Hirudin is a potent inhibitor of thrombin, which was originally obtained from the medicinal leech (Hirudo medicinalis) Now it is being produced through the recombinant technology on a large scale. Recombinant hirudin has been assayed for the anticoagulant activity by the measurement of clotting time and the inhibition of thrombin actvity using a chromogenic substrate. The assay range of partial thromboplastin time and thrombin time is within $0.2{\sim}1.0 {\mu}g/mι.$ Thrombin time is more sensitive to the measurement of clot. Ex vivo study showed the level of hirudin in rat plasma was highest in 10 min and then it was eliminated slowly. The half-life of r-hirudin was 80~110 min depending on the assay methods. Intraveneous injection of russel viper venom was used for thrombus induction combined with vents cava ligation. Inhibition of venous thrombosis was observed with i.v. hirudin. It was dependent on the concentration of hirudin.
박테리아 Bacillus sp. K-295G-7이 생산하는 두유응고효소 I 및 II에 의한 11S globulin (glycinin)의 가수분해 패턴을 조사하였다. 효소 I 과 II에 의한 acidic subunit의 응고시간은 약 4-5 분이었다. 전기 영동의 결과, acidic subunit (A$_3$, M.W=45,000)는 효소반응 2분 이내에 완전히 가수분해되어 분자량 16,000, 20,000의 새로운 band를 형성하였다. 한편 효소 II의 작용으로 약 30,000의 분자량을 가진 분해산물을 생성하였고 효소 I 과 II의 basic subunit 에 대한 가수분해 패턴은 유사하였다.
활성화시킨 Succinylaminopropyl glass beads에 glutaraldehyde을 사용하여 고정화시킨 Mucor spp L42 응유효소를 치즈 커드 형성과정에 이용하고져 고정화 효소의 안정성, 재이용성, 반응의 조건, 반응조의 형태등에 대하여 탈지유(pH 5.6, $8^{\circ}C$)를 사용하여 반응시킨후 $30^{\circ}C$ 항온수조내에서 커드의 형성 상태를 조사하였던바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 고정화 Mucor spp L42 응유효소를 0.2M phosphate buffer(pH 4.6)에 0.06% sodium azide을 첨가한 액에 침지한 상태로 $5^{\circ}C$ 이하에서 보존할 경우 3개월 후에도 활력의 80%가 유지되었다. 2) 고정화 Mucor spp L42 응유효소를 탈지유(pH 5.6, $8^{\circ}C$)로 반응시켰을때 반응 초기에는 고정화 효소의 활력이 급격히 감소하였고, 이것은 bead에 결합되는 질소화합물과 효소의 활력간에 관계가 있는 것으로 나타났다. 3) 고정화 Mucor spp L42 응유효소에 bead와 탈지유의 접촉시간을 60 sec/ml로 하여 탈지유(pH 5.6, $8^{\circ}C$)로 연속적으로 반응시켰을때 6시간 이후에도 bead의 활력의 70%가 유지할 수 있었다. 4) Fluidized bed와 shaking fluidized bed을 사용하는 것이 충진반응조 보다 탈지유의 반응속도가 높았다.
Objectives : The aim of this study is to research an anti-thrombus effect by Diospyros Kaki Calyx. Methods : The healthy human plasma were gained and used in vitro study such as factor X activity (FXa) inhibition, prothrombinase inhibition, prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time. Fifteen SD rats were divided into three groups ; intact control group (orally administrated with distilled water 5ml/kg) and two experimental group treated with extract of diospyros kaki calyx (EKC). Experimental rats were orally 600 mg/kg concentration of EKC and 200 mg/kg concentration of EKC. After an hour from administration, we anesthetized rats and made arteriovenous (AV) shunt rat models to study weight of thrombus, took whole blood to study content of thromboxane B2 and blood clotting time. Results : In vitro, EKC significantly increased inhibitory activity of FXa, prothrombinase compared with intact control group ($^*P$ <0.05). PT and aPTT were increased in EKC treated (600 mg/kg) group compared with intact control group ($^*P$ <0.05). In vivo, blood clotting time of experiment group treated with EKC 600 mg/kg were significantly increased compare with that of intact control group (p<0.05) and content of thromboxane B2 was significantly decreased in group treated with EKC 600 mg/kg in serum. The weight of thrombus were significantly reduced in group treated with EKC 600 mg/kg compared with intact control group (p<0.05). But in vivo experiment study, those parameters of group treated with EKC 200 mg/kg were relatively decreased compared with those of intact control group without statistical significance. Conclusions : EKC has an antithrombic activity because of inhibition internal course such as FXa and prothrombin. And EKC inhibited a hole blood clotting in vivo experiment by low content of thromboxane B2.
