Direct EPR evidence of the photo-generation of superoxide radicals ( $O_2$$^{-.}$) was obtained by using spin trapping techniques in spinach photosystem II (PSII) membranes. $O_2$$^{-.}$ was detected by following the formation of 5-diethoxyphosphoryl-5-methyl-1 -pyrroline-N-oxide (DEPMPO) superoxide adducts, DEPMPO-OOH. The significant increase of the EPR signal amplitude of DEPMPO-OOH in N$H_2O$H-, CaC $l_2$- and NaCl-treated PSII membranes showed that the oxygen-evolving system has a close relation to the $O_2$$^{-.}$ production. PSII membranes with inactivated donor side could not prevent the $O_2$$^{-.}$ production efficiently. Treatments on PSII donor side also influence the maximum level and the kinetics of Chlorophyll (Chi) a fluorescence. Results suggested that manganese cluster and extrinsic proteins might affect Chi a fluorescence in ways different from that happens at the acceptor side of PSII.SII.SII.
This study was carried out to investigate the morphological characteristics of the plants and seeds of Ainsliaea acerifolia and to determine the optimum condition for producing sprouts from the seeds. Plant height, flower stalk length, and pod number were higher in natural habitat than in campus farm. Average 1.2 seeds per pod was set but only 0 to 2 seeds per plant was set in plants with the enveloped flower stalks, indicating that this is an outcrossing species. Most of seeds were 9-11mm long and 1.1-1.4mm wide. Fresh weight of seeds was ranged from 10mg to 17mg. Seeds germinated well at 15$^{\circ}C$ and 2$0^{\circ}C$. Mean germination period was 11.5 day at 15 to $25^{\circ}C$. Sprouts grown at 15$^{\circ}C$ was longest(5.4cm) and heaviest(738mg/10 sprouts). Chlorophyll content was 333mg per fresh weight 110g. Protein, Fe, vitamin Bl, vitamin B2, and vitamin C were respectively 23.7mg, 6.4mg, 1.82mg, 0.49mg, and 10..7mg.
In order to investigate biochemical activities of harvested tobacco leaves, photosynthetic rate, soluble protein contents, and peroxidale activities were analysed during different maturing period. Physiological activities of harvested leaves during maturing period were higher in topped than those of non-topped plants. Chlorophyll content and photosynthetic rate in both topped and non-topped plants decreased at 4 days and 3 days before harvest, respectively. The chloroplast numbers in topped and non-topped plants decreased at 3 days and 5 days before harvest, respectively. Changes of soluble protein and total RNA contents showed similar patterns during maturing period. Soluble protein contents were slightly decreased from 5 days before harvest in topped plants, but decreased drastically from 3 days before harvest in non-topped plants. Not much changes were found in total RNA contents in topped plants until 2 days before harvest, and it was largely decreased after 5 days before harvest in non-topped plants. The peroxidase activities drastically decreased in topped plants and increased in non-topped plants after 3 days before harvest during maturing period. The largest change of biochemical activities in tobacco leaves during maturing periods were observed at 3 days before harvest.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2022.10a
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pp.189-189
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2022
Soil salinity negatively affects plant growth, productivity, and metabolism. Rice is known to have more sensitive phenotypes than other cereal crops, such as wheat, sorghum, and barley. We characterized the molecular function of rice C3HC4 as a really interesting new gene (RING). Oryza sativa RING finger protein H2-3 (OsRFPH2-3) was highly expressed in 100 mM NaCl. To identify the localization of OsRFPH2-3, we fused vectors that include C-terminal GFP protein (35S;;OsRFPH2-3-GFP). OsRFPH2-3 was expressed in the nucleus in rice protoplasts. An in vitro ubiquitin assay demonstrated that OsRFPH2-3 possessed E3-ubiquitin ligase activity. However, the mutated OsRFPH2-3 were not possessed any E3-ubiquitin ligase activity. Under normal conditions, there is no significant phenotypic difference between transgenic plants and WT plants. However, OsRFPH2-3-overexpressing plants exhibited higher fresh weight and length under saline conditions. Also, transgenic plants maintain higher chlorophyll, proline, and soluble sugar contents and lower H2O2 and MDA contents than the wild type; these results support transgenic plants with enhanced salinity tolerance phenotypes.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2023.04a
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pp.156-156
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2023
Salinity is a major abiotic stress that limits rice productivity in many regions of the world. In order to develop salt stress tolerant rice plants, genetic engineering is a promising approach. We characterized the molecular function of rice C3H2C3 as a really interesting new gene (RING). Oryza sativa RING finger protein H2-3 (OsRFPH2-3) was highly expressed in 100 mM NaCl. To identify the localization of OsRFPH2-3, we fused vectors that include C-terminal GFP protein (35S;;OsRFPH2-3-GFP). OsRFPH2-3 was expressed in the nucleus in rice protoplasts. An in vitro ubiquitin assay demonstrated that OsRFPH2-3 possessed E3-ubiquitin ligase activity. However, the mutated OsRFPH2-3 were not possessed any E3-ubiquitin ligase activity. Under salinity conditions, OsRFPH2-3-overexpressing plants exhibited higher chlorophyll, proline, SOD, POD, CAT, and soluble sugar contents and lower H2O2 accumulation than wild-type plants, supporting transgenic plants with enhanced salinity tolerance phenotypes. OsRFPH2-3-overexpressing plants exhibited low Na+ accumulation and Na+/K+ ratios in their roots. Theses results suggest that overexpression of OsRFPH2-3 can make plant insensitivity about salinity conditions.
