• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.877-880
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• 2004

In this study, we determined the content of chitooligosaccharides (COS) in Korean commercial salt-fermented shrimps by competitive direct enzyme-linked immunosorbent assays (cdELISAs), using anti-COS mixture (COSM) antibody and COSM horseradish peroxidase (HRP) conjugate. When COS6 was spiked into salt-fermented shrimps at the level of $10-300\mu{g/g,}$ the average recovery was $120\pm19%$ ($mean\pmS.D.$). The COS contents of the 92 samples of Korean commercial salt-fermented shrimps collected during February 2000 and August 2002 were $36.3\pm20.7\mug$ COS6 equivalent/g (expressed as "$\mug/g$" hereafter). Among the samples, the COS contents of yuk-jeot ( $40.3 \pm 22.5 \mug/g, n=27$) and buksaewoojeot ($40.2 \pm 21.6 \mug/g, n=5$) were higher than the others. The COS contents of salt-fermented shrimps produced at Gwangcheon ($47.1 \pm 20.7 \mug/g, n=18$) and Gomso ($44.1 \pm 21.8 \mug/g, n=6$) areas were higher than those produced at the other areas. This is the first report to determine COS of salt-fermented shrimps by cdELISA.

• Journal of Radiation Protection and Research
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• 제22권2호
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• pp.103-109
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• 1997

수놈 흰쥐를 1.0, 2.0, 3.0, 5.0 및 7.0 Gy 선량으로 전신 조사하였으며 조사 후 48, 72, 96시간과 216시간 경과 후 혈액을 채취하였다. 혈액 내 ceruloplasmin을 측정하여 선량반응곡선을 완성하기 위하여 항원고정 방식의 경쟁적 효소면역측정법을 사용하였다. Ceruloplasmin의 정제는 turpentine을 주사한 수놈 흰쥐의 혈액을 사용하였다. Ceruloplasmin의 흡착효율은 50 mM carbonate/bicarbonate buffer, pH 9.6보다 10 mM Tris-HCI, 150 mM sodium chloride, pH 7.4에서 더 효과적이었으며 정량을 위한 적정한 ceruleplasmin의 흡착범위는 well 당 $70{\sim}140ng$이었다. Ceruloplasmin은 피폭 후 $72{\sim}96$시간에서 최대농도를 보였으며 피폭 후 96시간에서 최대값을 지니는 선량반응관계를 보였다. Cerulplasmin은 피폭 후 216시간에서도 피폭이전의 농도로 회복되지 않았다. 0.1 Gy로 피폭된 경우에도 ceruloplasmin의 농도는 피폭 후 $72{\sim}96$시간에서 최대로 증가하였으며 단백질의 농도는 대조군과 유의성 있는 변화를 관찰할 수 있었다. Cerulplasmin은 방사선피폭 후 변화하는 중요한 급성반응물질중의 하나로 밝혀졌으며 방사선방호를 위한 유전자 발현 및 조절에 관할 연구가 필요하다.

• 한국식품과학회지
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• 제36권1호
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• pp.147-151
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• 2004

난백에 NaOH, 열, 및 효소를 처리하였을 때, 난백 중의 ovomucoid(OM) 및 ovalbumin(OA)의 항원성 변화를 항OM 및 항OA 항체를 이용하여 간접경합 ELISA로 조사하였다. 효소처리는 OM의 항원성을 효과적으로 감소시키지 못한 반면 OA의 항원성은 식물성, 미생물성 protease를 사용하였을 때 약 1/5,000-1/100,000로 감소되었다. 열처리를 한 난백 중 OM은 $100^{\circ}C$까지 거의 변화하지 않으나 $121^{\circ}C$ 처리에서는 난백의 항원성이 OM은 1/250으로 감소되었다. OA의 항원성은 열처리에 의해 오히려 증가되었으며 최고 100배까지 증가되는 것으로 나타났다. NaOH를 농도별로 처리한 난백 중 OM의 항원성 변화는 0.3%부터 감소하기 시작하여 1%이상에서 항원성이 거의 제거되었다. 반면 OA의 경우는 모든 NaOH 처리농도에서 항원성이 증가하였다. NaOH 처리에 추가적인 열처리($70^{\circ}C$, 15분)를 실시한 것은 난백중 OM과 OA의 항원성 감소에 다소 효과적인 것으로 나타났다.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제5권3_4호
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• pp.29-36
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• 1990

