The effect of pH and the substrate concentration on the sensing ability of the chicken peroxidase enzyme electrode was examined quanititatively. Using the new Michaelis-Menten equation, to which pH concept was introduced, enabled to calculate all kinds of dissociation constant related to chicken peroxidase and subsequently to determine the optimum pH of the sensor.
This study was done to identify Newcastle disease virus(NDV) antigens in paraffin sections of various organs from experimentally NDV-infected chicken using peroxidase-antiperoxidase(PAP) technique. Sections were Incubated with rabbit anti-NDV polyclonal as first antibody, followed by incubation with goat anti-rabbit IgG conjugate and peroxidase anti-peroxidase ( PAP ). Positive reactions were often detected in the epithelim of trachea and in the lymphocyte of spleen at 24 hours after virus inoculation. The viral antigen was localized mainly in the cytoplasm of infected cells. The method approved to be highly specific for the indetification of NDV and allowed a precise localization of the viral antigens in infected cells.
Muhlisin, Muhlisin;Utama, Dicky Tri;Lee, Jae Ho;Choi, Ji Hye;Lee, Sung Ki
한국축산식품학회지
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제36권3호
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pp.405-411
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2016
The effects of gaseous ozone exposure on the bacterial counts and oxidative properties were evaluated in duck and chicken breast fillets, which were stored under a continuous flux of gaseous ozone (10×10−6 kg O3/m3/h) at 4±1℃ for 4 d. The ozone generator was set to on for 15 min and off for 105 min, and this cyclic timer was set during storage. Ozone effectively reduced the growth of coliform, aerobic and anaerobic bacteria in both chicken and duck breast. However, lipid oxidation occurred faster in duck breast than chicken breast with higher degree of discoloration, TBARS value, and antioxidant enzyme (glutathione peroxidase and catalase) activity decline rates. It is concluded that ozone effectively controlled the growth of bacteria in both chicken and duck breast with less effects on oxidative deterioration in chicken breast.
Polyclonal antibodies labeled with a tracer have been commonly used as secondary antibodies in immunochemical assays to quantify the concentration of antibody-antigen complexes. The majority of these antibodies conjugated with a tracer are commercially available, with the exception of few untouched targets. This study focused on the production and application of mouse anti-quail IgY as an intermediate antibody to link between quail egg yolk IgY and goat anti-mouse IgG-HRP as primary and secondary antibodies, respectively. Subsequently, the produced mouse anti-quail IgY was labeled with horseradish peroxidase (HRP) and its efficiency on enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was compared with that of commercial rabbit anti-chicken IgY-HRP. As an intermediate antibody, mouse anti-quail IgY was successfully produced with good affinity and sensitivity (1:10,000) to the primary and secondary antibodies. Subsequently, mouse anti-quail IgY was effectively conjugated with HRP enzyme, resulting in a secondary antibody with good sensitivity (1:10,000) to quail anti-V. parahaemolyticus and V. vulnificus IgY. The detection limit was $10^5$ CFU/ml for both V. parahaemolyticus and V. vulnificus. The efficiency of the produced conjugate to detect quail IgY on ELISA was comparable to that of the commercial rabbit anti-chicken IgY-HRP, and hence the produced and labeled mouse anti-quail IgY-HRP can be used as a secondary antibody to detect any antibody produced in quail.
