• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권5호
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• pp.538-543
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• 1994

Effect of partial oxygen pressure on the cell growth and the activities of oxidative defense enzymes were measured in the continuous culture of Streptomyces coelicolor. Both the wild type and the mutant strain resistant to hydrogen peroxide were cultured and the dry cell weight of the two cultures were measured at different oxygen tensions. Growth of the wild type was inhibited by oxygen at above 0.5 vvm. Growth of the hydrogen peroxide resistant mutant was stimulated by pure oxygen at 0.5 vvm but was inhibited by oxygen at 1.0 vvm. Therefore, growth of the hydrogen peroxide resistant mutant was less affected by the deleterious oxidative stress of oxygen. Activities of the several defense enzymes were also measured at different oxygen tensions. Activities of catalase and glucose-6-phosphate dehydrogenase increased significantly as oxygen pressure increased in the wild type culture. In the mutant, however, increase in those enzyme activities was not obvious whereas the uninduced levels of the above enzymes were higher than those of wild type. As judged by Western blotting, the amount of the major catalase increased as the oxygen pressure increased. This indicates that the induction of the catalase activity by oxygen pressure is mostly due to the increase in the expression level for the major catalase.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제5권2호
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• pp.84-91
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• 2000

Mycopasma contamination of tissue culture cells easily evades detection and, thus, represents a continous therat to cell biologists. In case where infected cell can not simply be replaced, attempts have to be made to eradicate mycoplacma from the tissue culture cells. A variety of anti-microbial agents have been shown to be toxic to mycoplasma strains ; however, cell associated mycoplasma are often protected from antibiotics at concentrations shown to be effective in vitro. Antibiotic concentrations high enough to be lethal to cell as sociated mycoplasmas frequently are also detrimentrations to the host cells, while moderately increased antibiotic levels tolerated by the host cells often lead to only temporary growth suppression and/or to the emergence of mycoplasma strains resistanct even to high concentrations of the antibiotis applied. Hare, a genetic approach for the elimination of mycoplasma from tissue culture cells that overcomes thens limitations is described. By expression of a selection marker conferring resistance to an otherwise toxic agent, Acholeplasma laidlawii infected BHK-21 cells used as the model system were enabled to temporarily tolerate antibiotic concentrations high enough to be lethal to cell associated mycopalsma while leaving the host cells unharmed. Upon successful mycoplasma eradicated, cultvation of the cured host cells in the absence of the selective agent yielded revertant cell clones that had regained susceptibillity to the toxic agent. Cressation of the selection marker expression was shown to result from the loss of the selection marker DNA, which is a consequence of the fact that the stable and permanent integration of foreign DNA in eucaryotic cell chrosomes is highly inefficient. Thus, the cells were cured from mycoplasma yet remained biochemically unaltered.

• 한국초지조사료학회지
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• 제18권3호
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• pp.187-194
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• 1998

This study was conducted to investigate the effect of antagonistic bacteria and pathogenic fungi on growth and yields of white clover(Trifo1iurn repens L.) in continuous cropping soil(CCS) and non-continuous cropping soil(NCCS). The gowth experiment of white clover was conducted at pots in a vinyl house. White clover was established by seeding into pots of 12 cm in diameter and 9 cm in depth containing 1:l mixture of soil and vermiculite with antagonistic bacteria and pathogenic fungi. In dark culture experiment, white clover lived longer in treatment of antagonistic bacteria than in treatment of control, but lived shorter in CCS than in NCCS. Dry weight of white clover was increased by the inoculation of the antagonistic bacteria(p< 0.05), but decreased by the inoculation of the pathogenic fungi(p< 0.05) both CCS and NCCS. In conclusion, bacterization of white clover with antagonistic bacteria enhances the growth and yield of white clover.

