This study was designed to investigate the effect of silk fibroin (Mw 500)power (SFP) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in liver membranes of rats. Sprague-Dawley (SD) male rats (160$\pm$10 g) were fed basic diet (control group), and experimental diets (SFP-2.5 and SFP-5.0 groups) added 2.5 and 5.0 g/kg BW/day for 6 weeks. Hydroxyl radical (.OH) levels resulted in a considerable decreases (5.8% and 8.4%, 3.7% and 11.1%, respectively) in liver motochondria and micorsomes of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group, and $O_2$radical level was remarkably decreased about 15% and 20% in liver cytosol of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Lipid peroxide (LPO) levels were significantly decreased (8.3% and 18.0%, 13.4% and 18.4%, respectively) in liver mitochondria and microsomes of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Oxidized protein (OP) levels were remarkably decreased about 11.6% in liver mitochondria of SFP-5.0 group compared with control group. Mn-SOD activities were remarkably in creased (17.6% and 28.8%, respectively) in mitochondria of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups, and Cu/Zn-SOD activities were also effectively in creased (about 14.4%) in liver cytosol of SFP-5.0 groups, but significant difference between GSHPx activity in liver cytosol of these two groups could be not obtained. These results suggest that anti-aging effect of silk fibroin may play an effective anti-aging role in a aattenuating a oxidative stress and increasing a scavenger enzyme activity in liver membranes.
The previous report (Chung and Lee, 1992) in our laboratory demonstrated that the protein kinase C (PKC) activator, TPA, promotes the elongation of corn coleoptiles significantly. To understand the role of TPA on the growth, substrates of PKC were investigated using PKC partially purified from soybean by DEAE-52 cellulose column. The enzyme activity increased about 5-fold in the presence of $Ca^{2+}$, phosphatidylserine and diolein compared with that in the absence of these reagents. Phosphorylation of both cytosol and membrane proteins by the purified PKC increased in the presence of $Ca^{2+}$ compared with that of EGTA treatment. However, the phosphorylation did not increase markedly by treatment with TPA or phosphatidylserine and diolein in the presence of $Ca^{2+}$ compared with $Ca^{2+}$ alone. The decrease, in phosphorylation of 100, 61 and 43 Kd proteins of the cytosol, and 140, no, 66, 47 and 32 Kd membrane proteins in hypocotyls, and 140, no, 66, 47, 33, 31 and 16 Kd membrane proteins in the root was observed in the presence of PKC inhibitor staurosporine (5T A). These results suggest that subatrates of PKC in soybean may be 110, 63 and 41 Kd proteins of the cytosol, and 140, 110, 66, 47 and 32 Kd membrane proteins in the subapical region of the hypocotyl, and 140, 110, 66, 47, 33, 31 and 16 Kd membrane proteins of the root.e root.
This study was designed to investigate the effects og $10{\%},\;20{\%}\;and\;40{\%}$-addition of functional brown algae (FBA)-noodles on oxygen radicals and their scavenger enzymes in liver of Sprague-Dawley(SD) male rats. Hydroxyl radicals$({\cdot}OH)$ formations were significantly inhibited$(20{\~}35{\%}\;and\;12{\~}20{\%})$ in liver mitochondria and microsomes of rats administered $0{\%},\;20{\%}\;and\;40{\%}$ FBA-noodles compared with that of control group. Significant differences in $H_2O_2$ formations of liver microsome in these FBA-noodles fed groups could not be obtained, but superoxide-radical $(O_2^({\cdot}-))$ formations of liver cytosol resulted in a significant decrease about $10{\%}\;in\;20{\%}\;and\;40{\%}$ FBA-noodles compared with control group. Mn-SOD activities in liver mitochondria were significanlty increased $(10{\~}15{\%})$ in the groups fed $10{\%},\;20{\%}\;and\;40{\%}$ FBA-noodles, while a group administered $40{\%}$ FBA-noodle only resulted In a significant increases $(about 12{\%})$ in Mn-SOD activity of liver microsomes compared with control group. Cu, Zn-SOD activities in liver cytosol were significantly increased $(10{\~}20{\%})\;in\;10{\%},\;20{\%}\;and\;40{\%}$ FEA-noodles compared with control group. Administration of $10{\%},\;20{\%}\;and\;40{\%}$ FBA-noodles resulted in a marked increases$(20{\~}40{\%})$ in liver cytosolic glutathione peroxidase (GSHPx) compared with control group. Significant differences in lipid peroxide (LPO) levels of mitochondria and microsomes in $10{\%}$ FBA-noodle could not be obtained, while LPO levels of $20{\%} and 40{\%}$ FBA-noodles were significantly inhibited about $10{\%}$ in mitochondria and microsomes compared with control group. These results suggest that these FBA-noodles may play a desirable role in attenuating an oxygen radical formations and increasing a scavenger enzymes activity by some brown algae (Undaria pinnatifida) components.
