모체 출산 연령이 늦어짐에 따라 태아의 염색체 이상 빈도는 증가하는 것으로 알려져 있는데, 이는 난자의 노화에 따른 염색체의 비분리 현상의 증가 등이 주된 원인이다. 염색체 양 말단에 존재하는 텔로미어는 염색체의 안정성에 관여하고 세포분열이 진행됨으로써 이의 길이가 짧아져 노화의 지표로 활용되고 있다. 따라서 본 연구는 모체의 노화가 생산 배아에 미치는 영향을 알아보기 위하여 닭의 산란 연령별 배아의 염색체 이상 빈도와 이들의 텔로미어 함량을 분석하였다. 시험 분석은 20주령에서부터 70주령까지의 화이트 레그혼 종을 공시하고 10주 간격으로 생산된 수정란의 초기 배아에 대한 핵형 분석과 양적형광보인법(Q-FISH)을 이용한 모계 및 생산 배아의 텔로미어 함량을 분석하였다. 분석 결과, 초기 배아의 염색체 이상 빈도는 산란 연령에 따른 유의적인 차이가 있었는데, 산란 초기에 상대적으로 높은 염색체 이상 빈도를 보이다가 산란 중기에서 안정된 빈도를 유지하고, 후기부터 다시 이상 빈도가 증가하는 양상을 보여 모체의 노화가 태아의 염색체 이상 빈도에 영향을 미치는 것으로 나타났다. 개체의 텔로미어 함량은 연령이 증가함에 따라 점진적 감소 양상을 나타내는 반면, 모계 연령에 따른 생산 배아들의 텔로미어 함량은 연령 간에 차이가 없는 것으로 나타나 모체의 노화가 수정 배아의 텔로미어 함량에는 영향을 미치지 않는 것으로 보여진다. 이는 배란 후 수정이 된 배아는 초기 발생 과정 중 세포들의 reprograming이 일어나 텔로미어가 복구됨을 의미한다.
계태아를 이용하여 현재 국내에서 사용하고 있는 농약중 Azinphos-methyl 과 Carbaryl를 대상으로 기형 유무가 있는지 확인하기 위하여 실험하였다. Azinphos-methyl 고 Carbaryl을 Corn oil를 용매로 사용하여 혈관분포가 왕성히 일어날 때 기실로 투여하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Azinphos-methyl 투여군은 고농도 투여군에서 체중, 체장, 전지·후지의 길이, 발톱길이가 용매 대조군과 무처치 대조군에 비해 유의성있는 감소를 보였으며, 저농도와 중농도 투여군에서도 무처치 대조군과 유의성 있는 감소를 보였다. 이는 Azinphos-methyl이 계태아의 성장에 영향이 있음을 알 수 있었다. 2. Azinphos-methyl은 용량별 폐사율이 각 18%, 29%, 41%로 나타난 계태아의 폐사율을 증가시키는 것으로 나타났으나 기형은 없었다. 3. Carbaryl 투여군에서는 체중, 체장 및 전 ·후지의 길이에 있어서 고농도로 투여한 군에서는 무처치 대조군 및 용매 대조군에 비해 유의성있는 감소를 보였으며, 체장 및 발톱길이는 저농도 및 고농도 투여군 모두 무처치 대조군에 비해 유의성있는 감소를 나타냈다. 4. Carbaryl 투여군은 폐사율이 용량별로 26%, 50%로 나타나 계태아의 폐사율을 증가시키는 것으로 나타났으며 경도의 피모 발육부전과 부리이상이 나타났다.
Teratogenic effects of diazinon were assessed on morphology of chick embryos cholinergic blocking agents. Diazinon at doses ranging from 25 to $2000{\mu}g/egg$, was injected on Day 3 of incubation. $TD_{50S}$, were different for the various teratogenic sings such as wry neck, micromelia, abnormal feathering, abnormal beak and curled claws. The threshold dose for wry neck was higher than the threshold dose for other signs; $40{\mu}g/egg$ produced substantial micromelia, abnormal feathering, abnormal beak and curled claws, but gave no sings of wry neck. In contrast to the teratogenic doses, the $LD_{50}$ of diazinon was very high(above $2000{\mu}g/egg$). One of the characteristics of diazinon-induced teratogenesis was reduction of body weight(78.8%) and body length(73.8%). Maximal teratogenic effects, scored as sings of retarded growth, wry neck, micromelia, abnormal feathering, abnormal beak, and curled claws, were produced when the insectcide was administered on the third or fourth day. The threshold dose for type II teratogenic sings including wry neck and short neck was higher than for type I including micromelia and abnormal feathering. Morphorlogical studies, using atropine and gallamine, suggested that nicotinc but not muscarinic receptors may be involved in the mechanism of diazinon-induced type II malformations.