Aflatoxins, produced by strains of Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus, can be found worldwide in corn, barley, peanuts, and other commodities. Among this group of toxins, aflatoxin B$_1$was realized to be one of the most potent environmental carcinogens, mutagens and teratogens. It is routinely monitored by methods such as thin layer chromatography, liquid chromatography, fluorodensitometric technique and radioimmunoassay. However, these assays are expensive, necessitate radioactive reagents, and require overnight incubation. In this study, the determination of fungal flora in several sorts cereals has been carried out in order to obtain an appropriate information of the population of fungi. The quantitative analysis of aflatoxin B$_1$has been carried out by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) method and Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). The results were summarized as follow: 1) From the 100 samples,313 colonies of fungi were isolated. Among the 313 colonies, 274 were possible to identify into 11 genera. The identified genera were Aspergillus Penicillium, Mucor, Rhizopus, Alternaria, Cladosorium, Fusarium, Circinella, Chrysosporium, Paecilomyces and Phoma. 2) Six of Aspergillus flavus were aflatoxin-producing strains. Aspergillus flavus isolated from sample barleys was contained the highest content (21.8 $\mu\textrm{g}$/ml) of aflatoxin B$_1$. 3) The yield of aflatoxin B$_1$-oxime compound was appromately 75%. Aflatoxin B$_1$-oxime-Human serum albumin was approved by formal consent as complete antigen. 4) Direct competitive ELISA permitted detection of 0.15 ng levels. In the quantitative microanalysis, ELISA was superior to HPLC method.

• 한국축산식품학회지
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• 제32권6호
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• pp.706-712
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• 2012

The present study was aimed to produce a chicken polyclonal antibody against Cronobacter muytjensii and to develop an immunoassay for its detection. Purification of anti-C. muytjensii IgY from egg yolk was accomplished using various methods such as water dilution and salt precipitation. As a result, sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis produced two bands around 30 and 66 kDa, corresponding to a light and a heavy chain, respectively. Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (IC-ELISA) was performed to determine the effectiveness of the chicken IgY against C. muytjensii. The optimum conditions for detecting C. muytjensii by indirect ELISA and checkerboard titration of the antigen revealed an optimum average absorbance at the concentration of 18 ${\mu}g/mL$, having ca. $10^8$ coated cells per well. The anti-C. muytjensii IgY antibody had high specificity for C. muytjensii and low cross-reactivity with other tested pathogens. In this assay, no cross-reactivity was observed with the other genera of pathogenic bacteria including Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhimurium, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Enterobacter aerogenes, Salmonella Enteritidis and Listeria monocytogenes. In addition, detection of C. muytjensii in infant formula powder showed a low matrix effect on the detection curve of IC-ELISA for C. muytjensii, with similar detection limit of $10^5$ CFU/mL as shown in standard curve. These findings demonstrate that the developed method is able to detect C. muytjensii in infant formula powder. Due to the stable antibody supply without sacrificing animals, this IgY can have wide applications for the rapid and accurate detection of C. muytjensii in dairy foods samples.

