In this study, we investigated the biological activity of antioxidant and antibacterial activity of citrus by-product ferment. Among the six probiotic bacteria, Bacillus subtilis and Saccharomyces cerevisiae had the highest antioxidant activity. Hot water extracts from citrus by-product of ferment were screened for antibacterial activity fish pathogenic bacteria by paper disc method. Among the various hot water extracts, the Bacillus subtilis, Saccharomyces cerevisiae, Pediococcus pentosaceus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Enterococcus faecium showed relatively strong antibacterial activities in the order. The reducing activity on the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical and $O^{2-}$ and OH radical scavenging potential were sequentially screened, in search for antioxidant activities of citrus by-product ferment.
We developed a rapid isolation method for fractionation of polysaccharides with different characteristics, and optimized it for the polysaccharide mixture from Korean citrus peels. A crude polysaccharide mixture, citrus-peel-enzyme (CPE) fraction was isolated from the citrus peels digested with pectinase and ethanol precipitation. CPE was further fractionated with serially diluted ethanol solution (ethanol:deionized water=8:1, 4:1, 3:1, 2:1, 1.5:1, 1:1, and 0.5:1) to produce seven fractions labeled from CPE8 to CPE0.5. Fraction from CPE8 to CPE1 were mostly composed of 11 different sugars, including rhamnogalacturonan (RG) I and II, and the sugars contained arabino-${\beta}$-3,6-galactan moiety. However, CPE0.5 did not contain RG-II and arabino-${\beta}$-3,6-galactans. Treatment of macrophages with fractions CPE8-CPE1 led to a dose-dependent increase in interleukin-6 production (IL-6), while treatment with CPE1 and CPE0.5 fractions resulted in decreased levels of IL-6. These results indicate that this isolation method may be useful for the rapid fractionation of bioactive RGs from polysaccharide mixtures.
Polygalacturonase (PG) produced by Botrytis cinerea in the culture broth containing citrus pectin as a carbon source was partially purified and characterized. PG was produced on a range of carbon sources such as starch, glycerol, cellobiose, and Na+-PAG with total activities of 34.8, 32.0, 29.2, 27.8 units, respectively. The specific activity was highest with 2316.7 units on Na+-PGA. Proteins of culture filtrate were concentrated with polyethylene glycol and acetone and applied to a hydroxyapatite column. Among three active fractions collected from the column, the reaction containing the highest PG activity was resolved by a Q-sepharose column. The active fraction from the Q-sepharose column was further purified by HPLC Mono Q column. The partially purified enzyme was analyzed by 10% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Among a few protein bands revealed, the amount of the protein of which molecular weight estimated to be 43 kDa coincided with the PG activity. The partially purified PG had optimal temperatures between 35~55$^{\circ}C$ and pH between 4.5~5.5.
Potential health promoting effects such as antiallergic, anti-inflammatory, antiviral, anticancer and anticarcinogenic properties have been ascribed to citrus flavonoids. Dietary fibers have also been used as functional food components due to the various beneficial physiological activities. Two kinds of flavonoids, naringin and hesperidin, were identified both in the pulp and in the peel of Korean tangerine. The contents of naringin and hesperidin in the pulp were 2.95 mg/100 g and 0.53 mg/100 g, respectively. However, the contents of naringin and hesperidin in the peel were much higher (10.77 mg/100 g and 38.90 mg/100 g) thanthose of two identified flavonoids in the pulp. The content of soluble dietary fiber (SDF) in the pulp of tangerine was 1.90%, insoluble dietary fiber (IDF) 0.37%, and total dietary fiber (TDF) 2.27% based on wet matter, respectively. The content of SDF was 1.09%, IDF 4.77% and TDF 1.86% in the peel of tangerine. The total pectin content was 1.53% in the pulp and 0.94% in the peel of tangerine. The peel of Korean tangerine, a by product in tangerine processing, would be a good source for the production of naringin, hesperidin and pectin.
Effect of citron on Dongchimi (watery radish kimchi) fermentation was investigated by sensory evaluation and the measurement of non-volatile organic acids, soluble pectin, and the texture during fermentation up to 36 days. Dongchimi with various levels of citron (0, 1, 2, 4, 6%) was fermented at 10$^{\circ}C$. In sensory evaluation, citron-added Dongchimi showed the higher scores in most characteristics than Dongchimi without citron in which Dongchimi with 2% citron was the most preferable. The non-volatile organic acids of Dongchimi were identified as lactic acid, oxalic acid, succinic acid, malic acid, and citric acid. There were significant changes in the contents of lactic acid, succinic acid, malic acid, and citric acid during fermentation. Generally, the content of hydrochloric acid-soluble pectin (HSP) of Dongchimi occupied the higher ratio in the total soluble pectin content. Generally, the content of hot water-soluble pectin (HWSP) of Dongchimi decreased and that of sodium hexametaphosphate-soluble pectin (NaSP) increased during fermentation. The hardness of radish in Dongchimi showed the highest score on 23$\^$rd/ day and decreased thereafter.
Botrytis cinerea T91-1 has been shown to produce at least four different polygalacturonases into a liquid medium containing citrus pectin, a carbon sousrce. One of the enzymes, which had an apparent molecular weight of 66 kDa estimated by denatured polyacrylamide gel electrophoresis, was purified to electrophoretic homogeneity by a series of procedures including a cetone precipitation, ion exchange, heparin affinity, and reverse phase column chromatographies. The molecular weight of native enzyme was determined to be 64 kDa by gel permeation chromatography indicating the enzyme to be a single polypeptide chain. By viscometric analysis, the enzyme was revealed as exo-polygalacturonase. The enzyme activity was inhibited by divalent cations such as $Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$, and Cu$^{2+}$. Km and Vmax for polygalacturonic acid hydrolysis were 0.33 mg/ml and 28.6 nM/min, respectively. The optimum temperature for enzymatic activity was 5$0^{\circ}C$. And the enzyme showed optimal pH values between 4.0 and 5.0. The enzyme was stable upto 12 hours in the range of pH 3 to 8 and at temperature below 3$0^{\circ}C$.
