• KSBB Journal
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• 제13권1호
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• pp.44-51
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• 1998

Hydrolysis and adsorption reversibility experiments were run for initial enzyme activity of 4.48, 9.65, 11.19 and 17.14U/mL at a temperature 30$^\circ C$. The chitin particle size corresponded to a mean particle diameter of 0.127mm, and the initial concentration of chitin was 10mg/mL. After approximately 2hrs, the enzyme activity remained constant in a speudo-steady state. The amounts in the bulk [E] and the amounts of enzyme adsorbed on the chitin surface [E] are plotted on Lineweaver-Burk plot to yield a linear relationship with a correlation coefficient of 0.99, a slope of 2.79cm$^-1$ and an intercept of 0.08$\textrm{cm}^2$/U. From this parameters, the values of [E$_T$] and $K_E$ were calculated to be 12.5U/cm$^2$ and 34.88U/mL. respectively, Adsorption isotherm of the enzyme on the particles showed a well developed plateau of 1.35$\times$10$^-3$, 4.72$\times$10$^-3$, 4.42$\times$10$^-3$, 8.58$\times$10$^-3$U/cm$^2$ at 30$^\circ C$. To determine the specificity of chitinase for crystalline chitin, the free energy of adsorption was measured, and its was determined as about -14.62~-18.8kJ/mol.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.647-652
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• 2004

Thermophilic microorganisms capable of producing chitinase enzymes were screened from samples collected from several crater and geothermal areas. The chitinolytic microorganisms were grown in a selective medium containing colloidal chitin. The Bacillus K29-14 isolate was found to exhibit the highest chitinase and chitin deacetylase activities. When grown in a chitin-containing medium, the isolate produced extracellular chitinase after 24 h of incubation. The optimum temperature and pH for the chitinase were $55^\circ{C}$ and pH 7, respectively, while those for the chitin deacetylase were $55^\circ{C}$ and pH 8, respectively. The thermostable chitinase and chitin deacetylase also retained 80- 90% of their activity after incubation for 5 h at $70^\circ{C}$. The divalent cations $CoCl_2\;and\;NiCl_2$, increased the chitinase activity, while $ZnCl_2$, inhibited the enzyme. The chitin deacetylase was also activated by the presence of $MgCl_2$ and inhibited by $MnCl_2,\;NiCl_2,\;and\;CaCl_2$. A zymogram analysis revealed several forms of chitinase, with a 67 kDa form being the major enzyme.

• 한국식품과학회지
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• 제27권1호
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• pp.6-10
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• 1995

대롱새우껍질로부터 Neutrase처리로 단백질을 제거하고 0.1 M EDTA 2Na로 무기질을 제거하여 키틴을 분리 정제하였다. 키틴의 정제시 Neutrase 3 mg/ml을 첨가하여 pH 6.0, $50^{\circ}C$에서 처리하였을 때 단백질 제거 효과가 제일 좋았다. Neutrase처리에 의한 단백질 제거, 탈 아세틸화도 그리고 칼슘, 인함량은 시판 키틴과 거의 비슷하였다. 분자량은 $1.2{\times}10^{8}$ dalton이었고 키틴의 수율은 28.5%이었다.

• KSBB Journal
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• 제8권3호
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• pp.230-236
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• 1993

Chitin과 cellulose를 dimethylacetamide/LiCl 용매에 용해시켜 유리판 위에서 Chitulose film을 제조 하였다. 이 film은 토양속에서 20일 후에 거의 분해 되었고, 토양 미생물을 16-26hr 후에 투과시켰다. 한편, 필름의 투과도를 검토해 본 결과 물의 투과도는 Chitulose film에서 chitin, cellulose의 혼합 비율에 따라 0~187,500ml/$m^2$/day로 cellulose 함량이 높을 수록 투과도가 낮게 나타났으며, 풍건보다는 중탕에 의한 필름건조방법으로 제조된 것이 우수하였다. 각종 유기물의 최대, 최소투과도는 Chitulose film 의 종류에 따라 달리 나타나 chitin과 cellulose의 조성에 따라 선택적 투과성을 나타내였다. $Na^+$ 이온에 대한 투과도도 달리 나타나 보였고, 산소 투과도도 역시 Chitulose film의 조성에 따라 14-17,850 c $cm^3/m_2$/day로 큰 차이를 보였다. 2~3도 화상을 입힌 쥐에다 Chitulose film을 인조피부로 사용한 결과 염증없이 14일 후에 딱지가 떨어졌고, 31일 후에 완치되는 것이 관찰되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권6호
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• pp.643-645
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• 1994

Chitin and chitosan has been almost neglected until 1960s, although they are the second largest biomass on earth. Their major use were as a natural flocculant for waste-water treatment, and partially used in the areas of food, feed industry, cosmetics and medicine. Possible sources of chitin among biomass were tested, and antibacterial activity and viscosity-concentration relation- ship of diluted acidic solution were examined.