• 한국식품과학회지
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• 제32권3호
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• pp.720-725
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• 2000

여러 가지 처리가 난백의 항원성을 감소시키는데 미치는 영향을 조사하기 위하여, 토끼 항난백항체로 난백 처리물들의 간접 경합 ELISA(ciELISA)를 실시하였다. 식물성, 동물성, 미생물성의 9가지 효소를 이용한 가수분해처리는 난백의 항원성에 영향을 주지 못했다. 보다 효율적인 효소 가수분해를 위해 방사선 조사 후, 효소처리를 실시했는데, 이것 역시 항원성을 감소시키지 못했다. Trifluoromethanesulfonic acid 처리는 난백의 항원성을 거의 제거시키는 것으로 나타났다. 열처리는 $121^{\circ}C$ 고온처리의 경우에서만 반응성이 1/10,000이하로 감소하여 항원성이 거의 사라졌다. NaOH 단독 처리는 0.3%(w/v) 이상의 농도에서 반응성이 감소되기 시작하여, 1%(w/v) 이상에서는 반응성이 1/10,000이하로 감소하였다. NaOH 처리에 $70^{\circ}C$, 15분간의 열처리를 더해 주면, NaOH 단독 처리시보다 효과적으로 항원성이 감소되는 것으로 나타났다.

• 한국식품과학회지
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• 제30권6호
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• pp.1409-1414
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• 1998

Zearalenone에 특이한 단크론성 항체를 개발하기위하여 형질세포종세포인 myeloma cell $(P3{\times}63Ag.V653)$과 zearalenone-oxime-bovine serum albumin (BSA) 결합체를 항원으로 면역시킨 BALB/c female mice의 비장세포를 융합시켜 hybridoma cell을 생산하였다. 그들의 항체가를 indirect competitive ELISA법으로 측정한 결과 zearalenone에 대하여 높은 친화력을 갖는 5세포주를 얻었다. 그중 Z-2-M26 hybridoma cell line이 생산하는 단크론성항체는 특히 zearalenone과 민감하게 반응하였고, ${\alpha}-zearalenol$과도 약간의 교차반응을 보였으나 ${\beta}-zearalenol,\;{\alpha}-zearalenol,\;{\beta}-zearalenol$ 및 DON과는 거의 반응하지 않았다. 따라서 본 실험에서 개발된 항체는 앞으로 zearalenone에 대한 민감하고 정량적인 효소면역측정법의 개발을 위한 중요한 면역시약으로 사용될 것으로 생각한다.

• 한국식품과학회지
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• 제26권5호
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• pp.532-538
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• 1994

Chymotrypsin, trypsin, pancreatin, 그리고 Aspergillus oryzae 유래 단백질분해효소의 in vitro 처리에 의하여 유청단백질(WPI)의 가수분해물(WPH)중 ${\beta}-LG$유래의 항원성변화를 조사하기 위하여 토끼 항${\beta}-LG$항혈청을 이용한 competitive inhibition ELISA(cELISA)와 heterologous PCA를 실시하였다. cELISA에 의하여 WPH의 monovalent항원성을 분석한 결과, 전체적으로 ${\beta}-LG$유래의 monovalent항원성은 효소처리에 의하여 $10^{-1.7}{\sim}10^{-4.1}$배 또는 그 이하로 저하되었으며, 특히 pepsin전처리후 Asp. oryzae유래의 효소로 가수분해한 경우(OUP)의 항원성은 거의 상실되었다. Guinea pig를 이용한 PCA test에 의하여 ${\beta}-LG$유래의 polyvalent항원성을 분석한 결과, WPH의 항원성은 $1/2{\sim}1/128$ 또는 그 이하로 저하되었다. 특히, WPH중에서 열변성이나 pepsin의 전처리없이 Asp. oryzae유래의 효소로 가수분해한 경우(OUN), 가수분해도(DH)가 그다지 높지 않고 monovalent항원성도 여전히 잔존하였음에도 불구하고($10^{-3.2}$배로 저하) 알레르기의 발증과 밀접한 관련이 있는 polyvalent항원성은 거의 상실되었다. 이는 OUN의 분해효율이 아주 높지는 않으나 ${\beta}-LG$상의 항원결정기가 효과적으로 파괴되어, polyvalent항원성이 제거되었기 때문으로 추측된다. 이 결과는, Asp. oryzae유래의 효소를 WPI에 처리하면 우유 알레르기의 주요 원인물질인 ${\beta}-LG$의 polyvalent항원성이 제거됨으로써 저알레르기성 infant formula용 WPH가 제조될 수 있음을 시사하고 있다.

