Kim, In-Seop;Park, Yong-Woon;Lee, Sung-Rae;Yong Kang;Lee, Kyung-Myung;Park, Dae-Han;Woo, Han-Sang;Lee, Soungmin
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제7권6호
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pp.340-346
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2002
The purpose of the present study was to examine the efficacy and mechanism of the PAB (para-amino benzamidine) affinity column chromatography, Viresolve NFP virus filtration, pasteurization (60$\^{C}$ heat treatment for 10 h), and lyophilization steps employed in the manufacture of urokinase from human urine as regards the removal and/or inactivation of the hepatitis A virus (HAV). Samples from the relevant stages of the production process were spiked with HAV and subjected to scale-down processes mimicking the manufacture of urokinase Samples were collected at each step, immediately titrated using a 50% tissue culture infectious dose (TCID$\_$50/), and the virus reduction factors evaluated. PAB chromatography was found to be an effective step for removing HAV with a log reduction factor of 3.24. HAV infectivity was rarely detected in the urokinase fraction, while most of the HAV infectivity was recovered in the unbound and wash fractions. HAV was completely removed during the Viresolve NFP filtration with a log reduction factor of $\geq$ 4.60. Pasteurization was also found to be an effective step in inactivating HAV where the titers were reduced from an initial titer of 7.18 log$\_$10/ TCID$\_$50/ to undetectable levels within 10 h of treatment. The log reduction factor achieved during pasteurization was $\geq$ 4.76. Lyophilization revealed the lowest efficacy for inactivating HAV with a log reduction factor of 1.48. The cumulative log reduction factor was $\geq$ 14.08. Accordingly, these results indicate that the production process for urokinase exhibited a sufficient HAV reducing capacity to achieve a high margin of virus safety.
밤나방류에 대한 천적미생물을 중심으로 하는 신방제법의 개발을 목적으로 멸강나방에 강한 병원성을 갖는 바이러스의 선별시험을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 멸강나방(Pseudaletia(=Leucania) separata, Walker)유충에 강한 병원성을 가진 핵다각체바이러스를 선별코자 21종(개통)의 NPV를 orchard grass의 양면에 발라서 멸강나방 2령 유충에 첨식한 결과 멸강나방 핵다각체병바이러스 4계통과 벼밤나방 핵다각체병바이러스가 병원성이 높았다. 멸강나방 핵다각체병바이러스 3계통(LsNPV-F, LsNPV-G 및 LsNPV-Y)를 공시해서, 다각체를 인공사료에 혼합하여 해서 멸강나방 1~6령의 유충에 대한 병원성 시험을 행한 결과 1~2령 유충에 대한 병원성이 높고, 4령 이후에는 낮아 약령기방제의 중요성을 시사했다.
야외곤충에 대한 미포자충의 감염여부와 곤충에서 검출된 미포자충의 누에에 대한 감영성 조사 결과는 아래와 같다. 1. 채집한 66종의 야외곤충으로부터 미포자충이 검출된 야외곤충은 똥쉬파리, 꿀벌, 배추흰나비(유충), 아이노각다구, 등록색잎벌레, 벗나무풍뎅이, 노랑테불나방, 밀잠자리, 먼지벌레 및 벼잎벌레 등 10종이었다. 2. 추출된 미포자들을 크기에 따라 분류한 바 똥쉬파리로부터는 3종, 그리고 다른 곤충으로 부터는 각기 다른 1종의 미포자충이 검출됨으로써 총 12종의 미포자충이 분리되었다. 3. 똥쉬파리, 꿀벌 및 배추흰나비(유충)에서 검출된 미포자충들을 누에에의 교우감영성을 실험한 바 어느 것도 교유감염이 나타나지 않았다.
Jee Bo-Young;Kim Yi-Cheong;Bang Jong-Duek;Kim Ki Hong
Fisheries and Aquatic Sciences
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제3권3_4호
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pp.228-229
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2000
Trypanosoma sp. (Sarcomastigophora: Kinetoplastida) was found in the blood of the Korean catfish, Silurus asotus, for the first time in Korea. The morphological characteristics of Trypanosoma sp. in the present study were similar with those of T. carassii, T. tincae and T. danilewskyi. However, the free flagellum length of Trypanosoma sp. was obviously shorter than that of those species. The species identification was reserved until elucidating the pleomor-phism according to the phase of infection and the cross infectivity among fish species.