• 한국균학회지
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• 제21권4호
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• pp.323-331
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• 1993

The protoplast formation and intergeneric protoplast fusion between Gliocladium virens and Trichoderma harzianum were attempted to obtain fusants. Protoplast formation was the most effective when the strains were treated with concentration of 5 mg/ml of Novozyme 234 and Cellulase at $25^{\circ}C$ for 3 hours in phosphate buffer, pH 6.5, supplemented with 0.6 M sorbitol as osmotic stabilizer. Auxotrophic mutants of G. virens G88 did not grow in minimal medium and benomyl resistant T. harzianum T95 from wild types, however, was selected by treatment with UV light as genetic marker to isolate fusants. When the intergeneric protoplast fusion between G. virens G88 and T. harzianum T95 was carried out using 30% PEG 4000 containing 10 mM $CaCl_{2}$, and 50 mM glycine (pH 8.5) as fusogenic agent at $25^{\circ}C$ for 10-15 min, the fusion frequency was $0.8{\times}10^{-4}$. Fusants obtained from intergeneric protoplast fusion were spontaneously segregated into va rious strains by continous culture on complete medium. Several intergeneric hybrids were classified into three types: parent-like hybrids, segregants, and recombinants.

• 식물조직배양학회지
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• 제25권3호
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• pp.195-200
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• 1998

기내에서 발아시킨 애기장대(Arabidopsis thaliana)의 잎과 줄기 절편체로부터 캘러스 유도는, 잎절편체의 경우 2mg/L 2,4-D가 첨가된 MS 고체배지에서 유도되었고, 줄기절편체의 경우는 0.5mg/L 2,4-D와 0.1mg/L BAP가 첨가된 CP 고체배지에서 배양 4주 후 다량의 캘러스가 유도되었다. 유도된 캘러스를 잘게 자르고 0.5mg/L 2,4-D와 0.1mg/L BAP가 첨가된 CP 액체배지에서 7일 간격으로 암조건에서 4개월간 배양하였을 때 균일한 shoot-forming(SF)캘러스를 얻을 수 있었다. 액체배지에서 유도된 SF 세포괴는 0.05 mg/L IAA, 7.0mg/L 2-iP, 30g/L sucrose가 첨가된 MS 재분화배지에서 광조건으로 배양하였을 때 캘러스를 거쳐 녹화되기 시작하였으며 배양 4주 후부터는 전체적으로 녹화된 SF캘러스로부터 shoot가 형성되어 식물체 재분화가 가능하였다. 또한 재분화 배지에 옮겼을 때 IAA와 2-iP가 첨가된 배지에서 50% 이상의 shoot 형성률(SF 캘러스당 한 개 이상의 shoot가 형성된 캘러스의 백분율)을 보였다. 절단된 shoot는 호르몬이 첨가되지 않은 배지에서 4주 후 뿌리를 형성하였으며, 재분화된 식물체는 기내에서 6주 후부터 화뢰가 형성되고 꽃이 피기 시작하였다.

• 디지털융복합연구
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• 제13권10호
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• pp.41-50
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• 2015

이 연구는 자원봉사활동 참여자들을 대상으로 향후에도 지속적으로 자원봉사활동에 참여할 태도에 영향을 미치는 변인과 영향력을 구명하고자 하였다. 문헌고찰 및 선행연구를 참고하여 독립변수로 개인특성변인, 참여관련변인, 관리과정변인 등 융복합적 요인으로 구성하였으며, 종속변수은 지속적 참여의 두 가지 차원인 지속적 참여의사, 참여강도의 두 가지 차원으로로 구성하였다. 이 연구를 통해 자원봉사활동 참여를 활성화하고 지속적인 참여를 이끌어 내기 위해 다음과 같은 방안을 도출하였다. 첫째, 높은 자원봉사에 대한 행동의사를 나타내고 있는 주부들에 대한 자원봉사활동 기회를 제공하는 홍보방안이나 프로그램개발이 필요하다. 둘째, 자원봉사활동을 주관하는 기관에서는 월평균 참여횟수가 3회이상, 1회 활동시간이 3시간 이상으로 활동 프로그램을 구성할 필요가 있다. 셋째, 자원봉사활동 참여자들이 자원봉사활동이 지역사회의 발전과 공동체 발전의 원동력임과 자신의 발전을 위해서도 매우 의미있는 활동임을 다양한 방법을 통해 인식시키도록 노력해야 할 것이다. 넷째, 자원봉사활동 주관 단체는 활동 참가자에 대한 다양한 차원의 노력들을 점검하고, 부족한 부분을 개선해 나갈 수 있도록 노력해야 할 것이다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제27권2호
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• pp.78-85
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• 2003