There is a marked increase in geriatric disease, especially liver disease, due to the continuous increase in alcohol and fat consumption. Since the fatty liver, induced by alcohol or fat, is basically from abnormalities in the lipid metabolism, it is possible that fatty acid binding protein(FABP) which is related to the fatty acid metabolism may also be abnormal in these livers. FABP is a small molecular weight protein family present in cytosol in high concentration. It has been proposed as a fatty acid transfer protein and as a binding protein responsible for controlling intracellular free fatty acid concentration. In this research, we have examined the relationship between liver FABP and fatty liver induced by alcohol or high cholesterol diet. Rats were fed one of either semipurified liquid diets; control diet containing 65% carbohydrate, 20% protein, and 15% fat or high cholesterol diet containing 1%(w/w) cholesterol or alcohol diet containing 37% of alcohol instead of carbohydrate. After 5 weeks of feeding period, all rats received commercial chow diet for 5 weeks to examine recovery effect. Liver and blood samples were collected at 0, 1, 3, 5 and 10 weeks to analyze lipid compositions. FABP was purified from liver cytosol and injected to rabbit to obtain antiserum. Liver FABP amount was determined by SDS-PAGE and western blotting methods. Fatty acid binding capacity was determined by binding of 14Cpalmitate with the delipidated liver cytosol. Consumption of alcohol increased serum cholesterol, triglyceride concentration and decreased HDL-cholesterol concentration after 5 weeks. Serum apolipoprotein B concentration increased after 3 weeks and LDL-cholesterol and apolipoprotein A concentration changed after 1 week. Liver cholesterol and triglyceride concentration increased after 3 weeks. Consumption of high cholesterol diet changed liver and serum lipid composition after 3 weeks. Swiching to normal diet for 5 weeks did not normalize most of lipid composition in serum and liver except serum and liver except serum cholesterol, triglyceride and liver cholesterol. Liver cytosol FABP content and the fatty acid binding capacity decreased dramatically after 1 week with alcohol consumption. This results indicate that FABP content changes before the changes before the changes of blood or liver lipid composition, suggesting changes of FABP may cause development of the fatty liver induced by alcohol and can be used as an index of detecting a early development of fatty liver.
Cha, Young-Nam;Thompson, David C.;Heine, Henry S.;Chung, Jin-Ho
The Korean Journal of Pharmacology
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제21권1호
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pp.1-11
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1985
The effects of feeding indole, indole-3-carbinol and benzofuran (all at 5 mmole/kg body wt./day) on various hepatic microsomal and cytosolic enzyme activities involved in xenobiotic metabolism have been compared. Benzofuran was found to elevate the activities of many enzymes both in microsomes (e.g., aniline hydroxylase, 7-ethoxycoumarin O-deethylase, p-nitrophenol UDPGA-transferase and epoxide hydrolase) and in cytosol (e.g., glutathione reductase, glutathione S-transferase, NADH:quinone reductase and UDP-glucose dehydrogenase). The structures of indole and indole-3-carbinol are similar to benzofuran except for the substitution of nitrogen with oxygen atom within the furan ring. Results showed that the activities of UDPGA-transferase and NADH:quinone reductase were not elevated by these indole compounds. While the chemical structure of these two indole compounds are identical except for the presence of the carbinol (methanol) group in indole-3-carbinol, there were marked differences in the types and activities of microsomal enzymes that were enhanced. Among the microsomal enzyme activities determined, indole elevated only the NADPH:cytochrome c reductase, while indole-3-carbinol increased several mixed function oxidase and particularly the epoxide hydrolase activities. Based on the chemical structures of tested compounds and the observed results, possible explanations for the mechanisms involved in elevating epoxide hydrolase activity by benzofuran and indole-3-carbinol are discussed.