파밤나방 핵다각체병ㅂ이러스의 기주곤충 및 나비목해충에 대한 병원성과 10종 baculovirus의 파밤나방 유충에 대한 교차감염을 조사하여 방제에 이용하고자 시험을 수행하였다. 난에대한 중앙치사농도($LC_{50}$)는 2.855$\times$$10^{5}$ 다각체/ml로 유충보다 높았다. 령별 $LC_{50}$은 3령이 1.422$\times$$10^{4}$ 다각체/ml로 1령보다 1.16배, 5령보다 .11배의 높은 병원성을 나타냈다. 각 령의 중앙치사일수($LT_{50}$)은 1.56$\times$$10^{6}$ 다각체/ml에서 4.26~5.04일이었다. 8종 나비목 해충에 대한 파밤나방 핵다각체병바이러스의 병원성은 기주곤충인 파밤나방에서만 인정되었고 10종의 곤충간상바이러스 중 Autographa californica MNPV, Mamestra brassicae MNPV 및 Trichoplusia ni MNPV 등 3종이 파밤나방 유충에 대해 교차감염을 일으켰다.
The Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) glycoprotein B (gB) gene in the pHLA-21 plasmid was inserted into a baculovirus (Hyphantria cunea nuclear polyhedrosis virus) expression vector (lacZ-HcNPV) to construct a recombinant virus gB-HcNPV expressing gB. Spodoptera frugiperda cells infected with this recombinant virus synthesized and processed gB of approximately 120 kDa, which cross-reacted with the monoclonal antibody to gB. The recombinant gB was identified on the membrane of the insect cells using an immunofluorescence assay. Antibodies to this recombinant raised in mice recognize the viral gB and neutralized the infectivity of the HSV-1 in vitro. These results show that the gB gene has the potential to be expressed in insect cells. They also demonstrate that it is possible to produce a mature protein by gene transfer in eukaryotic cells, and indicate the utility of the lacZ-HcNPV-insect cell system for producing and characterizing eukaryotic proteins. Furthermore, the neutralizing antibodies would appear to protect mice against HSV. Accordingly, this particular recombinant protein may be useful in the development of a subunit vaccine.
Purpose: This study aimed to investigate sub-health status (SHS) of people living in China during the Coronavirus disease 2019 (COVID-19) COVID-19 pandemic. COVID-19 is a severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) infection-induced acute infectious disease, which is featured by universal susceptibility and strong infectivity, and SHS (a status of low quality health) refers to a status of low-quality health. COVID-19 has gradually developed into a global pandemic, making the public in a high stress situation in physiological, psychological and social states in the short term. Methods: From March 6 to 11, 2020, a large-scale cross-sectional survey was conducted by convenient sampling, and SHS assessment scale was used in the questionnaire. The ordinal logistic regression analysis was used to identify the factors affecting SHS. Results: In this study, 17,078 questionnaires were delivered with 16,820 effective questionnaires collected, and 10,715 subjects (63.7%) were found with SHS, with moderate SHS primarily. Physiological sub-scale scored the highest, followed by psychological and social sub-scales. Ordinal logistic regression analysis indicated that man, only-child, workers and farmers were risk factors of SHS. Protective factors of SHS included living in rural areas and townships, laid-off retirees and education degree. Conclusion: It shows many people in China place in a poor health status during COVID-19 pandemic. It is necessary that relevant departments pay more attention to people with poor health such as men, only-child, urban people, workers and farmers, and groups with high education degree during and after pandemic stabilization.