• 한국식품과학회지
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• 제26권4호
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• pp.348-354
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• 1994

반응 조건을 달리하여 게껍질에서 chitin을 추출하고 이를 탈아세틸화하여 chitosan을 제조하였으며, 이들의 물리, 화학적 특성과 소화관내 기능성을 in vitro법으로 실시하였다. 이들 chitin질의 bulk density는 $127{\sim}208\;mg/ml$, 점도는 0.1% chitin의 경우 $80{\sim}581\;cP$, 0.5%, chitosan은 $80{\sim}3,670\;cP$로 다양한 수치를 나타냈으며, chitosan의 탈아세틸화도는 $81{\sim}93%$로 비교적 높았다. Chitosan 제조시의 알칼리 농도와 반응 온도가 일정할 때 반응 시간이 경과할수록 탈아세틸화도는 증가하였고, 점도는 감소하는 경향을 보였다. Chitin질의 보수력은 온도 상승에 따라 약간 상승하였고, $37^{\circ}C$에서 chitosan D가 가장 높았으며, bulk density가 낮을수록 높은 보수력을 나타냈다. Glucose 흡수 억제 효과는 bulk density가 낮고 보수력이 큰 chitin길이 더 컸고 chitosan D가 가장 높은 38%를 나타냈다. Chitin질의 bile acid 흡수 억제 효과는 투석 1시간 후에 $15{\sim}34%$를 나타냈고, pectin은 39%, cellulose는 9%를 나타냈으며 chitosan D는 3% 농도에서 34%의 가장 높은 억제 효과를 나타냈다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제18권4호
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• pp.759-766
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• 2008

Among more than a hundred colonies of fungi isolated from soil samples, DY-52 has been screened as an extracellular chitin deacetylase (CDA) producer. The isolate was further identified as Mortierella sp., based on the morphological properties and the nucleotide sequence of its 18S rRNA gene. The fungus exhibited maximal growth in yeast peptone glucose (YPD) liquid medium containing 2% of glucose at pH 5.0 and $28^{\circ}C$ with 150 rpm. The CDA activity of DY-52 was maximal (20 U/mg) on the 3rd day of culture in the same medium. The CDA was inducible by addition of glucose and chitin. The enzyme contained two isoforms of molecular mass 50 kDa and 59 kDa. This enzyme showed a maximal activity at pH 5.5 and $60^{\circ}C$. In addition, it had a pH stability range of 4.5-8.0 and a temperature stability range of $4-40^{\circ}C$. The enzyme was enhanced in the presence of $Co^{2+}$ and $Ca^{2+}$. Among various substrates tested, WSCT-50 (water-soluble chitin, degree of deacetylation 50%), glycol chitin, and crab chitosan (DD 71-88%) were deacetylated. Moreover, the CDA can handle N-acetylglucosamine oligomers $(GlcNAc)_{2-7}$.

• 한국식품영양학회지
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• 제22권1호
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• pp.8-13
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• 2009

Effects of microwave and ultrasonication on chitin extraction time were investigated in this study. Chitin was extracted from ground crab shell by demineralization in 1.0 N HCl solution at 25$^{\circ}C$ with or without ultrasonication and deproteinization in 1.0 NaOH solution at 100$^{\circ}C$ without ultrasonication and at 70$^{\circ}C$ with ultrasonication. Microwave treatment was also used for deproteinization with 5 min heating and 5 min standing without microwave. The changes in color difference, the contents of ash, calcium and nitrogen were measured during demineralization and deproteinization. Ultrasonication of 4 hr in 1.0 N HCl solution for removal of calcium and 1.5 hr of microwave heating in 1.0 N NaOH for deproteinization corresponded to 6 hr in 0.1 N HCl and 2 hr in 1.0 N NaOH of heating at 100$^{\circ}C$ without those treatments, respectively. The data obtained showed that these treatments were effective reduction of chitin extraction time by 25${\sim}$33% for chitin preparation. The chitin obtained from these ultrasonication and microwave treatments resulted 0.55% of ash, 0.25% of calcium, 2.47% of nitrogen and 20.64% of yield ratio. Those treatments selected were also reduced the darkness development time of the chitin solution during demineralization and deproteinization.

• 한국식품과학회지
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• 제28권5호
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• pp.870-876
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• 1996

가시발새우 껍질을 부가가치가 높은 자원으로 활용하기 위하여, 이들로부터 키틴과 키토산을 제조하여 물리화학적 특성을 살펴 보았다. 가시발새우 껍질에서 추출한 키틴의 일반성분은 질소 6.84%, 지방 0.57%, 회분 0.32%였으며, 수율은 15.7%였다. 키토산은 질소함량이 7.52%였으며 지방과 회분함량은 각각 0.13%와 0.33%였다. 그리고 탈아세틸화도는 67.5%, 분자량은 $9.1{\times}10^5$이었으며 수율은 75%를 나타내었다. 키틴 및 키토산의 잔류 아미노산은 각각 2.64mg/g과 1.39mg/g 검출되었고, 그 중 lysine이 가장 높게 나타났다. 한편 키틴과 키토산의 IR 스펙트럼과 고체상태 $^{13}C-NMR$ 스펙트럼 data는 분자구조를 확인하는데 도움이 되었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제35권4호
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• pp.265-271
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• 1992

키틴과 키토산으로부터 carboxymethylchitin, acetylchitin, ethylchitosan, N-acetylchitosan 및 chitosansulfate를 합성하여 그 물리화학적 기능특성을 키틴 및 키토산과 비교 검토 하였다. Carboxymethylchitin은 물과 아세트산에 용해되었지만 ethylchitin은 아세트산에만 용해되었다. 보수력은 N-acetylchitosan이 1194%로 키틴에 비해 약 2배 정도 높았으며, 지방흡수력은 carboxymethylchitin이 1800%로 키틴 511%에 비해 월등히 높았다. Carboxymethylchitin의 유화성이 75.91%로 가장 높았으며 그 다음이 미세결정형 키틴으로 57.02%였으나 키틴 및 키토산은 유화성이 나타나지 않았다. 색소흡착능은 acetylchitin이 0.93 mg dye/g sample(Blue R-250), 0.96 mg dye/g sample(Red-2)로 키틴 및 키토산 보다 높았다. 따라서 carboxymethylchitin은 유화제로서, acetylchitosan은 색소흡착제로서 이용이 가능할 것으로 판단된다.