염산 또는 수산화나트륨 수용액의 농도, 온도, 시간 등 처리조건에 따른 작잠견사의 가수분해율을 측정하였으며 산처리 작잠분말과 알칼리처리 작잠분말의 형태 및 구조특성을 주사전자현미경, 적외선 분광분석, X-선 회절분석 등의 방법으로 분석한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 작잠견사에 대한 염산 및 수산화나트륨의 처리농도와 온도가 높을수록 또한 처리시간이 길어질수록 작잠견사의 가수분해율은 증가하는 경향을 나타내었으나 고온, 고농도의 조건하에서 수산화나트륨을 작잠견사에 처리하는 경우 작잠견사의 가수분해율이 오히려 떨어지는 경향을 보였다. 2. 산 및 알칼리 처리에 의하여 제조된 작잠분말의 형태는 용해도가 30 wt% 부근에서는 섬유상의 형태를 유지하였으며 산처리 분말의 경우 용해도가 증가함에 따라 섬유축 방향으로 조각난 미세한 입자형태를 나타내었으나 알칼리처리 분말의 경우에는 부정형의 입자형태를 나타내었다. 3. 적외선 분광분석 결과 작잠분말은 처리조건과 무관하게 ${\beta}$-sheet 구조의 특성을 반영하는 1635, 1532, 1226, 960, 700 cm$^{-1}$ 흡수대와 ${\alpha}$-helix 구조의 특성을 반영하는 616 cm$^{-1}$ 흡수대가 뚜렷하게 나타나 작잠분말의 주요 conformation은 ${\beta}$-sheet 구조와 ${\alpha}$-helix 구조임을 확인하였다. 4. X-선 회절분석 결과 가수분해율이 낮을 경우 (35 wt%)에는 ${\beta}$-sheet 구조와 ${\alpha}$-helix 구조에 기인하는 회절 피크가 뚜렷하게 나타났으나 가수분해율이 80 wt% 이상으로 증가하면 2${\theta}$=17.1$^{\circ}$ 및 20.0$^{\circ}$의 회절피크만 강하게 나타났다.
Hemoglobin(Hgb)의 효소 가수분해액으로부터 고농도 heme-iron의 분리에 영향을 주는 기질의 농도, 가수분해도 (DH, degree of hydrolysis) 및 분리 pH의 효과 등을 조사하였으며, pilot scale에서 고농도 heme-iron을 생산하였다. 최적 반응조건(pH 10.0, $50^{\circ}C$, 5 hr)에서의 Esperase에 의한 Hgb의 DH는 $24{\sim}25%$였다. Hgb의 농도는 heme-iron의 분리에 영향을 미쳐서 Hgb의 농도가 2.5%, 5.0%, 10.0%로 증가할수록 heme-iron/peptide(heme-iron의 분리도)는 각각 47.4%, 35.6%, 21.8%로 감소하였으며, 이에 따라 농축율도 감소하였다. Hgb의 가수분해액으로부터 고농도 heme-iron의 분리에 효율적인 pH 영역은 DH에 따라 달라졌으며, DH가 6.3%의 경우는 pH $5.0{\sim}6$에서 heme-iron/peptide의 비가 8.92%, DH가 14.5%인 경우는 pH $4.0{\sim}6.0$에서 $12.1{\sim}19.5%$였으며, DH가 24.3%인 경우는 pH $3.0{\sim}5.0$에서 $34.7{\sim}36.4%$로 가수분해도가 높을수록 고농도 heme-iron의 분리시 최적 PH 범위가 산성 영역으로 이동되었으며, 이 영역의 pH에서 peptide의 용해도 증가로 분리도가 증가되었다. 가수분해액으로부터 분리된 heme-iron의 분자량은 약 1 kDa정도로 hematin과 유사한 분리패턴을 보였다. Pilot scale로 제조한 고농도 heme-iron 제품에서의 heme-iron 함량은 27.1%, heme-iron/peptide 비는 38.7%, 생산수율은 9.3%이었다.