수종의 주요 뽕나무 해충-멧누에, 뽕나무 명나방, 환불나방-에 누에 무름병 바이러스(Flacherie virus; FV)와 농핵병 바이러스(Densonucleosis virus: DNV)를 접종하여 감염여부를 2중 면역확산법과 조직관찰로 조사하므로서 이들 누에병의 뽕나무 해충에 의한 전염경로 차단 및 방제법 확립을 위한 기초자료를 얻고자 시험을 수행하였다. 1. 멧누에는 누에 FV 및 DNV-1 각각의 항혈청과 반응하여 침강대를 형성하였고, 뽕나무 명나방은 DNV-1 항혈청과 반응하여 비들의 교차감염을 인정할 수 있었으나, 흰불나방은 FV 및 DNV-1 항혈청과 반응을 일으키지 않아 교차감염을 인정할 수 없었다. 2. FV 접종 멧누에는 중장 배상세포 세포질에 바이러스 특이 공포 형성 및 27nm 크기의 바이러스 입자가 관찰되었다. 3. DNV-1 접종 멧누에는 중장 원통세포 핵이 비대하였으며 군집형과 연쇄상의 2종류의 바이러스 증식 형태가 관찰되었다. 4. DNV-1 접종 뽕나무 명나방은 중장 원통세포의 일부 핵에서 비대 현상이 관찰되었고, feulgen 염색결과 적자색으로 염색되었으며, 비대한 원통세포핵내에 소수의 바이러스들이 여러 곳에서 증식하는 것이 관찰되었다.
Polymerase chain reaction (PCR) was evaluated for the early detection of Aujeszky's disease virus (ADV) DNA from virus-infected cell cultures. For the purposes, the Korean ADV NYJ1-87 was propagated in swine kidney (SK) cells and subjected to the amplification of DNA (217 bp) by PCR using sense and antisense primers specific to gp50 gene of the ADV. In detection of cell-associated viral DNA, reliable PCR conditions were determined as 30 cycles of reaction consisting 1 minute each of denaturation at $94^{\circ}C$, annealing at $55^{\circ}C$ and polymerization at $72^{\circ}C$. The PCR encountered best results with reagent mixtures of $50{\mu}l$ containing $200{\mu}M$ dNTPs, $0.2{\mu}M$ each sense and antisense primers, 1 mM $MgCl_2$ and 10% (v/v) template DNA in the final concentrations. ADV-specific DNAs were detected as early as 6, 6, and 9 hours post-infection, respectively, from lysates of the SK cells infected with ADV of $10^3$, $10^2$ and $10^1\;TCID_{50}/ml$ by this condition. In culture supernatant, the DNAs were detected from ADV of as low infectivity as $10^ {-3}\;TCID_{50}/ml$ by the reduced reagent concentrations and 30 cycles of 1 minute each of denaturation at $94^{\circ}C$ and annealing at $55^{\circ}C$, and 2 minutes of polymerization at $72^{\circ}C$. The lowest amount of detectable ADV DNA was 1 fg. In conclusion, the PCR condition established in the present study was recognized as a feasible alternative to time-consuming procedures in isolation and characterization of the virus.
담배와 고추의 주요해충인 담배나방 [Helicoverpa assulta(Guenee)]의 미생물적 방제법을 개발하기 위하여, 아직 국내에서 보고되지 않은 담배나방 핵다각체병 바이러스 담배나방 사충으로 부터 분리하고, 바이러스의 전자현미경 관찰 및 바이러스 DNA의 제한효소 분석 등을 통한 생화학적 특성을 조사하였다. 담배나방 핵다각체병 바이러스의 다각체는 구형에 가까운 20면체로서 크기는 평균 약 1.0$\mu$m 정도이고, 다수의 바이러스 입자가 다각체 단백질에 포매되어 있었다. 포매된 바이러스 입자는 한개의 봉상 nucleocapsid가 하나의 envelope 내에 매립된 형태의 SNPV(single embedded nuclear polyhedrosis virus)로, 형태는 전형적인 봉상으로서 그 크기는 약 $65nm\times300nm$ 였다. 또한 다각체 단백질의 SDS-PAGE 분석 결고, 분자량은 약 31 Kd이었으며, 담배나방 핵다각체병바이러스 DNA를 분리하여 EcoRI. HindIII 등 수종의 제한효소로 처리분석한 결과, 그 genome의 크기는 약 120Kb 정도였다. 본 핵다각체병바이러스는 담배나방 유충에만 병원성을 나타내 기주특이성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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