Satsuma mandarin(Citrus unshiu Marc. var. miyagawa) was stored at $3^{\circ}C$ and 85% relative humidity, and then the changes of firmness, pectin- degrading enzymes activity and other physicochemical properties of citrus fruits during storage were investigated. Firmness of fruits with 2 m probe was decreased quickly from 1,176.8 g-force to 503.6 g-force, and moisture of peel and flesh were decreased from 75.3% to 74.9%, and from 91.8% to 90.7% during maturation, respectively. Decay ratio was increased to 18.75% after 90 days' storage, and after then it was increased rapidly. Weight loss was increased gradually to 24.5% during long-term storage. Firmness with 2 mm probe were decreased from 538.9 g-force to 336.9 g-force gradually during storage. Peel moisture was decreased from 75.8% to 72.6%, and flesh moisture was also decreased gradually from 90.3% to 88.3% during storage. Exopoly-galacturonase activity of peel and flesh were increased from 326.0 units/100 g to 534.9 units/100 g, and from 63.1 units/100 g to 81.0 units/100 g at 90 day's storage, respectively. After then, He enzyme activities were decreased from 394.0 units/100 g and 38.0 units/100 g, respectively. Pectinesterase activity of peel and flesh were increased from $14.4\;{\mu}mol$ to $38.8{\mu}mol$, and from $26.0{\mu}mol$ to $39.0{\mu}mol$ at 60 days' storage, respectively. After then, the enzyme activities were decreased to $6.0{\mu}mol$ and $8.2{\mu}mol$, respectively.
Acidic endo-polygalacturonases are the major part of pectinase preparations and extensively applied in the clarification of fruits juice, vegetables extracts, and wines. However, most of the reported fungal endo-polygalacturonases are active and stable under narrow pH range and low temperatures. In this study, an acidic endo-polygalacturonase (EPG4) was purified and characterized from a mutant strain of Penicillium oxalicum. The N-terminal amino acid sequence of EPG4 (ATTCTFSGSNGAASASKSQT) was different from those of reported endo-polygalacturonases. EPG4 displayed optimal pH and temperature at 5.0 and 60-70℃ towards polygalacturonic acid (PGA), respectively, and was notably stable at pH 2.2-7.0. When tested against pectins, EPG4 showed enzyme activity over a broad acidic pH range (>15.0% activity at pH 2.2-6.0 towards citrus pectin; and >26.6% activity at pH 2.2-7.0 towards apple pectin). The Km and Vmax values were determined as 1.27 mg/ml and 5,504.6 U/mg, respectively. The enzyme hydrolyzed PGA in endo-manner, releasing oligo-galacturonates from PGA, as determined by TLC. Addition of EPG4 (3.6 U/ml) significantly reduced the viscosity (by 42.4%) and increased the light transmittance (by 29.5%) of the papaya pulp, and increased the recovery (by 24.4%) of the papaya extraction. All of these properties make the enzyme a potential application in the beverage industry.
Long-term storage technology was developed to extend shelf-life of citron (Citrus junos). Changes in quality characteristics of blanched and frozen citron peels (type A, without blanching for control; type B, blanched at $95^{\circ}C$ for 2 min; type C, blanched at $95^{\circ}C$ for 2 min, sugar added; type D, blanched at $95^{\circ}C$ for 5 min) during frozen storage were evaluated. Citron jam was prepared using frozen citron sample B, which showed the highest quality characteristics during storage, and high quality characteristics, such as yield and overall acceptability, were obtained when using 40% frozen citron, 41% sugar, 18.56% glutinous starch syrup, 0.39% pectin, and 0.05% citric acid. During storage of both blanched and frozen citron peels and citron jam made of frozen citron peel, changes in characteristics such as pH, total acids, soluble solids, and browning, were lower than those of control. Sensory evaluation for sourness, sweetness, and overall acceptability of citron jam made with frozen citron peel during storage showed higher values than those of control.
Delphi, Ladan;Sepehri, Houri;Khorramizadeh, Mohammad Reza;Mansoori, Fatemeh
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.16
no.13
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pp.5265-5271
/
2015
Background: The effects of plant products on cancer cells has become a field of major importance. Many substancesmay induce apoptosis in anti-cancer treatment. Pectins, a family of complex polysaccharides, and their degradation products may for exasmple exert apoptotic effects in cancer cells. Apples and citrus fruits are the main sources of pectin which can be applied for anti-cancer research. The present study concerned an intact form of pectic-oligoshaccharide named pectic acid (poly galactronic acid). Materials and Methods: Inhibition of cell proliferation assays (MTT), light microscopy, fluorescence microscopy (acridin orange/ethidium bromide), DNA fragmentation tests, cell cycle analysis, annexin PI and Western blotting methods were applied to evaluate apoptosis. Results: The results indicated that pectic acid inhibited cell growth and reduced cell attachment after 24h incubation. This did not appear to be due to necrosis, since morphological features of apoptosis were detected with AO/EB staining and cell cycling was blocked in the sub-G1 phase. Annexin/PI and DNA fragmentation findings indicated that apoptosis frequency increased after 24h incubation with pectic acid. In addition, the data showed pectic acid induced caspase-dependent apoptosis. Conclusions: These data indicate that apple pectic acid without any modification could trigger apoptosis in MDA-MB-231 human breast cancer cells and has potential to improve cancer treatment as a natural product.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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