Tapetum is the tissue in which nutrients are supplied to the developing microspore in angiosperm anther. At tetrad stage of microspore, the tapetal cells show maximum development, but they began to be degenerated by apoptotic programmed cell death (PCD) after sporopollenin accumulation in the pollen wall. The initial step of PCD was observed as vacuolar fusion. After that, cytoplasmic condensation and nuclear fragmentation followed. Lipid droplets are degenerated at a relatively late stage of PCD, and orbicular bodies are the last remains in tapetal cells. The cell wall was relatively resistant against vacuolar enzymes in tapetal cells; it was considered the last structure remaining during programmed cell death of tapetum in ginseng anther.
The fine structural characteristics of the apoptotic cells in the cutaneous epithelium of the anuran tadpole of the black-spotted frog, Rana nigromaculata was examined using the TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotinylated d-Uridine triphosphate Nick End Labeling) staining technique and TEM (transmission electron microscopy) observations. The cutaneous epithelium of the tadpole was composed of stratified cuboidal cells and the apoptotic cell death was observed continuously during the tail degeneration stages from the Shumway stage number 31 to 33. The early apoptotic cells shown in the epithelium demonstrated condensation and margination of the chromatin material at the nuclear periphery, and nuclear breakdown and cytoplasmic condensation were followed. Subsequent cytoplasmic degeneration of the apoptotic cell were produced by membrane-bounded cell fragments with relatively well preserved organelles. Following the processes of autophagic degradation, the late apoptotic cells being phagocytosed by other surrounding cells. These nearby cells, presumptive intraepithelial macrophages, contain a variety of lysosomal residual bodies which fuses with other cell organelles or other cytoplasmatic material to form secondary lysosomes. They are soon transformed into lamellar shaped vesicles and finally disappeared during the process of degradation.
In order to investigating the pulmonary toxicity of the O-chlorobenzyledene malononitrile (CS), lacrimating agent, $2.6g/m^3$ of CS was inhalated to Sprague-Dawley rats in the plastic chamber for 20 minutes. The ultrastructural changes of type II pneumocytes in the lung were observed with Hitachi 600 transmission electron microscope. The results obtained were as follows: 1. 3 hours after exposure to CS the fusion of surface microvilli, dilatation of cristernae of the rough endoplasmic reticulum, atrophy of Golgi complex and condensation, deletion of lamellated membranes in lamellar bodies were observed in type II pneumocytes. 2. One and 2 days after CS-exposure, disorganization of mitochondrial double membranes, fragmentations of rough endoplasmic reticulum were found in the great alveolar cells. In addition, decrease in amount of polyribosome granules and deletion or condensation of lamellated membranes in lamellar bodies were also observed. 3. 4 days after exposure to CS, the type II pneumocyte revealed new whorled lamellar membranes in lamellar bodies, a few intact rough endoplasmic reticulum and restoration of polyribosome granules. It is consequently suggested that CS induces degenerative changes of cytoplasmic organelles in the type II pneumocytes.
Metallothionein gene expression activity of cadmium was investigated in a human lung epithelial cell line. Cells, grown to near confluence, were exposed to 0∼10 ${\mu}$M Cd metal for 6 hours. Cadmium did not cause morphological alteration in lung epithelial cells that are characteristic of cell damages such as cell shrinkage, detachment of the cell from its neighbors, cytoplasmic and chromatic condensation. However, metallothionein genes of MT-1 and MT-2 were rapidly induced in the treated cell measured by RT-PCR. Regarding the induction pattern of motallothionein mRNA, MT-1 mRNA was induced in a dependent manner. MT-2 mRNA induction, which was measured using oligo primers based on cDNA of human reticulocytes, seemed to be slightly increased in low doses but decreased at high concentration used in the experiment.
Ursodeoxycholic acid (UDCA) and lithocholic acid (LCA), secondary bile acids, have been shown to have a cell differentiation activity in mouse F9 teratocarcinoma stem cells. Treatment with bile acids induced morphological changes, including cytoplasmic and nuclear membrane blebbing, aggregation of organelles, and chromatin condensation, corresponding to apoptosis. Moreover, the bile acids induced intemucleosomal DNA fragmentation, a hallmark of apoptosis. In addition, the expression of c-jun was increased, but that of c-myc and laminin was decreased during apoptosis induced by the bile acids in F9 cells. These results suggest that the bile acids can induce apoptosis in F9 cells. Furthermore, the c-jun expression may be related to the apoptosis induced by UDCA or LCA in F9 cells.
The Urechis unicinctus sperm and spermatogenic cells prepared from the testis are investigated to identify $\alpha-tubulin$ of axoneme microtubules using mouse monoclonal $anti-\alpha-tubulin$ as the first Ab and Gold(10nm) conjugated goat anti-mouse IgG as the Ab marker. The Ag-Ab reaction analyzed excellently the localization of $\alpha-tubulin$ and the gold particles incorporated with the proximal and distal centrioles, manchette microtubules, and flagellum. The gold particles can be also observed in the spermatogenic cells while the cells are still in sperm ball which is composed of a somatic cell and spermatogenic cells. The sperm ball is the functional unit of sperm production in U unicinctus testis. The spermatids are developed from the spermatogenic cells in the sperm ball and released into the testis cavity through a cortical cytoplasmic opening. The spermatid architectures are similar with the mature sperm of the testis cavity in aspects of shape of discoid acrosome, degree of nuclear condensation and ring type of mitochondrion. However, the distal centriole connecting with the flagella can be observed from the mature sperm while the both proximal and distal centrioles reveal only in the spermatids. The proximal centriole is directly connected with nuclear outer membrane during the stage of nuclear condensation and oriented perpendicularly to the distal centriole whose axis coinciding with the longitudinal axis of the spermatozoon. There are indications that the distal centriole is intimately associated with the polymerization of the flagellum. The manchette microtubules appear during spermatid development but the mature sperm have round head and no conspicuous middle piece.
