The research was purposed production of oligosaccharide from alginate hydrolysis the main composition in cell walls of sea weed. We was isolated 252 strains from sea water and mud flat, the highest alginate lyase activity was selected, and identified as Sanguibacter keddieii NC9 by 16S rDNA sequence analysis. In this study was select the sodium alginate concentration, pH, temperature for the production of alginate lyase activity. Alginate lyase activity was confirmed from plate assay with 10% cetylpyridinium chloride. The optimum culture conditions for the production of alginate lyase were sodium alginate 10 g/L, peptone 5 g/L, $40^{\circ}C$, pH 9 and 36 hours incubation time. Sanguibacter keddieii NC9, its alginate lyase would be useful for the production of bioenergy and biofunctional oligosaccharides from sea weed.
KIM, DOMAN;SU-JIN RYU;SOO-JIN HEO;DO-WON KIM;HO-SANG KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권3호
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pp.260-264
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1999
The combined activities of dextranase and amylase(DXAMase) from Lipomyces starkeyi KSM 22 produced from starch fermentation inhibited or prevented dental plaque formation. The activities were stable in commercial mouthwash products; DXAMase activity retained over 93% of original activity after 6 months at 23℃. We examined the effects of enzyme inhibitors and active ingredients in mouthwash on DXAMase activity. The DXAMase was stable with 0.29%(w/v) EDTA, 20% (v/v) ethanol, 0.05% (w/v) fluoride, and 0.05% (w/v) SDS. Among the active ingredients of mouthwash, sodium benzoate (up to 1 %, w/v) had no inhibitory effect on either dextranase or amylase activity. In the case of cetylpyridinium chloride, the addition of 0.05% (w/v) inhibited 6% of dextranase activity and 13% of amylase activity. Propylene glycol (up to 1%, w/v) showed no inhibitory effect on either enzyme activity. DXAMase (5 IU/㎖) in mouthwash could remove pre-formed films of glucan-bound S. mutans cells. The addition of 0.1 IU/㎖ DXAMase in mouthwash prevented the formation of insoluble-glucan. These in vitro properties of L. starkeyi KSM 22 DXAMase are desirable for its application as a dental plaque control agent.
To investigate the occurrence and species diversity of mycobacteria in waters, surface water samples were collected monthly from the Han River and tap water samples at the terminal sites of the distribution system. Mycobacteria in each water sample were isolated by decontamination using cetylpyridinium chloride (CPC) and cultivation on Middlebrook 7H10 agar, and then identified by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism analysis (PRA) and sequencing of the 65-kDa heat-shock protein gene (hsp65 gene). Mycobacteria were detected in 59% of the surface water samples and 26% of the tap water samples. Over half of the 158 isolates could not be identified by hsp65 PRA and gene sequencing, and several identification discrepancies were observed between the two methods. The most frequently isolated species was Mycobacterium gordonae in surface water and M. lentiflavum in tap water. M. avium complex (MAC), the most important pathogen among environmental mycobacteria, was detected in the surface water samples but not found in the tap water samples. The result demonstrated that water is an important environmental source of mycobacteria and the combined application of hsp65 PRA and sequencing was more reliable than hsp65 PRA alone to accurately identify mycobacteria present in water.
본 연구에서는 천연항균제인 Citrex와 대표적인 치과영역의 항균물질로 사용되어 오고 있는 CPC를 복합적으로 처방하고 사용감이 좋은 양치액을 개발하기 위해 정밀구강검사를 통하여 특이한 구강질환이 없는 41명을 대상으로 하여 양치액의 기포 형성능력에서 사용감에 이르기까지 6개 항목의 관능평가와 개량 구강환경관리능력지수(M-PHP)를 평가하였으며, 또한 구강질환유발 미생물 Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Candida albicans을 대상으로 항균 효능평가를 수행하고 아래와 같은 결론을 얻었다. 1. 복합 양치액의 관능평가는 비교적 우수하게 나타났으며, 특히 사용감이 좋고 수렴감이 있는 것으로 나타났다. 2. Citrex와 CPC 복합처방 양치액의 구강질환 유발 미생물에 대한 효능은 분명하였으며, 이들 미생물 3종에 대한 항균효과는 Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Candida albicans 순이었다. 3. 복합 처방된 양치액에 의한 5일간 M-PHP 변화는 첫째날 대조군과 실험군에서 약간의 차이는 인정되었으나, 이후 4일 동안 두 그룹간의 유의한 차이는 없는 것으로 나타났다.