키조개의 부산물을 향미제로 개발하기 위하여 반응표면분석법으로 가수분해조건을 디자인하여 키조개 부산물의 가수분해물 제조를 시도한 결과, 상업용 단백질 분해효소 11종 가운데 효소활성을 판매가격에 대한 비율로 환산했을 때 APL 440이 가장 경제성이 있었다. 그리고 키조개 부산물 가수분해과정 중 자가소화 효소에 의한 영향은 무시할 정도로 적었다. 반응표면분석결과 얻어진 가수분해율(%DH)은 $%DH=51.126+2.419pH+2.415T-2.426S-2.846pH^2-4.211T^2-3.014t^2+2.419S2$였다. 그러나 정상점이 안장점을 나타내am로 능선분석(반경 0.5) 결과 최대점은 pH 10.2, 온도 $61.4^{\circ}C$, 기질농도 30.9%, 기질에 대한 효소농도 0.32%에서 2.58시간 가수분해할 때이며, 실제 이 조건에서 61.80%의 가수분해율을 보였다. 분말화한 가수분해물은 아미노질소 및 염도가생시료에 비하여 각각 3.5배 및 7.7배 증가하였다.
두유의 저분자화 가수분해 시간(30, 60 및 90분)에 따른 품질 및 기능성 변화를 조사하였다. 그 결과 pH는 가수분해 시간에 따른 큰 차이 없이 대조구에 비해 낮았고, 당도는 가수분해 시간이 길어짐에 따라 감소하였다. 가수분해도 및 칼슘내인성은 가수분해 시간이 지남에 따라 증가하였다. 유리당은 glucose, fructose 함량은 가수분해 시간이 경과됨에 따라 증가하였고, sucrose와 maltose는 감소하는 경향을 보였으며 총 유리당 함량은 가수분해 시간 60분에서 827.65 mg%로 가장 높게 나타났다. 총 유리아미노산 함량은 가수분해시간 60분에서 85.80 mg%로 가장 높았고 모든 가수분해구가 대조구에 비해 높았으며 필수아미노산 또한 가수분해 시간이 경과됨에 따라 크게 증가되었다. 저분자화 경향을 확인하기 위한 SDS-PAGE에서 모든 가수분해구간이 분자량 33 kDa 이하로 나타났다. 두유의 기능적 특성으로 전자공여능, superoxide radical 소거활성 및 ACE 저해활성을 비교한 결과 가수분해 시간이 지남에 따라 높은 활성을 나타내었다. 이상의 결과 저분자화 두유 가수분해 시간 60분에서 전반적 품질 특성이 가장 우수하여 향후 다양한 기능성 강화 저분자 두유의 개발이 기대되었다.
We compared the fermentation of 0 to 4 weeks by manufacturing a rapid low salt-fermented seahorse with a commercial Protamex added to the functional food, Hippocampus abdominalis. We studied amino acid composition, content and major amino acids related to flavor during the fermentation process of salt-fermented seahorse. In the enzyme-free group, it showed little change in the content of non-protein nitrogenous compounds, the content of amino acids and degree of hydrolysis. The Protamex enzyme treatment group was rapidly hydrolyzed in one week of ripening, resulting in increased non-protein nitrogenous compounds content, amino acid content and degree of hydrolysis, and minimal changes in the four weeks. The total amino acid contents ratio showed the highest content of glutamic acid in the enzyme additive group, glycine, alanine, which indicates sweet taste, and serine, the content of glycine, alanine, serine, and lysine, indicating sweet taste, has increased significantly over the enzyme-free group. Twenty species of free amino acid in the four-week of salt-fermented seahorse were detected. It detected 43.0% (6 species) in the enzyme-free group and 63.96% (7 species) in the enzyme additive group.
Yoon, Ho Dong;Karaulova, Ekaterina P.;Shulgina, Lilia V.;Yakush, Evgeni V.;Mok, Jong Soo;Lee, Su Seon;Xie, Chengliang;Kim, Jeong Gyun
Fisheries and Aquatic Sciences
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제18권1호
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pp.13-20
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2015
Calculated chemical scores (computed in relation to the FAO/WHO reference protein) for salmon liver protein hydrolysates indicated that all amino acids (other than methionine and threonine) were present in adequate or excess quantities; thus, the raw liver material is a good source of essential amino acids. The hydrophobic amino acids contents in hydrolysates prepared from Oncorhynchus keta and O. gorbuscha were 38.4 and 39.1%, respectively. The proportion of released peptides exceeding 500 kDa was reduced when hydrolysates were treated with the commercial enzyme Alcalase, although proportions in the following MW ranges were elevated: 100-500 kDa and <50 kDa. The optimal conditions for enzymatic hydrolysis were as follows: pH 7.0, $50^{\circ}C$, and a reaction time of 1 h. Of the different proteases tested, Alcalase was the most efficient for production of salmon liver hydrolysate with the highest 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) scavenging activity. The hydrolysates prepared from salmon liver had a balanced amino acid composition. The liver protein hydrolysates contained low molecular weight peptides, some of which may be bio-active; this bio-active potential should be investigated. Inhibition of the DPPH radical increased with increased degree of hydrolysis (DH), regardless of protease type. DPPH radical scavenging abilities, antithrombotic effects and ${\alpha}$-glucosidase enzyme inhibition effects of O. keta liver hydrolysate increased in a dose-dependent manner. Thus, salmon liver hydrolysate may be useful in functional food applications and as a source of novel products.