J. Y. Han;D. S. Seo;Y. H. Hong;D. K. Jeong;Y. S. Shin
한국가금학회지
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제23권1호
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pp.9-17
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1996
이 연구의 목적은 주입구의 위치에 따른 병아리 배아의 생존율을 서로 비교하고 가장 적합한 주입구 위치를 찾기 위하여 실시되었다. 멸균처리된 핀셋을 사용하여 난각의 첨단부와 둔단부 그리고 옆부분에 주입구를 각각 만들었다. 연구 결과, 둔단부에 주입구 (BE1)를 만든 수정란의 발생율이 가장 높았으나 내부난각막이 불투명하여 혈관내 미세주입이 어렵다. 따라서 본 연구에서는 첨단부에 주입구를 만든 다음 이 주입구를 통하여 약 2 $\mu$L의 DMEM 용액을 2.5일령된 배자의 혈관에 주입하였고, 주입부위의 출혈을 막기 위해 DMEM 용액을 주입한 후 공기방울을 넣은 결과 생존율이 약 17.0% 이었다. 따라서 이러한 주입구에 의한 방법은 생식세포가 조작된 germline chimera 또는 형질전환닭을 생산하는데 매우 유용한 시스템으로 이용될 수 있을 것이다.
목 적 : 계태의 발생 과정에서 감마선 조사에 의한 심장 기형유발 유무와 심장 기형의 종류를 알아보기 위하여 본 연구를 시행하였다. 방 법 : 토종 닭의 수정란을 사서 닦은 후 대조군에게는 감마선을 조사하지 않았다. 실험군으로 닭의 수정란을 인공 부화기에 넣고 3일 후(72시간 후)에 꺼내어 700 curie 1.25 Mev Cobalt 60에서 나오는 감마선을 50 rad, 100 rad, 150 rad, 200 rad, 250 rad, 300 rad로 각각 60개의 수정란에 조사 후 인공 부화기에 넣어 총 3주간 지속시켰다. 온도 $38^{\circ}C$와 습도 55-70%로 유지하여 3주간 부화시킨 계태를 개흉하여 포르말린으로 고정하였고, 실물 현미경하에 해부하였다. 결 과 : 감마선 조사하지 않은 대조군에서 생존율은 76.4%이었고, 심장 기형은 발견되지 않았다. 실험군에서는 50 rad에서 300 rad로 선량이 강할수록 생존율은 63.3%에서 33.3%로 유의하게 감소하였고(P<0.001), 심장 기형의 발생률도 생존 계태의 7.8%에서 25.0%로 유의하게 증가하였다(P<0.001). 선량이 증가 할수록 심실중격결손의 크기가 증가하고 복잡기형이 나타나는 경향을 보였다(P<0.001). 대혈관 기형도 이상기시, 저형성, 형성부전으로 심해지는 경향을 보였다. 결 론 : 계태 발생 과정 중 감마선 조사의 시기와 선량이 선천성 심장병의 발생에 중요한 영향을 미친다. 조사 시기를 3일 후로 고정한 후 선량이 증가함에 따라 생존율은 감소하였으며, 선천성 심장병의 빈도는 증가하였고, 복잡 심장 기형이 생겼다. 또한 감마선 조사에 의해서 계태에서 혈관 기형을 유발할 수 있었다. 감마선 조사는 계태에 직접적인 조작을 하지 않고 또한 혈역학적 변화를 직접 유도하지 않는 실험이므로 거대분자인 핵산의 변화에 의해서 심장 기형과 대혈관 기형이 발생하였을 것으로 생각하며 기형 형성의 기전을 밝히기 위해 앞으로 염색체와 분자유전학적 연구가 필요할 것이다.