Streptococcus mutans is frequently associated with dental caries. Bacterial fermentation of food debris generates an acidic environment on the tooth surface, ultimately resulting in tooth deterioration. Therefore, various mouthwashes have been used to reduce and prevent Streptococcus mutans. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activities of 4 commercial mouthwashes and those of 10% and 20% ethanol solutions (formula A, B, C, D, E and F) against Streptococcus mutans using biofilm and planktonic methods. The range of reduction in the viable cell count of Streptococcus mutans as estimated by the biofilm and planktonic methods was 0.05-5.51 log ($P{\leq}0.01$) and 1.23-7.51 log ($P{\leq}0.001$) compared with the negative control, respectively, indicating that the planktonic method had a stronger antibacterial effect against S. mutans. Among the tested formulations, formula A (Garglin $regular^{(R)}$ mouthwash) was the most effective against Streptococcus mutans ($P{\leq}0.001$).
Biopolymer from alkaline-tolerant Bacillus so. was purified, and its physico-chemical and structural properties were investigated. Crude biopolymer, precipitated by acetone from culture broth was fractionated into two fractions by gel chromatography on Sephadex G-200. Among two fractions, one fraction(PS I), which an acidic biopolymer precipitated by the CPC(cetylpyridinium chloride) treatment was studied further. PS I fraction had carboxyl groups and was positive at color reaction of sugar. PS I fraction also showed UV absorbance at 190-225nm. The purified acidic biopolymer was composed of 4% glucose, 8% glucosamine and 88% glutamic acid. Sugar components of the purified acidic biopolymer seemed to be linked to PGA(polyglutamic acid) which existed in the from of ${\gamma}$-peptide bond. By the results of Smith degradation of sugar components, glucose and glucosamine was bound by 1,3 glocosidic linkage. Therefore, this biopolymer was a glycopeptide, oligosaccaride ${\gamma}$-PGA. We concluded that the equivalent weight and the molecular weight of this biopolymer were estimated as about 171 and 5x105 dalton, respectively.
홑파래(Monostroma nitidum)로부터 sulfated polysaccharide를 분리정제하여 그 구조적 특성을 조사하였다. 홑파래로부터 유황 함유 다당체인 rhamnan sulfate를 열수에 의하여 추출하였고, 이를 음이온 교환 chromatography에 의하여 정제하였다. Rhamnan sulfate을 더 정제하기 위하여 음이온 교환 크로마토그라피에서의 rhamnan sulfate F-4의 획분에서 황산기와 rhamnose의 함량이 높은 것을 확인하였고, 당의 조성은 30% rhamnose, 0.9% arabinose, 2.5% xylose, 및 2.0% glucose이었고, sulfate도 32.6%로서 그 함량이 높았다. F-4를 다시 분획한 경로가 획분중 F-4-3은 당조성이 36.8% rhamnose, 0.8% arabinose, 3.6% xylose, 0.8% mannose, 1.4% gluctose 및 2.7% glucose이었고, sulfate는 30.8% 정도이었다. 홑파래로부터 분리 정제한 rhamnose의 함량은 총당에 대하여 rhamnan sulfate M이 71.5%였고, 이의 획분인 F-4-1, F-4-2 및 F-4-3은 각각 80.0%, 81.6% 및 79.8%이었다. Rhamnan sulfate의 특성은 표준품과 비슷한 균일성을 나타내었으며, 분자량은 dextran을 표준품으로하여 Sephacryl S-300 gel filteration chromatography를 행한 결과 F-4-3 획분의 분자량이 $10,000{\sim}10,300$ 정도이었다.
