evaluated the cytotoxicity on B16F10 and Hacat cell lines. The LC-MS/MS data of each fractions (n-hexane, EtOAc, dichloromethane, and BuOH) were compared with MS library, combined with ultraviolet/visual (UV/Vis) and MS data for faster determine structure by database search results. This led to the identification of four compounds (1-4) from S. seulensis. These compounds was isolated first time from S. seulensis. Their chemical structures are elucidated by combinations of NMR and mass spectrometry techniques.
This study was carried out to evaluate cytotoxic effects of Salvia miltiorrhiza extracts on NIH 3T3 fibroblasts and KB cell lines. Disruptions in cell organelles were determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The comparison of $IC_{50}$ of values of Salvia miltiorrhiza extracts in KB cell lines showed that their susceptibility to these extracts decreased in the following order: hexane extract > chloroform extract > methanol extract> dichloromethane extract > ethyl acetate extract>ethanol extract by the MTT method. The dried roots of Salvia miltiorrhiza was extracted several solvents, and then antimicrobial activity was investigated. The minimal inhibitory concentrations (MIC's) of the extract against microorganisms were also examined. Amtimicrobial activity of ketoconazol as reference was compared to those of extracts of hexane, chloroform, dichloromethane, ethyl acetate, ethanol and methanol. The antimicrobial activity of all extracts from the sample had growth inhibition activity against gram-negative bacteria, gram-positive bacteria and fungi. These results suggest that the hexane and chloroform soluble extracts of Salvia miltiorrhiza may be a valuable choice for the studies on the tumor cell lines and growth inhibition activity.
The role of cytochrome P-450 2E1 (P450 2E1) in the early phase of alcoholic fatty liver was examined. Female rats were pretreated with either allyl sulfide (200 mg/kg, po), disulfiram (500 mg/kg, po), YH 439 (250 mg/kg, po) or pyrazine (200 mg/kg/day$\times$2 days, ip). Marked changes in carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity and caboxyhemoglobin (COHb) elevation due to dichloromethane administration were observed in rats treated with one of the P450 2E1 modulators. A single dose of ethanol (6 g/kg, po) increased the hepatic triglyceride contents approximately 2 fold, which was inhibited completely by YH 439 pretreatment. However, the other P450 2E1 modulators failed to alter the ethanol-induced hepatic triglyceride accumulation. In vitro hepatic microsomal enzyme activity was determined in 4 week old premature and 12 week old adult rats. Aminopyrine-N demethylation was not different, but p-nitrophenol hydroxylation and p-nitroanisole O-demethylation were significantly higher in premature rats. However, no difference in the triglyceride accumulation induced by an intraperitoneal dose of ethanol (3 g/kg) was noted between premature and adult rats. The results suggest that the P450 2E1 activity dose not play an important role in the induction of acute alcoholic fatty liver.
This study is carried out to evaluate the genotoxicity of herbs (Angelica decursiva, Polypori umbellate, Astragalus membranaceua, Paeonia iactiflora, Glycyrrhiza uralensis, Cnidium officinale, Rehmannia glutinosa, Cyperus rotundus, Dioscorea batatas and Platycodi Radix) by using the Ames test. The Salmonella typhimurium reversion assay is being performed by using the Sal. typhimurium TA98, TA100, TA102, TA1535 and TA1537 as tester strains. Among 70% of ethanol extracts from 10 herbs, the number of revertant colonies is being increased in Astragalus membranaceua, Cnidium officinale and Dioscorea batatas in a dose-dependent manner, as compared with negative controls of the metabolic activation. In case of dichloromethane and ethyl acetate fraction from 70% of ethanol extracts, the number of revertant colonies is increased in Angelica decursiva, Astragalus membranaceua, Cnidium officinale, Rehmannia glutinosa and Dioscorea batatas in a dose-dependent manner, as compared with negative controls of metabolic activation. Such results indicate that Angelica decursiva, Astragalus membranaceua, Cnidium officinale, Rehmannia glutinosa and Dioscorea batatas all show genotoxic effects when being extracted with the solvent extractions such as 70% of ethanol, dichloromethane and ethyl acetate, and thus, they might be genotoxically- non-safe.
Park, Eun-Jung;Kim, Dae-Seon;Yu, Seong-Do;Park, Kwang-Sik
Journal of Environmental Health Sciences
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v.36
no.4
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pp.271-278
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2010
The appearance of Asian Dust (AD) originating from China and Mongolia during spring each year is a meteorological phenomenon periodically observed in extensive regions of East Asia. According to a previous epidemiological study, AD has adverse effects on both human beings and ecosystems. In this study, we collected total suspension particles (TSP) in the AD period and Non-AD (NAD) period. We extracted organic components from TSP using dichloromethane (DCM), and the polyaromatic hydrocarbons (PAHs) were analyzed. The DCM extracts contained PAHs such as benzo(b)fluoranthene, benzo[g,h,i]perylene, benzo(k)fluoranthene, benzo(a)pyrene, and pyrene. No significant difference was observed in cytotoxicity of the DCM extracts from AD versus NAD when tested on the human bronchial epithelial cells, BEAS-2B. e also examined the toxic mechanisms of AD extracts in cultured BEAS-2B cells and RAW264.7 cells, and in BEAS-2B cells observed increased levels of reactive oxygen species (ROS), decreased glutathione (GSH), and induced caspase-3 activity. Increased expression of oxidative stress-related and inflammation- related genes were also observed in BEAS-2B cells, while nitric oxide (NO) levels were increased in RAW264.7 cells. Taken together, the results suggest that in these cultured cells, AD may induce cytotoxicity through oxidative stress and pro-inflammatory signals.
Seo, Young-Wan;Kang, Sung-Ho;Lee, Hee-Jung;Kim, You-Ah;Youn, Hyun-Joo;Lee, Burm-Jong;Chung, Ho-Sung
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.11
no.2
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pp.160-163
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2006
A total number of 31 types of seaweed were assessed with regard to their effects on the proliferation of mouse spleen and thymus cells in a culture, using an MTT reduction assay. Acetone:dichloromethane (1:1) extracts of three seaweed plants: Derbesia marina, Sargassum sp., and Hisikia fuziformis, exhibited significantly positive effects on the survival of mouse spleen and thymus cells in vitro. The acetone:dichloromethane (1:1) extracts of Sargassum sp., in particular, much more potent effects on thymus cell activation than did any of the other types of seaweed. However, the methanol extracts of Sargassum ringgoldianium and Chondrus crispus exerted a stimulatory influence only on the proliferation of mouse spleen cells, whereas the methanol extracts of Grateloupia lanceolata exhibited significant cell proliferation properties in both spleen and thymus cells.
Orostachys japonicus shows various biological activities. However, the molecular mechanisms remain unknown in LPS-stimulated macrophages. Here, we investigated the anti-oxidizing effect of the dichloromethane (DCM) and hexane fractions from O. japonicus (OJD and OJH) against oxidative stress in RAW 264.7 cells stimulated by LPS. OJD and OJH significantly increased the expression of heme oxygenase-1 (HO-1) in a dose- and time-dependent manner. Additionally, it was found that the expression of HO-1 was stimulated by Nrf2 activated via degradation of Keap1. ERK and p38 inhibitors repressed HO-1 induced by OJD and OJH in LPS-stimulated cells, respectively. In conclusion, these results suggest that OJD and OJH may block oxidative damage stimulated by LPS, via increasing the expression of HO-1 and Nrf2, and MAPK signaling pathway.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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