• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권12호
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• pp.1930-1936
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• 2007

A sequential optimization strategy based on statistical experimental designs was employed to enhance the production of cyclosporin A (CyA) by Tolypocladium inflatum DSMZ 915 in a submerged culture. A 2-level Plackett-Burman design was used to screen the bioprocess parameters significantly influencing CyA production. Among the 11 variables tested, sucrose, ammonium sulfate, and soluble starch were selected, owing to their significant positive effect on CyA production. A response surface methodology (RSM) involving a 3-level Box-Behnken design was adopted to acquire the best process conditions. Thus, a polynomial model was created to correlate the relationship between the three variables and the CyA yield, and the optimal combination of the major media constituents for cyclosporin A production, evaluated using the nonlinear optimization algorithm of EXCEL-Solver, was as follows (g/l): sucrose, 20; starch, 20; and ammonium sulfate, 10. The predicted optimum CyA yield was 113 mg/l, which was 2-fold the amount obtained with the basal medium. Experimental verification of the predicted model resulted in a CyA yield of 110 mg/l, representing 97% of the theoretically calculated yield.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제33권4호
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• pp.643-650
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• 2003

Cyclosporin-A(CsA)는 장기와 조직 이식에 따른 거부반응을 조절하기 위해 사용되는 면역억제제로, 이식의학의 발달과 더불어 사용량이 증가하고 있다. CsA의 부작용중의 하나인 치은과증식은 30-50%의 빈도로 발발하고 있다. 최근 macrolide 계열의 항생제인 azithromycin을 이용하여 이런 부작용을 억제시킨다는 임상 보고가 있어서, 이를 실험적으로 확인하고자 하였다. 이를 위해 CsA를 투여한 적이 없는 환자에서 정상 치은조직을 채취, 치은섬유아세포를 배양하였다. 우선 CsA에 대한 치은섬유아세포의 반응을 보기 위해 다양한 농도($10^{-8}-10^{-10}$g/ml)로 처치하여, 세포 증식량과 교원질 합성량을 MTT assay와 Sirol Collagen Assay를 이용하여 측정하였다. 이에 반응을 보인 조건과 세포를 대상으로 다양한 농도($10^{-8}-10^{-10}$g/ml)의 azithromycin을 CsA와 동시 처치하여 아래와 같은 결과를 얻었다. 1. CsA는 일부 치은섬유모세포의 증식을 증가시켰다. 그러나 Collagen 합성능에는 변화를 주지 않았다. 2. Azithromycin은 정상 치은섬유아세포의 증식능에 영향을 미치지 않았다. 3. Azithromycin은 CsA 에 반응을 보인 세포의 증식을 감소시켰으며, 이는 정상 수준과 유사하였다. 이상의 결과에서 azithromycin이 CsA에 의한 치은과증식 치료에 유익하다고 사료된다.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
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• 제39권1호
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• pp.59-63
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• 2009

Soybean phosphatidylcholine microparticles loaded with cyclosporin A (CsA) were prepared by the modified emulsion solvent diffusion and ionic gelation method, in which chitosan on the surface of the microparticles was crosslinked with various concentrations of tripolyphosphate (TPP). The morphology of the particles was characterized by scanning electron microscopy (SEM). The change of particle size and zeta-potential by chitosan on the surface of the lipid microparticles were systematically observed. The encapsulation efficiency and loading capacity of CsA in the particles were determined by high performance liquid chromatography (HPLC). In vitro release kinetics was studied using the dialysis method. In the results, the mean particle size and the zeta-potential of lipid microparticles increased when the attached chitosan was cross-linked (from 2.5 to 6.2 ${\mu}m$ and from -37.0 to +93.0 mV, respectively). The cyclosporin A-loaded lipid microparticles appeared discrete and spherical particles with smooth surfaces. The encapsulation efficiency of CsA was between 79% and 90% while the loading capacity was between 41% and 56%. In vitro release study showed that the crosslinkage of chitosan by TPP significantly delayed the release of CsA from the particles in a concentration-dependent manner. Thus, the release of CsA from the lipid microparticles could be controlled by tripolyphosphate used as a cross-linking agent.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권5호
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• pp.1047-1053
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• 2005