The effects of allelochemicals from medicinal plants have been studied as photo-synthetic inhibitor for photoautotrophic(PA) cultured cells. The extracts from 9 plant species were used for measuring the physiological effects on the liverwort cultured cell in following areas; germination inhibition, chlorophyll contents, hill activity, cell viability, photosynthetic oxygen evolution,and protein pattern changes on SDS PAGE. Germination inhibitions were detected in all plant after treating with 10% extract. Especially, treatment with 10% extract from Pulsatilla koreana and Aconitum carmichael inhibited germinations completely. Chlorophyll fornation was inhibited completely by treating PA cells with extract of Pulsatilla koreana, whose effect was similar to that of DCMU 10-3M, inhibitor for photosynthetic electron trans-fer. The treatment with extract from Pulsatilla koreana on PA cell showed the highest hill activity and the lowest cell viability among extracts studied. Oxygen releasing has been decreased down to 14-77% after treating with extracts from Pinellia ternata, Araliacont inentaila, Pulsatilla koreana and Vitex rotundifolia. Especially, 60$\mu$l of Pulsatilla koreana extract into 2ml mixture of PA cell inhibit-ed oxygen release up to 50%. Protein bands on SDS-PAGE, 14kD, 31kD, 41kD, 53kD, and 73kD, were not detected after treating Pulsatilla koreana extract on PA cells.
The relationship between water deficit stress and monodehydroascorbate reductase (MDHAR) activity was determined in lettuce (Lactuca sativa L.) leaves under water stress condition imposed by with-holding water for 72 hrs. Relative water content determined in water deficit stressed lettuce leaves gradually reduced from 91.29% to 74.58%, and water content of medium drastically decreased 4.73% after quitting of irrigation. Hydrogen peroxide content in leaves subjected to water deficit stress rapidly increased, but soluble protein content rapidly decreased when those were compared to control plant. The relationship between relative water content and hydrogen peroxide content in stressed leaves positively correlated with $R^2$=0.8851, but soluble protein content reversely correlated with $R^2$=0.9826. Total chlorophyll content in stressed plant leaves was higher than that of control plant, and increased rapidly in early stage of treatment of both stressed and control plants. Carotenoid content was higher than that of control plant, and the ratio of carotenoid to total chlorophyll in stressed plant was higher as compared to control plant. As water deficit stress continued progressively, total ascorbate content in stressed plant leaves was a little higher than that of control plant. But dehydroascorbate (DHA) content within 6 hr of water deficit stress was higher than that of control plant, and then, content of control plant in 12 hr of stress treatment higher than that of stressed leaves. The activity of monodehydroascorbate reductase of cytosolic and chloroplastic tractions increased dramatically, and mRNA of MDHAR was highly detected by probing $^{32}P$-labeled single stranded MDHAR RNA of lettuce plant leaves subjected to water deficit stress. Relationship between MDHAR activity and relative water content and hydrogen peroxide highly correlated with $R^2$=0.9937 and 0.8645, respectively.