• 한국식품과학회지
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• 제30권4호
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• pp.862-870
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• 1998

Myosin과 그 subfragment인 S-1과 LMM를 항원으로 하는 간접경합 효소면역분석법(Ci-ELISA)을 이용하여 동결육의 변화를 연구함으로써 수입 냉동육과 국내산 냉장 한우육과의 차별화를 위한 기초 자료를 마련하기 위하여 본 연구를 실시하였다. 각 항체의 표준곡선을 작성하였으며 최적반응범위는 $4{\sim}125{\;}{\mu}g/mL$이었고, 검출한계는 $0.1{\;}{\mu}g/mL$이었다. 확립된 Ci-ELISA를 이용하여 각각 $-10^{\circ}C,{\;}-20^{\circ}C,{\;}-50^{\circ}C$, 그리고 $-80^{\circ}C$에서 동결 기간 동안의 변화와 해동과 재동결에 따른 변화를 측정하였을 때 동결 기간 중 anti-MWM IgG와 반응한 myosin은 비교구와 비교하였을 때 $-20^{\circ}C$에서 변성도가 가장 컸으며 $-50^{\circ}C$에서 가장 적게 변성되었다. 단백질 용해성의 변화와 myosin과 항체와의 면역 친화성을 비교하였을 때 용해성이 감소하는 속도보다 더 빠르게 myosin이 변성되는 것으로 판단되었다. Anti S-1 IgG의 면역 친화성의 변화는 anti-MWM IgG에서 얻은 결과와 비교하였을 때 전혀 다른 경향을 보였다. anti-MWM IgG는 면역 친화성이 1개월 이후 급격히 감소된 데 비하여 anti S-1 IgG는 그와 같은 큰 변화를 나타내지 않았다. 반복되는 해동과 재동결 처리에서 anti-MWM IgG는 myosin과의 반응에서 2회 해동시부터 공격한 반응성의 감소를 보였으며 6회 해동시에는 85%까지 반응력을 상실했다(P<0.05). 두 실험 조건에서 $-20^{\circ}C$의 처리구의 myosin이 가장 심한 영향을 받은 것으로 나타났다. Anti-LMM IgG는 anti-MWM IgG에서 얻은 결과와 매우 유사한 경향을 보였다. $-10^{\circ}C$와 $-20^{\circ}C$에서 처리된 우육의 myosin은 저온에서 처리된 시료의 그것보다 보다 약 $10{\sim}15%$ 정도 더 많은 변성을 보인 것으로 사료된다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제34권3호
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• pp.922-926
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• 2013

3,3',4,4'-Tetrachlorobiphenyl (IUPAC PCB77) is one of seven indicative polychlorinated biphenyls (PCBs) in the surface sediments. The current study presents a novel polyclonal antibody for the determination of the PCB77 using indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay. Under optimum conditions, PCB77 was determined within the concentration range of 0.01-100 ${\mu}g\;L^{-1}$, with a detection limit of 0.057 ${\mu}g\;L^{-1}$. The assays were tested for their cross-reactivity profiles using 3 selected congeners and 4 Aroclor products. The assays were highly specific for coplanar PCB congeners, but less specific for Aroclor1248. The spiked recoveries from five sediment samples were 86%-114% for PCB77 from ELISA, which were satisfactory. The current study demonstrated that the developed antiserum and immunoassay procedure can be used to detect PCB77 in environmental samples. The results of the sediment analysis were confirmed by conventional GC/ECD.