The first evidence has been provided about the variation within trnL-trnV and trnF-trnT spacer regions of cpDNAs in Korean fir and Manchurian fir, revealed by PCR-RFLP analysis. Four cpDNA haplotypes have accordingly been recognized by being analyzed using the trnL-trnV/Tru11 primer-enzyme combination and 3 haplotypes using the trnF-trnT/TagI combination, which exhibited inter and intraspecific variation. A total of 6 cpDNA haplotypes were recognized by pooling the PCR-RFLP variants observed in both combinations. Haplotypes 2 and 3 were common for both species investigated, whereas haplotypes 1, 4, and 5 were detected only in Korean fir and haplotype 6 was detected only in Manchurian fir. Although haplotypes 2 and 3 were common in both species, haplotype 2 was major haplotype for Korean fir and haplotype 3 was one of the 2 major haplotypes for Manchurian fir. Restricted occurrence of haplotype 4 in Mt. Halla and haplotype 5 in Mt. Jiri of the Korean fir may represent the existence of geographic isolation by the sea between them. Diagnostic potential of individual haplotypes in discriminating between the two species as well as between their populations is discussed.
KF 116 was TMV resistant tobacco plant and KB 301 was PVY resistant plant transformed with TMV CP gene and PVY CP gene, respectively. These resistant plants were cross-fertilized and the 4 lines of the TMV-PVY resistant plants were selected from F1 hybrid plants. The rate of PVY-resistant plant in these hybrids was 100 percent and that of TMV-resistant plants including delay type was 90-98 percent at 4 weeks after virus inoculation. It was confirmed that the TMV and PVY CP genes were integrated into the genome of hybrid plants by genomic PCR, and Southern blot hybridization. The genome of F1 hybrid plants had one copy and 4 copies of PVY-CP gene and TMV-CP gene, respectively, and CaMV 35S promoters were not methylated, regardless of the difference symptom development to TMV.
Detection for heat-labile enterotoxin(LT) of enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC, EC81, O148:H28) and enterotoxin of enterotoxigentic Clostridium perfringents type A(CP, NCTC8238, Hobbs serotype 2) by use of a polymerase chain reaction (PCR) assay were positive reaction, which using LT gene-specific primers of ETEC with a detection limit equivalent from 100ng/${\mu}\ell$ to 1 pg of a DNA fragment of 417-bp in EC81 and enterotoxin gene-specific primers of CP with a detection limit equivalent from 100ng/${\mu}\ell$ to 10pg of a DNA fragment of 364-bp in NCTC8238. Detection for a LT gene of ETEC highly appeared 10-fold sensitivity than an enterotoxin gene of CP.
Kim, Jeong Hun;Byeon, Ji Hui;Park, Hyo Seop;Lee, Jeong Hoon;Lee, Sang Won;Cha, Sun Woo;Cho, Joon Hyeong
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.23
no.6
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pp.489-499
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2015
Background : Plants belonging to 5 species of the genus Eleutherococcus are currently distributed in the Korean peninsula. The traditional medicine 'Ogapi', derived from Eleutherococcus sessiliflorus and other related species, and 'Gasiogapi', derived from Eleutherococcus senticosus, are frequently mixed up and marketed. Therefore, accurated identification of their origins in urgently required. Methods and Results : Candidate genes from nuclear ribosomal DNA (nrDNA) and chloroplast DNA (cpDNA) of Eleutherococcus plants were analyzed. Whereas the nrDNA-internal transcribed spacer (ITS) regions were useful in elucidating the phylogenetic relationships among the plants, the cpDNA regions were not as effective. Therefore, a combined analysis with nrDNA-ITS was performed. Various combinations of nrDNA and matK were effective for discriminating among the plants. However, the matK and rpoC1 combination was ineffective for discriminating among some species. Based on these results, it was found that OG1, OG4, OG5, OG7, GS1, GS2, and GS3 were derived from E. sessiliflorus. In particular, it was confirmed that GS1, GS2, and GS3 were not derived from E. senticosus. However, more samples need to be analyzed because identification of the origins of OG2, OG3, OG6 and GS4 was not possible. Conclusion : The ITS2, ITS5a, and matK combination was the most effective in identifying the phylogenetic relationship among Eleutherococcus plants and traditional medicines based on Eleutherococcus.
The Euphorbiaceae family features some of the most economically important plants that are sources of foods, oils, waxes, and medicines. The accurate identification of Euphorbiaceae species is critical in sustainable utilization of plant resources. We examined 234 sequences of nrDNA ITS, cpDNA rbcL and matK loci from 20 species in Euphorbiaceae in Korea and three outgroup taxa to develop efficient DNA barcodes. The three barcode loci were successfully amplified and sequenced for all Euphorbiaceae species. nrDNA ITS locus showed the highest mean interspecific K2P distance (0.3034), followed by cpDNA matK (0.0830), and rbcL (0.0352) locus. The degree of species resolution for individual barcode loci ranged from 75% (rbcL and matK) to 80% (ITS). The degree of species resolution was not enhanced with the different combinations of three barcode loci. The combined data set of the three loci(ITS+rbcL+matK) provided 80% of species resolution. These results confirm that ITS locus, as a single barcode, is the best option for barcoding of the Euphorbiaceae in Korea.