Utama, Dicky Tri;Lee, Seung Gyu;Baek, Ki Ho;Kim, Hye-Kyung;Cho, Chang-Yeon;Lee, Cheol-Koo;Lee, Sung Ki
한국축산식품학회지
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제36권1호
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pp.44-50
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2016
This study was conducted to observe the association between antioxidant enzyme activity, free iron content and lipid oxidation of Korean native chicken (KNC) meat during refrigerated storage. Four lines of KNC (Yeonsan ogye, Hyunin black, Hoengseong yakdak and Hwangbong) were raised under similar conditions. A total of 16 roosters were randomly sampled and slaughtered at the age of 12 mon. The breast and thigh meats were stored aerobically for 10 d at 4℃. Although thigh meat had higher antioxidant enzyme activity, it was more susceptible to lipid oxidation and released more iron during storage than breast meat. Aerobic refrigerated storage for 10 d significantly decreased the activity of antioxidant enzymes and increased the amount of free iron and malondialdehyde. The activities of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) were negatively correlated with lipid oxidation, whereas that of catalase was not. The amount of free iron was positively associated with lipid oxidation. We concluded that chicken line did not affect strongly on antioxidant enzyme activity and lipid oxidation in breast meat of KNC. However, the thigh meat of Hwangbong and Hyunin black had higher SOD and GSH-Px activity, respectively, and lower malondialdehyde contents than that of other chickens. SOD, GSH-Px and free iron play significant roles in meat lipid oxidation during refrigerated storage.
황기열수추출물(WEH)과 홍국 70% 에탄올추출물(EEB) 및 Monascus pilosus 액침배양액(LBK)을 동결건조한 등량 혼합물을 일반 닭고기 베이스소스에 0.225% 첨가한 황기홍국소스(HBS)를 처리한 계육의 식이가 고지방-고콜레스테롤 병행식이 흰쥐의 ROS 생성 및 소거계 효소류의 활성에 미치는 영향을 조사하였다. 실험군은 정상군(NC), 고지방-고콜레스테롤 대조군(HFC), 고지방-고콜레스테롤 식이에 베이스소스를 처리한 계육을 15% 첨가한 식이군(HFC-BS) 및 고지방-고콜레스테롤 식이에 황기홍국소스를 처리한 계육을 15% 첨가한 식이군(HFC-HBS)으로 구분하여(5마리/군) 5주간 사육하였다. 체내 활성산소를 생성하는 xanthin oxidoreductase O type 활성은 HFC군에 비하여는 31.84%가 HFCBS군에 비하여는 24.57%가 각각 감소되었다. Superoxide dismutase 및 glutathione S-transferase 활성은 HFC-HBS군이 HFC군 및 HFC-BS군에 비하여 각각 25.17-64.50% 및 19.29-62.89%가 증가 하였다. 활성산소에 소거에 관여하는 glutathione의 함량은 HFCHBS군이 HFC군 및 HFC-BS군에 비하여 각각 53.30% 및 25.11%가 증가하였으며, 간조직의 지질과산화물의 함량은 각각 20.29% 및 24.19%가 감소되었다. Glutathione peroxidase 및 catalase 활성은 각각 41.29-41.87% 및 22.91-23.44%가 증가하였다. 이상의 결과 황기홍국소스를 처리한 계육은 고지방-고콜레스테롤 병행식이 하에서도 활성산소 생성계 효소 활성을 감소함과 동시에 소거계 활성을 높힘으로서 간조직 손상을 예방 및 치유하는 것으로 사료된다.
Muhlisin, Muhlisin;Utama, Dicky Tri;Lee, Jae Ho;Choi, Ji Hye;Lee, Sung Ki
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권5호
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pp.695-701
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2016
This study was conducted to observe antioxidant enzyme activity, iron content and lipid oxidation of Korean native chickens and other poultry. The breast and thigh meat of three Korean native chicken breeds including Woorimatdak, Hyunin black and Yeonsan ogye, and three commercial poultry breeds including the broiler, White Leghorn and Pekin duck (Anasplatyrhyncos domesticus) were studied. The analyses of the antioxidant enzymes activity, iron content and lipid oxidation were performed in raw and cooked samples. The activity of catalase (CAT) in the thigh meat was higher than that of the breast meat of three Korean native chickens and the broiler, respectively. The activity of glutathione peroxidase (GPx) in the uncooked thigh meat of three Korean native chickens was higher than that of the breasts. The breast meat of Woorimatdak and Pekin duck had higher superoxide dismutase (SOD) activity than the others, while only the thigh meat of Pekin duck had the highest activity. Cooking inactivated CAT and decreased the activity of GPx and SOD. The thigh meat of Woorimatdak, White Leghorn, Yeonsan ogye and Hyunin black contained more total iron than the breast meat of those breeds. The heme-iron lost during cooking ranged from 3.2% to 14.8%. It is noted that the thigh meat had higher thiobarbituric acid reactive substances values than the breast in all chicken breeds. Though Woorimatdak showed higher antioxidant enzyme activity and lower released-iron percentage among Korean native chickens, no differences were found on lipid oxidation. We confirm that the dark meat of poultry exhibited higher antioxidant enzyme activity and contained more iron than the white meat.