본 연구에서는 분리대두단백질에 단백질 가수분해효소를 처리하여 대두단백질에 가수분해적 변성을 야기하여 그 기능성을 변화 고찰하고 실제 식품에의 이용방법으로 효소처리된 두유로 두부를 만들어 물성실험과 관능평가를 실시하였다. 장엽에서 SPI를 제조한 후 15분간 bromelain으로 처리하여 2.7% 가수분해된 MSPI를 만들어 기능특성을 측정 비교하였다. MSPI는 전 pH범위에서 용해도가 증가하였고, 특히 등전점에서 15% 정도 증가하였다. 유화형성력과 기포팽창력은 증가하였으나 이들의 안정성은 감소하였는데, 특히 기포안정성은 알칼리쪽에서 급격히 감소하였고, 등전점에서는 가장 큰 것으로 나타났다. 표준두유와 변형두유를 혼합하여 제조한 두부로 물성실험과 관능평가를 실시하였을 때 압착실험에서는 변형두부I이 연하고 탄력성 있는 두부를 형성하는 것으로 나타났다. 각 두부의 물성모형은 spring 한개와 Maxwell 모형 세개를 가진 7요소모형으로 동일한 물성모형을 나타내었다. 관능평가에서는 표준두유와 변형두유를 3 : 1의 비율로 혼합하여 제조한 두부의 품질이 가장 우수한 것으로 평가되었다.
This study aimed to determine the degree of hydrolysis and angiotensin-I-converting enzyme (ACE)-inhibitory activity of Giant Jellyfish Nemopilema nomurai (jellyfish) hydrolysates. The degree of hydrolysis using six proteolytic enzymes (Alcalase, Flavozyme, Neutrase, papain, Protamex, and trypsin) ranged from 13.1-36.8% and the inhibitory activities from 20.46-79.58%. Using papain hydrolysate, we newly isolated and characterized ACE-inhibitory peptides with a molecular weight of 3,000-5,000 Da that originated from jellyfish collagen. The purified peptide (FII-b) was predicted to be produced from an alpha-2 fragment of the type IV collagen of jellyfish. The N-terminal sequence of FII-b was Asp-Pro-Gly-Leu-Glu-Gly-Ala-His-Gly- and showed 87% identity to the collagen type IV alpha-2 fragment of Rattus norvegicus and a predicted protein from Nematostella vectensis, indicating that the ACE-inhibitory peptide originated from the collagen hydrolysate and had an $IC_{50}$ value of 3.8 ${\mu}g$/mL. The primary structure of the fragment is now being studied; this peptide represents an interesting new type of ACE inhibitor and will provide knowledge of the potential applications of jellyfish components as therapies for hypertension.
산가수분해법과 칼럼크로마토그라피법을 이용하여 레반 올리고당과 저분자량 레반을 생산하였다. 레반에 대한 산가수분해반응은 시간의존적으로 비례적으로 진행되었으며, 다른 미생물 유래의 레반을 사용시에도 동일한 결과를 나타내었다. 레반 올리고당의 제조를 위한 최적화된 조건은 5% 레반을 0.38 M 황산, 95$^{\circ}C$, 4분간 처리하였을 때였으며, 최종생산물로 중합도 3-6의 레반 올리고당을 얻었다. 생성된 레반을 올리고당을 탄소 원으로 이용하여 두 젖산 생성균주(Lactobacillus plantaurm KCTC 3104와 Pedioccccus pentosaceus KCTC3507)의 생장배지에 첨가하고 레반 자체를 첨가한 배지와 비교시, 뚜렷한 생육촉진효과와 pH 감소효과가 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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