Tobacco plants(Nicotiana tabacum cv. NC82) transformed with TMV CP cDNA were self-fertilized until 8th generation (R$_{8}$), and the transgenic plants from 6th to 8th generation were analized for their resistance to tobacco mosaic virus(TMV) and stability of the gene expression. The 6th generation of the plants(R$_{6}$) showed high resistance(81-91 %) to TMV at eight weeks after artificial inoculation with the virus. The transgenic cell line 601 was the most prominant in the expression of resistance. 98 % of the plants showed no symptom without any agronomic phynotepe variation when they were inoculated with the virus in a experimental field. However, 2% of the plants were revealed as delay type of symptom with mild mosaic on a few leaves. The viral resistance in greenhouse tests of the 7th generation (R$_{7}$) was 54-64%, and the number of delay type plants were increased than that of 6th generation plants. In the 8th generation, 81 % of the plants was complete resistant to the virus. The TMV CP cDNA of the transgenic plants of each generation was also confirmed by genomic PCR, and there was no systemic viral multiplication in the resistant plants. It suggests that the viral resistance and gene expression of the transgenic plants might be stable through the generations.ons.s.
Kim, Bo-Hwan;Seo, Dong-Jin;Jung, Soon-Hee;Kim, Soo-Ki
Molecular & Cellular Toxicology
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v.5
no.3
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pp.207-215
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2009
Despite wide therapeutic use of CpG ODN against infection, allergy and cancer, the safety and toxicity of CpG ODNs were poorly delineated. Thus, we investigated whether optimal dosing of CpG ODN would affect immunotoxicological parameters in NZB/NZW F1 mice. Comparisons were made among control, non-CpG ODN and mouse CpG ODN ($10{\mu}g$)-treated groups for 4 weeks. To gauge the immunotoxicity of CpG ODNs, we measured nonspecific parameters, degree of lupus nephritis, proteinuria, or autoantibody, and cytokine expression in mRNA level of lymphocytes. We found that there were no significant differences among groups in nonspecific immunotoxicological profiles and in evaluation profiles of glomerulonephritis. However, titer of anti-dsDNA and anti-cardiolipin antibodies in mouse CpG ODN group rose three or eight-fold higher than in control group. Collectively, CpG ODN might be clinically less immunotoxic in terms of clinical profiles in lupus-prone NZB/NZW F1 mice, in spite of high autoantibody titer in CpG ODN treated groups.
Kim Bo Yeon;Park Nam Sook;Jin Byung Rae;Kang Pil Don;Lee Bong Hee;Seong Su Il;Hwang Jae Sam;Chang Jong Su;Lee Sang Mong
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.10
no.1
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pp.11-17
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2005
In our research to identify gene involved in the cuticle protein, we cloned a novel cuticle protein gene, ApCP15.5, from the Chinese oak silkmoth, Antheraea pernyi, larvae cDNA library. The gene encodes a 149 amino acid polypeptide with a predicted molecular mass of 15.5 kDa and a pI of 9.54. The ApCP15.5 contained a type-specific consensus sequence identifiable in other insect cuticle proteins and the deduced amino acid sequence of the ApCP15.5 cDNA is most homologous to Tenebrio molitor-C1B ($43\%$ protein sequence identity), followed by Locusta migratoria-76 ($42\%$ protein sequence identity). Northern blot and Western blot analyses revealed that the ApCP15.5 showed the epidermis-specific expression. The expression profile of ApCP15.5 indicated that the ApCP15.5 mRNA expression was detected in the early stages after larval ecdysis and larval-pupal metamorphosis, and its expression level was most significant on the first day of larval ecdysis and pupal stage. The ApCP15.5 was expressed as a 15.5 kDa polypeptide in baculovirus-infected insect cells.
Park, Jeong-Mi;Chung, Kyong-Sook;Oh, Byoung-Un;Jang, Chang-gee
Korean Journal of Plant Taxonomy
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v.41
no.4
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pp.353-360
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2011
The sequence data of the plastid DNA (trnL-F IGS, trnL intron, and trnH-psbA) and nuclear DNA (RNApol2_i23) markers were utilized to study phylogenetic relationships among the taxa in the Polygonatum odoratum complex (Ruscaceae). European P. odoratum individuals form a clade with a high bootstrap value, which is a sister to the clade of Korean P. odoratum var. odoratum, P. odoratum var. pluriflorum and P. robustum. The formation of the clade with P. odoratum var. odoratum, P. robustum, and one accession of P. odoratum var. pluriflorum indicates geological speciation in isolated populations in the islands following dispersal events from the mainlands. All data sets form two major clades, which are congruent with the subgroups divided by the basic chromosome numbers (x = 9 and x = 10). Although it is not easy to test the hypothesis of the decrease in the basic chromosome number due to scatter taxon sampling in this study, the molecular data strongly suggested that aneuploidy plays an important role in lineage diversification in the genus Polygonatum. The cytological data was not strongly supported by the cpDNA sequences. Further investigations of the cytological, morphological, and geographical characteristics with comprehensive sampling are desired to understand the evolution and lineage diversification in the genus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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