Photosynthesis uses light energy to drive the oxidation of water at an oxygen-evolving catalytic site within photosystem II (PSII). Chlorophyll binding by the photosystem II subunit S protein, PsbS, was found to be necessary for energy-dependent quenching (qE), the major energy-dependent component of non-photochemical quenching (NPQ) in Arabidopsis thaliana. It is proposed that PsbS acts as a trigger of the conformational change that leads to the establishment of nonphotochemical quenching. However, the exact structure and function of PsbS in PSII are still unknown. Here, we clone and express the recombinant PsbS gene from Arabidopsis thaliana in E. coli and purify the resulting homogeneous protein. We used various biochemical and biophysical techniques to elucidate PsbS structure and function, including circular dichroism (CD), fluorescence, and DSC. The protein shows optimal stability at $4^{\circ}C$ and pH 7.5. The CD spectra of PsbS show that the conformational changes of the protein were strongly dependent on pH conditions. The CD curve for PsbS at pH 10.5 curve had the deepest negative peak and the peak of PsbS at pH 4.5 was the least negative. The fluorescence emission spectrum of the purified PsbS protein was also measured, and the ${\lambda}_{max}$ was found to be at 328 nm. PsbS revealed some structural changes under varying temperature and oxygen gas condition.
Kim, Kwang-Soo;Kim, Soon-Dong;Kim, Jin-Koo;Kim, Ju-Nam;Kim, Kyoung-Ju
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.11
no.4
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pp.7-12
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1982
Growth of soybean sprouts(Glycine Max L.) and amounts of some chemical components were measured when they were exposed to blue light (120lux, 3hrs/day) during their growth. Hypocotyl length of irradiated soybean sprouts exceeded slightly that of control (dark) soybean sprouts, but the tfresh weight of whole sprouts as well as each part of the sprout showed no difference between the two groups. Chlorophyll content of cotyledon under blue light increased significantly with the lapse of days (3.57 and $8.45\;{\mu}g/100g$ fresh weight on the 3rd and 7th day). Bluelight irradiated sprouts contained more vitamin C than control sprouts (21.7% and 30.8% higher for the cotyledon and hypocotyl). Total amount of protein was not affected. Hypocotyl protein content was 8% of that in original soybean. Blue light did not affect the activity of trypsin inhibitor of sprouts. Similar activity of the inhibitor was observed in the cotyledon whereas hypocotyl showed activity corresponding to 23.7% of original bean. Polyacrylamide gel electrophoretogram for the protein showed 10, 9, and 11 bands in the original bean. 5th day cotyledon and hypocotyl respectively. Especially, band 3 of low Rm value was major protein component for the hypocotyl. Band 5 and 11 could be seen only in the protein of hypocotyl from bluelight irradiated sprouts, whereas no effect of blue light on the electrophoretogram was observed for the cotyledon.
Park, Youn-Hee;Chun, En-Mi;Bae, Myung-Ae;Seu, Young-Bae;Song, Kyung-Sik;Kim, Young-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.10
no.1
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pp.27-34
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2000
The chloroform and methanol (2;1, v/v) extract from an edible plant, Actinidia arguta Planchon, appeared to possess antitumor activity against human leukemias Jurkat T and U937 cells through inducing apoptosis. The substance in the solvent extract was purified by silica gel column chromatography, preparative TLC, and Sephadex LH-20 column chromatography. Characteristics of the substance analyzed by UV scanning analysis, $^1H$ and $^{13}C$ NMR spectra suggested that the substance belongs to the chlorophyll derivatives-like group. The $IC_{50}$ value of the chlorophyll derivative (Cp-D) determined by MTT assay was $15\mu\textrm{g}/ml$ for Jurkat, $10\mu\textrm{g}/ml$ for U937, and $11.4\mu\textrm{g}/ml$ for HL-60m and was more toxic to these leukemias than to solid tumors or normal fibroblast. In order to elucidate cellular mechanisms underlying the cytotoxicity, the effect of the Cp-D on Jurkat T cells was investigated. When cells were treated with the Cp-D at a concentration of $15\mu\textrm{g}/ml$, [3H]thymidine incorporation declined rapidly and wa undetectable in 1h. However, no significant changes were made in the cell cycle distribution of the cells by 24h. The sub-Gl peak representing apoptotic cells began to be detectable in 36h, at which time apoptotic DNA fragmentation was also detected on agarose gel electrophoresis, demonstrating that the cytotoxic effect of the Cp-D is attributable to the induced apoptosis. Under the same conditions, although the protein level of cyclin-dependent kinases such as cdc4, csk6, cdk2, and cdc2 was not significantly changed until 24h, the kinase activity of all c안 rapidly declined and reached a minimum level within 1-6h and then recovered to the initial level by 12h and sustained until 24h. These results suggest that inactivation of cdks at an inappropriate time during the cell cycle progression in jurkat T cells following a treatment with the Cp-D leads to induction of apoptotic cell death.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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