Cyclosporin A binding protein type-19 kDa peptidyl-prolyl cis/trans isomerase (PPIases, EC 5.2.1.8) of Euglena gracilis was purified and some of its biochemical characters were elucidated. Purification of the PPIase was achieved by employing a series of steps involving ammonium sulfate precipitation, Superdex G-75 gel filtration chromatography, Mono­Q anion and Mono-S cation exchange chromatographies, and Superdex S-200 gel filtration chromatography on FPLC. Purified PPIase had a specific activity of 8,250 units/mg, showing a 27-fold increase compared with that of cell-free extract of Euglena gracilis. The enzyme consisted of a single polypeptide chain with a molecular mass of 19 kDa. It showed high substrate specificity to succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilide, and $k_{car}/K_{m}$, for this substrate was found to be $61.19{\times}10^5/sec$. The isomer distributions were investigated at an equilibrium of seven different peptide substrates, varying Xaa in Suc-Ala-Xaa-Pro-Phe-p-nitroanilide in dimethylsulfoxide. The cis/trans equilibrium constants were estimated to be from 0.14 (Ile) to 0.63 (Gly), which correspond to $12.00\%\;to\;38.52\%$ of the cis population, respectively, under experimental condition. The enzyme was highly sensitive to the immunosuppressive ligand cyclosporin A, but not to other immunosuppressants such as FK506 and rapamycin. Thus, it appears to belong to the class of cyclophilin.

• 동국한의학연구소논문집
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• 제2권2호
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• pp.1-15
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• 1993

The purpose of this study is to observe the effect of Woogyuyem on serum reaction and hepatic tissue in Cyclosporin A treated rats. In this study, the experimental rats divided two group(Control group and Sample group). Under the same condition, both control group and sample group were injected to abdomen with Cyclosporin A for 7days. And then, control group were administered water, sample group were administered Woogy-uyeum for 300days. The change of transaminase and bile acid and SOD activity in blood serum, hepatic tissue were measured at 3rd, 7th, 15th, 30th day. The obtained results are summarised as follows : 1. In the change of SGOT contents, as compared with control group, sample group was significantly decreased at 7th and 15th day. 2. In the. change of SGPT contents, as compared with control group, sample group was significantly decreased at 15th day. 3. In the change of serum bile acid contents, as compared with control group, sample group was significantly decreased at 7th and 15th day. 4. In the change of serum SOD activity, as compared with control group, sample group was significantly increased at 15th and 30th day. 5. In the change of hepatic tissue, as compared with control group, the vacuolation of hepatocytes in the sample group was reduced, the liver plates were reconstructed, and the epitheriai cell wasn't destructed.

• KSBB Journal
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• 제11권5호
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• pp.613-621
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• 1996

Wild-type 곰팡이인 Tolypoc/adium inflatum의 고정상배양을 통해 탄소원, 질소원, 아미노산 등이 peptide 항생제 계통 의 면역억제제인 cyclosporin A(CyA) 생합성에 미치는 영향을 조사하였다. 질소 원으로서 ammonium sulfate가 첨가된 경우에, f fructose 또는maltose 등을 탄소원으로 이용하는 배 지가 glucose가 첨가된 배지에 비해 월등히 높은 C CyA 생산성을 보였으나. ammonium sulfate의 부 재시에는 탄소원들의 종류에 관계없이 CyA 생산성 이 매우 낮게 나타났다. 질소원의 경우는 무기 질소 원인 ammonium sulfate가 CyA 생산에 가장 훌륭 한 성분으로 작용했으며, 그밖에 ammonium phos p phate, ammonium citrate 역시 CyA 생산을 어느 정도 증가시키는 효과를 보였다. 최척 ammonIum s sulfate의 농도는 109/L로 밝혀 졌으며 배양초기 에 a ammonium sulfate릎 첨가해 주는 경우가 배양중간 에 첨가하는 경우보다 CyA 생산에 더 효율적인 것 으로 나타났다. 아미노산의 경우 L-valine에 의한 C CyA 생합성 증진 효과가 가장 투렷하게 나타났다. 최적 L-valine 농도는 109/L이였으며 L-valine이 배양 초반부터 배지 중에 존재하는 것이 CyA 생합 성에 가장 유리한 것으로 나타났다.