Cytotoxicity of dental restorative materials using cell culture technique has been extensively studied by various quantitative assays. The aim of this study was to investigate the microstructural change of damaged L292 cells which could not observed with light microscope. Cytotoxic effect of ZOE, Prisma APH (Densply International Inc., U.S.A.), Clearfil FII(Kuraray Co., Japan), Fuji II(GC Co., Japan) and Fuji II LC(GC Co., Japan) on cultured L292 cells were observed. Irreversible cell damage and cytolysis were found in ZOE and Fuji II groups. In Clearfil FII, mild to moderate cell damage was observed. APH group showed variable cytotoxicity. Moderate cell damage was found in Fuji II LC group. Cytotoxic effect were as follows : A condensation of the chromatin occureds along or adjacent to the inner membrane of the nuclear envelops. The nuclear envelope remained resonably intact but the contents were partially or completely lost. The cell nucleus contains clusters of markedly electron-dense interchromatin granules. The rough endoplasmic reticulum were dilated. In some mitochondira, matrix was disoriented and fused cristae were discernible. Mitochondiral swelling and woolly appearance were recognized. Large vacuoles and autolysosmes were found in cytoplasm. Some breaks of the cytoplasmic membrane and even cytolysis could be seen in dying cells.
Park, Won-Chul;Son, Joo-Young;Chung, Sook-Hyun;An, Woon-Gun
Preventive Nutrition and Food Science
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v.7
no.2
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pp.128-132
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2002
The present study was performed to observe the role of protein kinase C (PKC) inhibitors (H-7, staurosporine) and daunorubicin in the cell death process of MCF7 cells; and examined whether or not the type of induced cell death was apoptosis. The usefulness of the combined therapy of PKC inhibitors and daunorubicin to improve the adverse effect of daunorubicin was also investigated. Cell death was induced by treatment with PKC inhibitors or daunorubicin. Characteristic morphologic features of cell shrinkage, chromatic condensation, and cytoplasmic vacuolization were observed. These treatments also stimulated the cleavage of poly-(ADP-ribose) polymerase (PARP), an early event in apoptosis. With slight differences in the percentage of apoptosis-induced cells, staurosporine, H-7 and daunorubicin effectively induced apoptosis in MCF7 cells. Furthermore, combined treatment of PKC inhibitors and daunorubicin significantly drove the cells into an apoptotic state. Hence, our results revealed the possible therapeutic value of combined therapy for the prevention of drug resistance and adverse side effects.
The programed cell death of the cutaneous epithelial tissue during tail regression stages in anuran tadpoles of the blackspotted frog, Rana nigromaculata were visualized by the histochemical and transmission electron microscopic techniques. Metamorphotic changes in the tail regression during the period of the Shumway stage number 31 to 33 are characterized by the disappearance of mucous layer and formation of compound epithelium through cutaneous thickening. Following the TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotinylated d-uridine triphosphate nick end labeling) staining technique, the apoptotic cells were detected at the distal region of the tail skin initially, but they can be seen at the proximal region according to their following development. It has been also revealed that the number of the TUNEL-positive cells gradually increased from apical to basal direction of the epithelial layers during the tail regressing stages. Following the TEM observation, the early apoptotic cells shown in the epithelium demonstrated condensation and margination of the chromatin material at the nuclear periphery. Another epithelial apoptotic cells were shown nuclear fragmentation, membrane blebbing and cytoplasmic condensation. Following the process of the apoptotic degradation, well preserved organelles and nuclear fragments can be identified in the cytoplasm of lysosome-rich cells, however they soon reduced to lysosomal residual bodies through the progressive degradation.
Small cell carcinoma of the lung is characterized by cells with finely stippled chromatin and scanty cytoplasm as well as a particularly aggressive clinical course and favorable response to the chemotherapy. Recently percutaneous fine needle aspiration (FNA) biopsy has become both widely established and highly respected for the diagnosis of lung cancer. However metastatic small cell carcinoma of lymph node should be cytologically differentiated from the small round cell tumor of particular sites, especially malignant lymphoma, because small ceil carcinoma of classic oat cell type nay simulate small cell non-Hodgkin's lymphoma. We report five cases of metastatic small cell carcinoma of in-termediate cell type diagnosed by FNA of the enlarged lymph nodes of the neck and axilla. The cytologic smears contained diffuse small neoplastic cells larger than lymphocytes with dense, pyknotic nuclei and extremely scanty cytoplasm. Apparently viable large tumor cells have vesicular nuclei with granular, sometimes very coarse chromatin. The characteristic cytologic features of small cell carcinoma as compared to malignant lymphoma were as follows.: 1) small cells with dense pyknotic nuclei are evenly distributed in the background of apparently viable larger tumor cells, admixed with mature lymphocytes and phagocytic macrophages. 2) small loose aggregates of cells with nuclear melding are indicative of small cell carcinoma rather than non-Hodgkin's lymphoma. 3) the cytoplasmic and nuclear fragments of tumor necrosis are more dominant in the smears of small cell carcinoma. 4) nuclear membrane and nucleoli are generally indistinct in small cell carcinoma due to condensation of chromatin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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