Agrobacterium rhizognes $A_4$ Ti-plasmid를 인삼 뿌리에 도입하여 유전적으로 안정하며 반영구적으로 이용할 수 있는 형질전환된 인삼모상근 캘러스(GHC-T78)를 유도하였다. 특정 ginsenoside를 대량으로 생산할 수 있는 최적배양조건을 확립하기 위해서 먼저 모상근으로부터 캘러스의 유도하는 과정에서 BA의 단독 처리구는 auxin과 cytokinin의 혼합 처리구보다 캘러스 형성이 더 우수하였다. 인삼 캘러스 형성율은 Benzyladenine(BA)를 1 mg-3 mg/L 까지 첨가한 배지에서 가장 높게 나타났으며, ginsenoside 함량 역시 bezyladenine 단독처리구는 가장 우수하였다. 캘러스 세포의 액체배양 기간을 4주로 설정할 때 BA의 농도 역시 BA 2 mg/L로 첨가한 배지에서 가장 우수한 캘러스 생장률을 보였다. 실제로 인삼 모상근 캘러스의 생장율은 암상태에서 배양하는 것이 광상태에서 보다 다소 양호하였으나, ginsenoside의 생성에는 연속광상태에서 더 효과적임이 확인되었다. 모상근 캘러스에서 얻은 이러한 결과는 국내외 처음으로 보고되는 내용이며, 액체배양의 캘러스 세포에서 분화된 무수히 많은 단일 모상근 근모의 형성은 액체배양을 통한 특정 ginsenosid의 새로운 생산방법을 개발할 수 있도록 하고 있다.

• 한국식품과학회지
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• 제30권4호
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• pp.902-907
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• 1998

본 연구에서는 세포 고정화를 위해 기존의 고정화 방법의 단점을 보완하기 위하여 새롭게 개발된 GFM 시스템에 Paracoccus denitrificans를 고정화하여 물속의 nitrate를 분해하는데 적용하였다. 고정화 조건으로써 스폰지 구멍의 크기 20 P.P.I. (pore per inch)와 겔로서 alginate가 이미 최적의 조건으로서 선택되었다. 고정화 세포의 연속 nitrate 분해능력을 air-lift reactor내에서 측정한 결과, 물속의 nitrate함량이 증가함에 따라 분해능력이 증가함을 나타내었다. 또한 연속운전에서 본 시스템은 기존의 고정화시스템인 bead 겔포괄법과 비교할 때 $1.2{\sim}2.1$배 정도 분해능력이 향상되었다. 최고 nitrate 분해속도는 buffer를 함유한 medium에 있어서 177 mg/L h이었으나 buffer를 첨가하지 않은 경우에 있어서는 33 mg/L h이었다. 또한 저장안정성을 측정한 결과, $5^{\circ}C$에 저장하였을 때 분해능력은 16주간 거의 변화가 없었으며 고정화하지 않은 자유세포나 bead에 고정화된 세포에 비하여 저장안정성이 두드러지게 뛰어났음을 알 수 있었다.

