Nickel is a nutritionally essential trace element that plays an important role in the immune system of several animal species. The aim of this study was to examine the effect of nickel chloride on chemotactic activity of peripheral blood polymorphonuclear cells (PMNs) and whether this effect is associated with interleukin (IL)-8 and a nuclear factor-kappa B (NF-κB)-dependent pathway. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and PMNs were isolated by Percoll solution (Specific gravity; 1.080) and 1.5% dextran treatment, respectively. A modified Boyden chamber assay was used to measure the chemotactic activity of PMNs. The level of IL-8 in culture supernatant from PBMCs was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Both of PBMCs and PMNs exhibited a low viability when cultured with concentration of greater than 1,000 μM of nickel chloride for 24 h. Thus, nickel chloride was used at concentration of 500 μM, which preserved cell viability. Treatment with nickel did not directly affect the chemotactic activity of PMNs. However, the chemotactic activity of PMNs was remarkably increased by culture supernatant from PBMCs treated with nickel chloride (500 μM) for 24 h. Recombinant porcine IL-8 polyclonal antibody (pAb) neutralized the enhancing effect on the chemotactic activity of PMNs by culture supernatant from PBMCs treated with nickel and this culture supernatant had higher IL-8 levels than the culture supernatant from untreated PBMCs. In addition, n-tosyll-phenylalanine chloromethyl ketone (TPCK), a NF-κB inhibitor, antagonized the enhancing effect on the chemotactic activity of PMNs by the culture supernatant from PBMCs treated with nickel. These results suggested that nickel stimulates porcine PBMCs to produce IL-8, which increases the chemotaxis of PMNs via NF-κB-dependent pathway.
Germination and early elongation of rice after germination were investigated in anoxic air treatment, nitric oxide gas treatment, and six concentrations of mercuric chloride solutions to determine the effects of limited oxygen environment, nitric oxide, and inhibited water flux through cell membrane in $17^{\circ}C$. Anoxic air treatment affected germination of tested six varieties very little. However root elongation rates were severely inhibited while shoot growth was affected less. Reductions in shoot and root elongations demonstrated genotypic variations. Nitric oxide delayed the germination of rice even though it didn't affect the final percent germination. Elongations of root and shoot were inhibited in nitric oxide treatment. The inhibitor effect of nitric oxide on the shoot elongation of rice was less severe, while nitric oxide completely inhibited the root emergence of rice. Concentrations of $HgCl_2$ greater than $300{\mu}M$ dramatically reduced the rate and percentage of germination when compared to distilled water treatment. The reduced percent germination showed the greatest variation among rice varieties in $500{\mu}M$ solution of mercuric chloride. Ansanbyeo, Jinheung, and Odaebyeo were affected less by $HgCl_2$, Nonganbyeo and Sangmibyeo were intermediate, and the germination of Andabyeo was greatly reduced by $HgCl_2$. Root elongation of germinated rice seedlings was more sensitive to oxygen deficits, nitric oxide, and $HgCl_2$ treatments than germination and shoot elongation. In conclusion, poor seedling establishment of rice sown in flooded paddy soils, in which the oxygen supply to the seeds is restricted, appears to the result of limited root elongation rate.
Co(II), Ni(II), Cu(II) 및 Mn(II)의 네자리 Schiff base 전이금속 화합물들이 첨가된 1.5 M $LiAlCl_4/SOCl_2$ 전해질 용액에서 $SOCl_2$에 관한 전기 화학적 환원 반응을 조사하였다. 이들 전이 금속(II) 착물들은 먼저 전극 표면에 흡착된 후 촉매로써 작용하였으며, 각각의 전이 금속(II) 착물들의 촉매 화합물에 대해 $SOCl_2$를 환원시킬 수 있는 최적 조건의 농도를 나타냈다. 촉매가 첨가된 전해질 용액에서 $SOCl_2$의 환원 반응에 대한 환원 전류는 최고 150% 정도 증가하였다. 주사 속도가 증가함에 따라 $SOCl_2$의 환원 전류는 증가하였고 환원 전위는 음 전위 방향으로 이동되었으며, $SOCl_2$의 환원 과정은 확산 지배적인 반응으로 진행되었다.
부산 수영만의 조간대 저질에서 moderate halophile인 Listeria denitrificans HB-38을 분리하여 생육에 필요한 NaCl 요구도를 조사한바, 해양환경조건의 배지에서는 $4\%$ NaCl에서 육상환경조건의 배지에서는 $10\%$ NaCl에서 최적농도였으며, 균생육 최적 온도는 $40^{circ}C$였고, 생육최적 pH는 7.5이었다. 그리고 비호염성인 E.coli, KPM 105와 protoplast안정성을 비교해본 결과, 더 높은 stabilizer의 농도를 요구하지는 않았으며, stabilizer로서 NaCl이sorbitol이나 sucrose보다 protoplast에 더 안정성을 주는 것으로 나타났다. HB-38균주의 succinic dehydrogenase 활성에는 NaCl 농도가 증가함에 따라 그 활성 이 증가하다가 $9\%$에서 최대에 달하였다. 반면에 이 호염성효소의 $(NH_4)_2\;SO_4$와 NaCl에 의한 염석은 비호염성인 E.coli 및 bovine liver 세포의 경우보다 더 높은 농도의 염에 의하는 것은 아니였다. 그리고 ethidium bromide에 의한 curing과 agarose gel 전기영동의 결과 HB-38은 extrachromosomal DNA를 가지지 않는 것으로 나타났다.