Amygdalin has been used for a long time as an anticancer agent. But because of its toxicity, it is difficult to administer continuously for treatment of cancer. This paper was attempted to reduce the side effect and toxicity of amygdalin. That is, effects of cysteine and streptomycin on the toxicity of amygdalin were investigated in rats orally administered amygdalin. 1. The group administered only amygdalin 400 mg/kg was effected on the lung and body weight, hematocrit, hemoglobin, clotting time, SGOT and albumin value. That is, lung and body weight, hematocrit hemoglobin and albumin value were significantly decreased. SGOT and clotting time were significantly increased compared with those of normal group. 2. Weight of lung was significantly increased in the C group (administred amygdalin 400 mg/kg and cysteine 300 mg/kg), D group (amygdalin 400 mg/kg and streptomycin 10 mg/kg), E group (amygdalin 400 mg/kg, streptomycin 10 mg/kg and cysteine 200 mg/kg)and F group (amygdalin 400 mg/kg, streptomycin 10 mg/kg and cysteine 300 mg/kg). 3. Values of hematocrit and hemoglobin were significantly increased, and clotting time was significantly decreased, in the I group and F group compared with those of A group. 4. SGOT was significantly decreased in the C group, E group and F group compared with that of A group. 5. The blood cyanide concentration was significantly decreased in the E group and F group compared with that fo A group. 6. In short, coadministration of cysteine and streptomycin are considered to reduce the toxicity of amygdalin in rats orally administered.
Microvel double velour graft impregnated with a biodegradable algin was studied as a new vascular graft. It is blood tight but still retains high porosity. Thls graft does not need to be preslotted with blood before implantation and has good tissue ingrowth and biological healing properties. The algin impregnated vascular graft was investigated by "in vitro" tests in this study. It was characterl zed by ESCA analysis, SEM observation, and measurements of water permeability, algin coating weight, mechanical properties and whole blood clotting time. The water permeability of the graft was reduced more than 99% and the whole blood clotting time was fast more than three times by the algin impregnation treatment. "In vivo" performance examinations of the algin impregnated graft are on progress.aft are on progress.
Ion beam enhanced deopsition(IBED) was adopted to synthesize biocompatible titanium oxide film. Structure characteristics of titanium oxide film were investigated by RBS, AES and XRD. The blood compatibility of the titanium oxide film was studied by measurements of blood clotting time and platelet adhesion. The results show that the anticoagulation property of titanium oxide film is improved significantly. The mechanism of anticoagulation of the titanium oxide film was discussed.