Objective: An experiment was conducted to determine the effects of supplementing graded concentrations of inorganic sulphur (S) without and with folic acid (FA) in maize-soybean meal diets on performance, slaughter and anti-oxidant variables, immune responses and serum protein fractions in broiler chicken. Methods: Inorganic S was supplemented at 0.05%, 0.10%, 0.15%, and 0.20% alone or in combination with FA (4 mg/kg) in basal diet (BD) containing no supplemental methionine (Met) and FA. A control group was fed with the recommended concentration of Met. Each diet was offered to 10 pens of 5 male broiler chicks (Cobb 400) and fed ad libitum from day 1 to 42. Results: The broilers fed the BD had lower body weight gain (BWG), feed efficiency (FE), higher lipid peroxidation (LP), lower activity of glutathione peroxidase (GSHPx), lower lymphocyte proliferation ratio (LPR), and reduced concentrations of total protein, albumin, and globulin in serum. Supplementation of FA and S to the BD improved the BWG (all concentrations of S) and FE (0.20% S) similar to the control group. Similarly, the combination of S and FA significantly improved the concentrations of total protein, albumin, and globulin in serum, reduced the LP and increased the activity of GSHPx and LPR. However, responses in the above parameters were related to the concentration of S in the diet. The slaughter variables and antibody titres against the Newcastle disease were not affected with the treatments. Conclusion: Based on the results, it is concluded that the combination of S (0.2%) and FA (4 mg/kg) improved the BWG and FE, similarly supplementation of these nutrients improved the concentration of protein fractions and reduced the stress (reduced LP and improved GSHPx) variables in serum and improved the cell mediated immune response (LPR) in broilers fed sub-optimal concentrations of Met in diet.
Enhancement of antigen-specific IgE is a hallmark of allergic hyperresponsiveness, therefore it is necessary to adopt or develop a highly sensitive and specific assay for determination of allergen-specific IgE levels in vivo. In this presentation, we introduce an ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) system developed to measure the levels of chicken egg ovalbumin (OVA)-specific IgE in serum. The ELISA method uses a commercially available purified rat anti-mouse IgE as a capture Ab and biotinylated OVA as a detection reagent. Avidin-peroxidase with its substrate is used for color development resulting in optical density measurement at 405 nm. The ELISA system produces a highly sensitive dose-response relation-ship between optical density levels and the dilution titer of the OVA-IgE standard serum but no cross-reaction with unrelated IgE or IgG. It is believed that the system is an Efficient tool to delineate an adjuvant effect of environmental pollutants on development of asthmatic and atopic responses.
The present experiment was done to identify newcastle disease virus(NDV) antigens in frozen sections of various oragns from experimentally NDV-infected with indirect immunoperoxidase method. Section were incubated with rabbit anti-NDV polyclonal as first antibody, followed by incubation with goat anti-rabbit or protein A peroxidase conjugate. Positive reactions were often detected in the epithelium of trachea and in the lymphocyte of spleen at 24 hours after virus inoculation. the viral antigen was localized mainly in the cytoplasm of infected cells. The method approved to be highly specific for the identification of NDV and allowed a precise localization of the viral antigens in infected cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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