• 한국토양비료학회지
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• 제30권4호
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• pp.351-356
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• 1997

시설(施設) 참외는 이른 봄부터 가을까지 계속(繼續) 재배(栽培)하여 높은 소득(所得)을 올릴 수 있으나 뿌리혹선충(線蟲) 발생등(發生等) 연작(連作) 장해(障害)로 인(因)하여 계속(繼續) 재배(栽培)가 불가능(不可能)하여 그 원인(原人)과 효과적(效果的)인 토양토양관리(土壤土壤管理) 방법(方法)을 연구(硏究) 조사(調査)하기 위(爲)하여 참외연작지(連作地)의 시비량조사(施肥量調査), 토양분석(土壤分析), 객토실시(客土實施) 효과(效果) 및 참외 수확(收穫) 후(後)의 토양관리(土壤管理) 방법(方法)에 따른 효과(效果)를 분석(分析)한 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 참외 연작장해(連作障害)는 3, 4년(年) 이상(以上) 연작시(連作時) 심해지며 장해(障害) 요인(要因)으로 염농도(鹽濃度) (EC)는 2.50 dS/m 이상(以上)에서 연장 재배가 불가능하였으며 연작장해(連作障害) 대책(對策)으로 실시(實施)하는 객토(客土)는 10a당(堂) 500 M/T를 넣고 토양시비(土壤施肥) 관리(管理)는 볏짚은 30%, 3요소(尿素)는 10% 정도(程度) 더주었을때 효과적(效果的)이었으며 그때 상품과(商品果) 및 당도(糖度)는 적어도 2년(年) 동안 각각(各各) 10%, $2.6^{\circ}$(Brix)증가 하였다. 참외 수확후(收穫後) 토양관리(土壤管理)는 참외를 6월하순(月下旬)에 수확(收穫)한 후(後) 벼재배(栽培) 하는 것이 연작(連作) 장해(障害)를 막는 방법(方法)으로 가장 좋았다. 부득이한 경우(境遇) 참외를 7-8월에 수확(收穫)한 후(後) 고온기(高溫期)에 40일간(日間) 담수(湛水) 태양열(太陽熱) 처리(處理)하거나 참외를 9-10월에 수확(收穫)한 후(後) 포크레인으로 심토(心土) 50cm이상(以上)까지 반전(反轉)하면 효과(效果)가 있었다.

• 식물조직배양학회지
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• 제26권2호
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• pp.127-132
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• 1999

4주 배양된 애기장대의 엽육조직으로부터 원형질체를 분리하여 2.0mg/L NAA, 0.5mg/L BAP및 9% mannitol이 포함된 MS 액체배지에서 $25^{\circ}C$, 암조건에서 배양하였다. 원형질체 유래 microcolonies를 dehydration시켜 배양하였을 때 non-dehydration에 비해 7배의 높은 캘러스 유도율을 나타내었다. Dehydrated microcolonies들 중에서 50개의 캘러스를 선별하여 0.05 mg/L NAA, 7mg/L 2-iP가 첨가된 MS배지에서 광조건으로 배양하였을 때 점차적으로 녹화되기 시작하였으며 배양 4주 후부터 전체적으로 녹화된 SF캘러스에서 green spots이 형성되었다 Shoot형성률은 식물생장조절물질의 종류에 따라 3.5%~56%로 나타났다. 재분화된 shoot는 식물생장조절물질이 첨가되지 않은 MS배지에서 뿌리를 유도하였으며 이들을 토양에 이식하여 완전한 재분화 식물체를 얻을 수 있었다. Shoot 형성과정을 조직학적인 측면에서 관찰한 결과, 배양초기에는 신장된 무정형의 세포가 대부분이었으나 배양이 진전됨에 따라 주위 세포들과 구별이 뚜렷한 도관요소 (tracheary element)와 분열조직군 (meristemoid)이 형성되면서 shoot primodia가 shoot로 발달되는 것을 관찰할 수 있었다. 재분화 식물체는 형태적으로 normal type이 78%이고 abnormal type이 22%였다.