Proceedings of the Korean Biophysical Society Conference
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한국생물물리학회 1997년도 학술발표회
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pp.22-22
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1997
The physiological activity of tracheal epithelial cells is closely related with the ionic conditions of cytosol, specially the concentration of cytosolic Ca$\^$2+/. We have prepared microsomes in these cells and the molecular mechanisms of ionic regulations were investigated.(omitted)
Despite the growing body of evidence suggesting a role for MsrA in antioxidant defense, little is currently known regarding the function of MsrB in cellular protection against oxidative stress. In this study, we overexpressed the mammalian MsrB and MsrA genes in Saccharomyces cerevisiae and assessed their subcellular localization and antioxidant functions. We found that the mitochondrial MsrB3 protein (MsrB3B) was localized to the cytosol, but not to the mitochondria, of the yeast cells. The mitochondrial MsrB2 protein was detected in the mitochondria and, to a lesser extent, the cytosol of the yeast cells. In this study, we report the first evidence that MsrB3 overexpression in yeast cells protected them against $H_2O_2$-mediated cell death. Additionally, MsrB2 overexpression also provided yeast cells with resistance to oxidative stress, as did MsrA overexpression. Our results show that mammalian MsrB and MsrA proteins perform crucial functions in protection against oxidative stress in lower eukaryotic yeast cells.
Objective: This investigation aimed to determine effects of celecoxib on the cell cycle kinetics of the gastric cancer cell line MGC803 and the mechanisms involved by assessing expression of cytochrome C and caspase-9 at the protein level. Methods: Cell proliferation of MGC803 was determined by MTT assay after treatment with celecoxib. Apoptosis was assessed using fluorescence staining and cell cycle kinetics by flow cytometry. Western blotting was used to detect the expression of caspase-9 protein and of cytochrome C protein in cell cytosol and mitochondria. Results: Celecoxib was able to restrain proliferation and induce apoptosis in a dose- and time-dependent manner, inducing G0/G1 cell cycle arrest, release of cytochrome C into the cytosol, and cleavage of pro-caspase-9 into its active form. Conclusion: Celecoxib can induce apoptosis in MGC803 cells through a mechanism involving cell cycle arrest, mitochondrial cytochrome C release and caspase activation.
Kim, Jeong-Soo;Cho, Jeom-Deog;Park, Hong-Soo;Kim, Kyung-Soo
The Plant Pathology Journal
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제16권4호
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pp.211-215
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2000
Symptoms on 4 varieties of watermelons inoculated with watermelon mosaic potyvirus II isolated from watermelon (WMV-W) were severe mosaic and leaf malformation while those inoculated with cucumber green mottle mosaic tobamovirus from watermelon (CGMMV-W) were mild mosaic and chlorotic spots. Inoculation of the mixture of WMV-W and CGMMV-W produced extremely severe mosaic along with necrotic spots and general necrosis. Doubly infected plants were also stunted. Cells infected with WMV-W or CGMMV-W alone exhibited the intrinsically ultra-structural properties of each virus infection. WMV-W induced potyvirus-characteristic cylindrical inclusions in the cytosol. Virus particles were orderly aligned along the tonoplasts. CGMMV-W induced tobamovirus-characteristic stacked crystalline arrays of virus particles in the cytosol. Cells infected doubly with WMV-W and CGMMV-W contained striking cytopathic effects that were not present in single infection of each virus. The unique ring structure, nonagon, was that a single potyvirus particle was surrounded by 9 CGMMV-W tobamovirus particles.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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