Ha, Kotdaji;Kim, Sung-Young;Hong, Chansik;Myeong, Jongyun;Shin, Jin-Hong;Kim, Dae-Seong;Jeon, Ju-Hong;So, Insuk
Molecules and Cells
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제37권3호
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pp.202-212
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2014
ClC-1 is a member of a large family of voltage-gated chloride channels, abundantly expressed in human skeletal muscle. Mutations in ClC-1 are associated with myotonia congenita (MC) and result in loss of regulation of membrane excitability in skeletal muscle. We studied the electrophysiological characteristics of six mutants found among Korean MC patients, using patch clamp methods in HEK293 cells. Here, we found that the autosomal dominant mutants S189C and P480S displayed reduced chloride conductances compared to WT. Autosomal recessive mutant M128I did not show a typical rapid deactivation of Cl- currents. While sporadic mutant G523D displayed sustained activation of $Cl^-$ currents in the whole cell traces, the other sporadic mutants, M373L and M609K, demonstrated rapid deactivations. $V_{1/2}$ of these mutants was shifted to more depolarizing potentials. In order to identify potential effects on gating processes, slow and fast gating was analyzed for each mutant. We show that slow gating of the mutants tends to be shifted toward more positive potentials in comparison to WT. Collectively, these six mutants found among Korean patients demonstrated modifications of channel gating behaviors and reduced chloride conductances that likely contribute to the physiologic changes of MC.
Objectives : In this study, the effects of different fractions isolated from modified Boyanghwanotang(mBHT) extract on LPS-induced inflammation in BV2 microglial cells were investigated. Methods : mBHT was extracted with water, and then fractionated with n-hexane, methylene chloride, ethylacetate and n-butanol. BV2 cells, a mouse microglia line were incubated with different concentrations of each fraction of mBHT for 30 min, and then stimulated with LPS for 24 h. Cell toxicity was determined by MTT assay. The concentration of nitric oxide (NO) was measured in culture medium by Griess reagent assay. The expression of inducible nitric oxide synthease (iNOS) protein was determined by Western blot. Results : Four fractions of mBHT were significantly inhibited LPS-induced NO productions in BV2 cells in a dose-dependent manner. The methylene chloride fraction of mBHT was most strongly inhibited the NO production compared with those of the others. The methylene chloride fraction of mBHT was also suppressed LPS-induced iNOS expression comparison of other fractions at same concentration ($50\;{\mu}g/ml$) in BV2 cells. Conclusions : The results showed that the methylene chloride fraction of mBHT may have an strong anti-inflammatory property through the inhibition of NO production and iNOS expression in activated microglia, and could a therapeutic potential for the treatment of various brain inflammatory diseases.
Optimal lyophilization process was developed for manufacturing the dried product of Lactobacillus acidophilus with high cell viability. Three major factors, freezing rate, specific surface area of samples, and stabilizer type and their synergy were shown to play a crucial role in the development of an effective lyophilization process. Finally we found an optimal combination among three process parameters mentioned above; an exceptionally high cell survival percentage of 90% was achieved using the 8.28 cm-1 specific surface area of samples, slow freezing rate, and a stabilizer composition of 4% skim milk +1% glycerol +0.1% calcium chloride.
Commercial liquid seeds are used for supplying active microbial flora to organic wastewater treatment plants of high feed-to-microorganism ratio and to maintain optimal microbial condition during unsteady state operation of the biological wastewater treatment plant. In addition to bacterial cells, the liquid weeds contain various additives for special purposes as well as organic substrates for energy supply. The additives give physical stability for the maintenance of microbial decomposition activity and ability to control the overgrowth of seed strains. In this work, the effects of addition of two kinds of typical substrate additives, poly aluminum chloride(PAC) and poly aluminum sulfate(PAS) on the consitutional total cell counts(CFU/ml) of four kinds of reorganization liquid seeds(RLS I, RLS II, RLS III and RLS IV) were studied experimentally. The addition of PAC and PAS gave negative effect on TCC constitution for the four seeds studied.
Nam In-Young;Cho Jae-Chang;Myung Hee-Joon;Joh Ki-Seong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권8호
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pp.1292-1300
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2006
Aeromonas encheleia, a potential human intestinal pathogen, was shown to infect a human intestinal epithelial cell line (Caco-2) in a noninvasive manner. The transcriptional profile of the Caco-2 cells after infection with the bacteria revealed an upregulated expression of genes involved in chloride secretion, including that of phospholipase A2 (PLA2) and platelet-activating factor (PAF) acetylhydrolase (PAFAH2). This was also confirmed by a real-time RT-PCR analysis. As expected from PLA2 induction, PAF was produced when the Caco-2 cells were infected with the bacteria, and PAF was also produced when the cells were treated with a bacterial culture supernatant including bacterial extracellular proteins, yet lacking lipopolysaccharides. Bacterial aerolysin was shown to induce the production of PAF.
In this study, Bacillus licheniformis cells were immobilized by entrapment in calcium alginate beads and were used for production of alkaline protease by repeated batch process. In order to increase the stability of the beads, the immobilization procedure was optimized by statistical full factorial method, by which three factors including alginate type, calcium chloride concentration, and agitation speed were studied. Optimization of the enzyme production medium, by the Taguchi method, was also studied. The obtained results showed that optimization of the cell immobilization procedure and medium constituents significantly enhanced the production of alkaline protease. In comparison with the free-cell culture in pre-optimized medium, about 7.3-fold higher productivity was resulted after optimization of the overall procedure. Repeated batch mode of operation, using optimized conditions, resulted in continuous production of the alkaline protease for 13 batches in 19 days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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