• KSBB Journal
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• 제11권1호
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• pp.30-36
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• 1996

Cyclosporin A 고정화배양과 현탁배양의 결과를 바탕으로 각각의 배양의 경우에 따른 비성장속도의 포도당에 대한 Monod 속도식을 제안하고 그에 필요 한 매개변수들을 구하였다. 고정화 배양이 현탁배양 에 비해 높은 ${\mu}m$와 낮은 Km 값을 갖는 것으로 나 타났는데 이는 고정화 균체의 우수한 활성과 기질에 대한 높은 친화도에 기 인한 것으로 보인다. 고정상 발효의 경우, 구한 매개변수들을 담체내에서의 물질 전달 및 반응속도의 정도를 나타내는 효율인자 값을 계산하는데 이용하였다. 중요한 고정화 공정변수인 담체크기, 균체부하의 정도가 기질의 확산저항에 미 치는 영향을 고려하여 효율인자값을 계산한 결과, 적절한 담체의 크기는 반경 $100 ~ 500{\mu}m$로 나타났 다. 고정화세포배양시 담체내의 균체의 균일한 분포 및 활성도의 유지를 위해서, 적정한 담체입자크기를 결정한 후 균체부하량을 조절하여 고정화 공정을 운 영하는 것이 중요한 것요로 판명되었다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제55권6호
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• pp.631-635
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• 2003

비특이성 간질성 폐렴에서 대개의 경우 스테로이드 치료로 호전지만 스테로이드 저항성 인 경우 여러 가지 면역 억제제가 이차 약제로 치료에 시도되고 있으며 본 증례에서는 cyclosprin을 이차약제로 사용해서 좋은 치료 효과를 얻었기에 문헌 고찰과 함께 보고 하는 바이다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제30권4호
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• pp.747-757
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• 2000

Cyclosporin A(CsA) is an immunosuppressive agent widely used for preventing graft rejecting response in organ transplantation. The basic properties of CsA to osteoblast has not been well known yet. A better understanding of the mechanisms of CsA function on bone could provide valuable information regarding basic properties of bone remodeling, pharmacotherapeutic intervention in metabolic bone disease, and the consequences of immunosuppression in bone physiology. The purpose of this study was to investigate the effect of CsA on osteoblast by evaluating parameters of proliferation, collagen synthetic activity, alkaline phosphatase activity, and ALP mRNA expression in mouse calvarial cell. 1. CsA ($3{\mu}g/m{\ell}$) treated mouse calvarial cell showed statistically significant increase in cell proliferation.(P<0.05) 2. CsA($1,\; 3{\mu}g/m{\ell}$) treated MC3T3 cell line showed statistically significant increase in cell proliferation. 3. The amount of collagen of CsA($3{\mu}g/m{\ell}$) treated mouse calvarial cell was decreased statistically significantly. 4. Alkaline phosphatase activity was increased statistically significantly in CsA treated group($1{\mu}g/m{\ell}$). 5. mRNA expression of ALP was increased in CsA treated group These results suggest that CsA could affect bone remodeling by modulating proliferation & differentiation of osteoblast.

• KSBB Journal
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• 제9권2호
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• pp.200-210
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• 1994

Cyclosporin A(Cy A) 생산을 위한 회분식 생물 반응기 실험에서, 고정상세포를 이용함으로써 액상 배양과 비교할 때 생물공정 개선의 가능성이 있음을 제시하였다. 고농도 배지를 생산균주가 지수기 생장단계인 발효개시 후 139시간에 첨가하였을 때, 고정상배양과 액상배양 모두에서, 균주의 재활성 및 재생장으로 인해 CyA의 생산기간이 연장되어, 발효개시 후 250시간까지 최대 CyA 농도를 유지하였다. 반면에 배지의 첨가가 없는 단순 회분식 배양의 경우, 두 경우 모두 정체생장 단계에서 CyA의 생산성이 빠른 속도로 감소하였다. 주목할 점은 고정상 세포의 경우 CyA수율($Y_{p/x}$)이 고농도 배지를 첨가한 후에도 지수기때의 수율의 80%에 이르는 높은 값을 계속 유지할 수 있었으나, 이와는 대조적으로 액상 세포는 단지 58%만을 유지할 수 있었다. 그 결과 고정상배양의 최대 CyA생산성 이 액상배양과 비교하여 약 2배 정도 증가하였다.