The changes in histopathology of various organs and growth inhibition of the chick embryos incubated with radioactive sulfur ($^{35}S$) were experimentally studied. The various doses of $^{35}S$ were injected into the yolk sac at different intervals and the weight changes of the embryos were evaluated to determine the growth inhibition rates. The embryos sacrified on various incubation days were used for the study of histopathological changes in organs such as the bone, liver, kidney, gonad, and eye. Following were the results: 1) The weight changes of the $^{35}S$ treated groups were as follows: i. Embryos treated on the 5 th incubation day: No weight changes were noted on the 8th incubation day, however, the growth inhibition rate of 32.1% was noted in the group treated with $50{\mu}C$ and of 38.2% in the group treated with $150{\mu}C$ on the 12th incubation day. The rates were 9.1 and 12.1% on the 15th incubation day, and 6.5 and 10.6% on the 18th incubation day respectively. ii. Embryos treated on the 8th incubation day: The growth inhibition rates on the 12th, 15th and 18th incubation days in the groups treated with $50{\mu}C$ were 20.9, 25.9 and 18.8% and in those treated with $150{\mu}C$ were 20.0, 14.9 and 16.9% respectively. iii. Embryos treated on the 12th incubation day: The growth inhibition rates on the 15th and 18th in the groups treated with $50{\mu}C$ were 13.6 and 21.1% and in those treated with $150{\mu}C$ were 26.7 and 6.5% and in those treated with $250{\mu}C$ were 10.6 and 12.6% respectively. iv. Embryos treated on the 15th incubation day: The growth inhibition rates on the 18th in the groups treated with $50{\mu}C$ were 6.5% and in those treated with $150{\mu}C$ were 10.1% and in those treated with $250{\mu}C$ were 8.5% respectively. In summary, the longer the incubation days, the less the growth inhibition rates. II) The histopathological changes in the various organs were as follows: i. Bone: Hyperplasia and edematous changes of the bone cavity, irregular distribution of immature granular cells and increased number of the myeloblast, megakaryocyte and reticuloendothelial cells were noted. ii. Liver: The embryos treated with $150{\mu}C\;of\;^{35}S$ on the 8th incubation day showed necrosis and nucleolysis of the liver cell and abnormal enlargement of sinusoid on the 12th incubation day. The longer the incubation days, the more severe the changes such as the pyknotic artophy of the liver cells and heterochromatism. The embryos treated on the 5th incubation day with 50 and $150{\mu}C\;of\;^{35}S$ showed little changes, but sight enlargement and accumulation of serous fluid in the sinusoid on the 8th incubation day. iii. Kidney: No particular changes except atrophic changes of epithelium were noted in early stage, however, the infiltration of the granular cell and monocyte into the cortex and pyknotic changes of vascular glomeruli were noted in later stage. These changes were not closely related to the doses of $^{35}S$ given. iv. Gonad: The degenerative changes such as destruction of the immature germ cells, hyperplasia and vacuolization of the stroma were noted in testis and ovary. v. Eye: A slight distortion of the cornea and sclera was noted. The hypertrophy of inner layer and blood cell infiltration into the vascular layer of the choroid membrane were noted in embryo groups on the 12, 15 and 18th incubation days.
This study was undertaken to obtain more detailed knowledge of the oxygen consumption rate of chick embryos, of the relationship between the increasing rate of embryo weight and that of oxygen consumption, of the daily increase of oxygen consumption by that of embryo weight, and of the metabolic rate of the White Leghorn eggs. The results obtained are summarized as follows. 1. The average oxygen consumption rate of the chicken embryo at the 3rd day of incubation is 0.8ml/h, STPD. It is strongly suggested that this value can used as a physiological criterion to classify the fertilized and unfertilized eggs, on the other hand oxygen consumption rate of the fertilized eggs reaches a plateau between the 18th and 20th days. 2. There exists a parallel relationship between the increasing rate of embryo weight and that of oxygen consumption rate during the incubation period. 3. There are not exist a parallel relationship between the daily increase of embryo weight and that of oxygen consumption during the whole incubation period. 4. The metabolic rate of chicken embryo(ml/h/g) is highest in the early stage of incubation and it started to decrease sharply until the 8th day follow by slow decrease thereafter.
著者는 白色레그혼의 種卵을 孵化시켜 얻은 鷄胎中 賢과 後賢에 있어서의 alk. p., PAS-陽性物質 및 燐脂質의 消長과 局在位置의 變異를 組織化學的 方法으로 追究하여 다음과 같은 結果를 얻었다. 1. 分泌尿細管의 器官形成에 앞서 未分化 間葉組織內에 强한 alk. p. 活性이 出現하였으며 同活性은 分泌尿細管의 分化와 함께 消失하였다. 2. 中賢 및 後賢 分泌尿細管의 分化와 함께 alk. p. 및 PAS-陽性物質은 分泌尿細管의 刷子綠에 强陽性反應을 보였다. 3. 中賢 및 後賢 分泌尿細管의 細胞質과 刷子綠은 强한 燐脂質 陽性反應을 띠었다. 4. 造賢組織의 分化中 未分化 間葉組織에 alk. p. 活性이 出現하였다가 組織의 分化와 함께 消失된 事實에서 보아 alk. p. 는 組織分化에 關與하는 것으로 생각된다. 5. 中賢 및 後賢 分泌尿細管의 刷子 에 있어서 alk. p. 와 PAS-陽性物質 및 燐脂質의 變異와 分布狀態가 一致한 것으로 보아 alk. p. 는 炭水化物의 再吸收 및 燐脂質代謝에 關與하는 것으로 思料된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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