The objective of this research was to compare the flushing effects using 1:1,000 diluted heparin or 0.9% normal saline in relation to needle gauge and frequency of IV medications. The comparative categories were clotting, duration of patency, and incidence of phlebitis. The design of research was a Nonequivalent Control group, Post test, Nonsynchrorized Design. The independent variable was 0.9% normal saline flushing the IV locks and the dependent variables were clotting, duration of patency, and incidence of phlebitis. Subjects were medical-surgical inpatients over 15 years old and with peripherally placed IVs who were hospitalized in a university medical center. Exclusion criteria included foreigners and those who were rejected for this research. The final sample for data analysis included 295 IV sites in 194 patients; 154 were in the saline group and 141 were in the heparin group. Subjects were assigned to have IV locks is flushed with 0.9% normal saline in the experimental group and to have IV lock flushed with 1:1,000 diluted heparin(100 units) in the control group. In order to increase reliability, the nurses who were assigned to the units involved in the study received an explanation on the standard method for locking an IV, recording method for observational data and criteria for the detection of phlebitis. Data were collected for a period of 2 weeks, from March 16, 2000 to March 29, 2000. Total duration of IV was defined the time of IV insertion to the time of discontinuation. Phlebitis was defined as the presence of the following : pain, swelling. erythema at the insertion site. Chi-square was used to determine the association between the degree of clotting, duration of patency, and incidence of phlebitis for the diluted heparin or the normal saline and needle gauge and frequency of IV medications. The results are summarized as follows : (a) There was difference in the degree of clotting between two groups($X^2=5.882$, p=.015). (b) There was no difference in the degree of duration of patency between two groups($X^2=2.439$, p=.295). (c) There was no difference in the incidence of phlebitis between two groups($X^2=0.190$, p=.663). (d) There was difference in the degree of clotting($X^2=6.209$, p=.013) and in the degree of duration of patency($X^2=6.978$, p=.031) according the needle guage between the two groups. (e) There was difference in the incidence of phlebitis($X^2=5.008$, p=.025) according to the frequencies of IV injection between two groups.
This study was conducted to examine the effect of dietary iron levels on lipid metabolism, antioxidative and antithrombogenic capacities in 16-month-old rats. Thirty-two Sprague-Dawley male 16-month-old rats weighing 618 $\pm$ 6 g were raised for 10 days with medium-iron diet (35 ppm in diet) and blocked into 4 groups according to their body weights. One of groups was sacrificed to obtain initial data and the rest 3 groups were raised for 3 months with experimental diets containing different levels of iron (5 ppm, 35 ppm, and 350 ppm). Total lipid, triglyceride and total chole-sterol concentrations in plasma and liver, HDL-cholesterol concentration in plasma, fecal total lipid triglyceride and total cholesterol excretions, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level in plasma LDL + VLDL (low density lipoprotein + very low density lipoprotein) fractions, blood-clotting time and eicosanoids levels in plasma were measured. The results are as follows: Plasma total lipid, triglyceride and total cholesterol concentrations, TBARS level in plasma LDL + VLDL fractions were increased and blood-clotting time tended to be shortened during 3 months of experimental period. Low (5 ppm) iron diet improved lipid metabolism via increasing HDL-cholesterol and fecal choles-terol excretion. High (350 ppm) iron diet decreased plasma total lipid, triglyceride and total cholesterol concentrations as compared to medium (35 ppm) iron diet and lowered body weight and epididymal fat pad weight. On the other hand, TBARS level in plasma LDL + VLDL fractions and blood-clotting time were increased with high iron diet. It is plausible that low iron diet improves lipid metabolism, antioxidative and antithrombogenic capacities in 16-month-old rats.
SK-1080 is one of the newly developed orally active nonpeptide angiotensinII $AT_1-receptor$ antagonist that selectively acts at $AT_1$ receptor with high affinity. The cardiac effect on ischemia/reperfusion injury of SK-1080 was compared with those of losartan, a prototype of this class, in isolated rat hearts. Isolated perfused rat heart was pretreated with drug for 10 min and then subjected to global ischemia for 30 min followed by reperfusion with- or without drug for 30 min. The possible additive effect of SK-1080 on the platelet aggregation and coagulation in human blood was also studied. We investigated whether SK-1080 effects the platelet aggregation induced by ADP, a platelet agonist partially dependent on $thromboxaneA_2$. The clotting times in the prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (APTT) were also examined in human plasma in vitro as coagulation screening test. SK-1080 improved reperfusion function (LVDP, left ventricular developed pressure; PRP, rate-pressure product) in a dose-dependent manner. SK-1080 reduced ADP-induced platelet aggregation compared with vehicle but less than losartan, and did not affect clotting times.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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