아저해농도(亞沮害濃度)란 세포의 성장을 저해하는 최소 저해 농도(minimum inhibitory concentrations; MIC)이하의 농도를 말하는데, 적용된 화학물질의 동력학에 따라 항균물질은 반드시 이러한 농도로 존재하는 시기를 거치게 되며, 아저해농도의 항균물질은 세포의 성장을 저해하지는 않지만 세균의 대사와 성장에 스트레스로 작용하게 되어 세포의 성질과 독력인자 발현에 영향을 줄 수 있을 것이다. 본 연구는 여러 항균물질의 최소저해농도를 결정하고 아저해농도의 항균물질이 존재 시 세포 성질과 독력 인자에 미치는 영향을 알아보고, 치아우식증의 예방에 대한 화학적 접근법의 효용성을 조사하기 위해 계획되었다. 연구대상 세균으로는 mutans그룹 streptococci 중 두 가지 대표적인 세균종인 S. mutans (S. mutans Ingbritt)와 S. sobrinus (S. sobrinus 6715-7)를 사용하였고 화학물질 8종 (Sanguinaria extract; SG. Chlorhexidine digluconate; CHX, Fluoride; F, Propolis; PP, Hydrogen peroxide HP, Triclosan; TC, Sodium dodecyl sulfate: SDS, Cetylpyridinium chloride; CC) 을 단계 희석하여 배지에 첨가하여 최소저해농도를 구하였으며 아저해농도의 항균물질을 배지에 첨가하여 5% $CO_2$ 존재 하에 $37^{\circ}C$에서 배양하여 이러한 항균물질을 첨가하지 않은 배지에서 배양한 세균과 성장속도, 산생성능, 체표소수성, 수산화인회석에의 부착능, glucan생성능, 세균응집능 등을 비교 관찰하였다. 아저해농도의 항균물질은 세포의 성장과 체표소수성, 타액으로 처리한 수산화인회석에 대한 세균의 부착과 glucan합성에 영향을 주는 것이 관찰되었다. 또한 12시간 배양 후 S. mutans와 S. sobrinus 모두에서 대조군에 비해 통계적으로 유의하게 최종 pH가 높게 나타나 산생성능이 억제되는 것이 관찰되었다 (p<0.05). 세균을 proteinase K로 전처리한 경우 처리하지 않았을 때 보다 세균응집역가가 증가하거나 응집이 관찰되지 않았다. 본 연구의 결과에 따르면, 각각의 항균물질은 아저해농도에서도 알려진 작용기전과 유사하게 세균의 성질에 영향을 주었고 이러한 농도에서도 지속적으로 세균을 억제할 수 있었다. 따라서 이러한 항균물질의 사용은 치아우식증의 효과적 예방법의 하나가 될 수 있다
시중에 유통 중인 물휴지 62 품목을 선정하여 살균보존제 성분 및 유해물질 함유 여부 등의 안전성을 조사하였다. 일반적으로 화장품 및 식품에 가장 많이 사용하는 살균 보존제인 안식향산나트륨은 46 품목에서 200~3500 ppm 검출되었고 파라벤류는 1 품목에서 파라옥시안식향산메칠이 9 ppm 검출되었다. 사용할 수 없는 살균보존제인 메칠클로로이소치아졸리논과 메칠이소치아졸리논(3:1)혼합물이 1 품목에서 검출되어 부적합 판정되었으며, 메칠클로로이소치아졸리논 5 ppm, 메칠이소치아졸리논 140 ppm 검출되었다. 염화세틸피리디늄은 5 품목에서 7~13 ppm 검출되었으며, 모두 허용기준 이내로 나타났다. 잔류유해물질인 포름알데히드 검사결과는 $0.069{\sim}1.796{\mu}g/g$로 허용기준인 $20{\mu}g/g$ 이하였다. 메탄올은 5~51 ppm 검출되었으며, 이 중 4 품목에서 허용기준인 20 ppm보다 2배 이상의 농도가 나타났다. 안전한 제품이 유통될 수 있도록 메탄올의 잔류경로에 대한 지속적인 조사 및 모니터링이 필요하다고 판단된다. 물휴지의 pH를 측정한 결과 4.0~8.2로 나타나 유통화장품의 pH 3.0~9.0 기준에 적합하였으나, 물휴지에는 pH 기준이 설정되어 있지 않으므로 안전관리를 위해서는 pH 기준을 설정하는 고시개정이 필요할 것이다.
국내산 양식김을 이용한 겔 제조를 위한 기초 자료를 얻기 위하여 채취 장소 및 시기에 따라 crude porphyran 및 porphyran을 제조한 후 알칼리 처리하여 수율, 화학적 및 겔 특성을 조사하였다. 알칼리 처리 crude porphyran과 porphyran의 수율은 각각 $4.9\~10.9\%$와 $4.0\~6.7\%$였으며 채취 시기별로는 부안 김은 2월 산이, 위도 김은 1월 산이 수율이 가장 높았다. 겔 강도는 알칼리처리 crude porphyran의 경우 부안김은 2월 산이 $790 g/cm^2$, 위도김은 $740 g/cm^2$로 가장 높았다. 알칼리 처리에 의해 총당은 증가하고 단백질과 황산기는 감소하였다. 알칼리 처리 crude porphyran과 알칼리처리 porphyran의 3,6-anhydro galactose 함량은 각각 $42.6\~46.6\%$와 $40.8\~45.0\%$로 galactose : 3,6-anhydro galactose의 mole 비가 1.0 : 0.8$\~$1.1였다. GC와 FT-IR 분석 결과 알칼리 처리에 따라 3,6-anhydro galactose peak($932cm^{-1}$)가 증가하고 6-sulfate galactose ($815 cm^{-1}$)와 총 황산기 peak ($1250 cm^{-1}$)가 감소함을 알 수 있어 황산기의 대부분이 3,6-anhydro galactose의 전구 물질인 6-sulfate-galactose로 존재함을 알 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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