It is known that septin gene encodes the filament in Saccharomyces cerevisiae and it has importants roles in bud formation and cytokinesis. Four septin genes have been cloned in S. cerevisiae and it was found in Drosophila melanogaster and mouse. In this study, we cloned the septin gene in Schizosaccahromyces pombe by use of PCR technique. The septin gene in S. pombe has an 1,143 bp open reading frame and encodes a protein of 380 amino acids with a molecular weight of 42 kd. Comparison of the predicted amano acid sequences between the septin gene in S. pombe and CDC12 gene in S. cerevisiae reveals the 51.8% of simility.
Glucose and xylose are the most abundant materials in nature which can be used to produce ethanol by yeast fermentation. Three combinations of cultivation with glucose and xylose were carried out; separated, co-culture, and sequential fermentation with Saccharomyces cerevisiae and Pichia stipitis. In the separated fermentation, S. cerevisiae fermented glucose to produce 14.5 g/l ethanol from 29.4 g/l glucose but hardly used xylose. However, P. stipitis utilized not only glucose but also xylose to produce ethanol 11.9 g/l and 11.6 g/l from 29.4 g/l glucose and 29.0 g/l xylose, respectively. In the mixture of glucose and xylose, P. stipitis fermented both sugars, producing 21.1 g/l ethanol while S. cerevisiae fermented only glucose, producing 13.4 g/l ethanol. In the co-culture and sequential fermentation, the co-culture showed more efficient ethanol productivity with 18.6 g/l ethanol than the sequential fermentation with 12.4 g/l ethanol. To investigate the effect of nutrients in the growth of microorganisms and ethanol production, yeast nitrogen base (YNB) was used in the sequential fermentation with S. cerevisiae and P. stipitis. YNB supplemented some nutrients which S. cerevisiae used up in the broth and the culture showed increased growth rate, increased consumption of xylose, and increased ethanol productivity producing 22.5 g/l ethanol from 54.6 g/l sugar with a yield of 0.41 g/g.
The goal of this study and potent whitening tyrosinase inhibitor-producing wild yeasts and further optimiz production of tyrosinase. Among non-pathogenic wild yeasts obtained from soils in Daejeon city and spice field of Geumsan in Chungcheongnam-do, Korea, we selected Saccharomyces cerevisiae(S. cerevisiae) WJSL0191 and Papiliotrema laurentii (P. laurentii) ON30 show 33.2% and 27.3% respectively. These selected strains formed and not pseudomycelium. S. cerevisiae WJSL0191 was sugar-tolerant as well as halophilic in 20% glucose-containing yeast (YPD) medium and 15% NaCl-containing YPD medium. S. cerevisiae WJSL0191 and P. laurentii ON30 showed 26.2% and 18.6% anti-wrinkle elastase inhibitory activities, respectively. aximal production of tyrosinase inhibitors obtained when S. cerevisiae WJSL0191 was cultured at 30 for 72h in YPD medium and P. laurentii ON30 was incubated at 20℃ for 24hr.
Persimmon contains high levels of vitamins and phenolic compounds, as well as soluble solids, necessary for the fermentation of persimmon wine. Co-fermentation of persimmon wine was carried out using a mixed culture of Pichia anomala JK04, a Korean indigenous yeast that improves wine quality and flavor, and Saccharomyces cerevisiae Fermivin, an industrial wine yeast, in the following ratios: 9:1 (v/v), 5:5 (v/v), 1:9 (v/v) and 0:10 (v/v). During fermentation, the alcohol contents increased more slowly in samples of mixed culture than in samples of the single culture of S. cerevisiae Fermivin. The alcohol contents of all samples reached 12~13% (v/v) after 15 days. All samples of the mixed culture showed greater variety in flavor and taste than S. cerevisiae Fermivin only. In the sensory evaluation, mixed culture samples had higher scores in terms of flavor and overall preference than the single culture samples. Therefore, P. anomala JK04 is thought to improve the wine flavor of Korean domestic persimmon wine.
The effect of Schizandrae fructus extract on the physiological properties of Saccharomyces cerevisiae was investigated. S. cerevisiae was inoculated into glucose broth, added with Schizandrae fructus extract, 0, 0.01, 0.1, 0.5 and 1%(w/v), respectively. And a 96 hours incubation was followed to investigate the changes in the growth, alcohol production, alcohol dehydrogenase and pyruvate decarboxylase activities of S. cerevisiae. The growth of S. cerevisiae was more pronounced in the broth containing 0.1 and 0.OlfS Schizandrae fructus extract than in the control. The growth was, however, inhibited in the broth containing 0.5 and 1% of the extract. The content of alcohol produced by S. cerevisiae also showed very similiar results with those of the yeast growth by addition of Schizandrae fructus extract. Alcohol dehydrogenase activities of S. cerevisiae cultured in broth treated with the extract of 0.1% and 0.01% increased by 25% and 18% than those in control group. Pyruvate decarboxylase activities in 0.1% and 0.01% treatments increased to 1.32 and 1.26 times. The activities in 0.5% and 1% treatments, however, decreased by 30% and 44%.
Zinc is an essential trace element in Human Being. Highly zinc containing yeast strain isolated from the tropical fruit, rambutan and the zinc concentration in this yeast strain was 306 ppm (30.6 mg%)per dry matter basis. This strain was found to be a rounded type, normal size, and multi-polar budding. Phylogenetic analysis using the ITS1-5.85 rDNA sequences from isolated strain is most similar to yeast Saccharomyces cerevisiae at the level of nucleotide sequence identity at 99%. This strain was produced alcohol by about 12% using fully colonized koji-rice with Aspergillus oryzae. In conclusion, the isolated strain was found to be closely related to the S. cerevisiae based on its morphological and physiological properties, and alcohol fermentation. The phylogenetic analysis of strain FF-10 using ITS 5.8S rDNA sequence data also supported the closely related to the S. cerevisiae. Accordingly, the isolated yeast was named as S. cerevisiae FF-10. Further studies on the best culture conditions for zinc production from zinc-enriched S. cerevisiae FF-10 are under investigation.
The transformation of Saccharomyces cerevisiae with YIp26, YRp7 and YEp13 was investigated. Transformation frequences of YIp5, YIp26, YRp7 and YEp13 in Escherichia coli HB101 was $5.1{\times}10^{-4}$, $1.5 {\times}10^{-3}$, $1.3{\times}10^{-3}$, $3{\times}10^{-3}$, respectively. When plasmids were used in covalently closed circular form, transformation frequency of YEp13 was $1.2{\times}10^{-4}$ in S. cerevisiae DBY747 and $3.3{\times}10^{-4}$ in S. cerevisiae MC16 and that of YRp7, YIp26 was $3{\times}10^{-6}$, below $6{\times}10^{-8}$ respectively in S. cerevisiae DBY747 by the method of Ito. Cotransformation of YIp26 and YEp13 in linear form increased the frequency of transformation with efficiences 270-fold higher than transformation of YIp26 only in S. cerevisiae DBY747. In cotransformation of YIp5+YEp13 and YIp26+YRp7 with S. cerevisiae DBY747 by Beggs' method. Expression frequency of YIp5+YEp13 and YIp26+YRp7 was $4{\times}10^{-6}$, $1.5{\times}10^{-6}$, respectively. The recombinant plasmid of cotransformant was thought that YIp26 and YEp13, YIp5 and YEp13, and YIp26 and YRp 7 were ligated in vivo in S. cerevisiae DBY747.
Kim Il-Sup;Yun Hae-Sun;Choi Hye-Jin;Sohn Ho-Yong;Yu Choon-Bal;Kim Jong-Guk;Jin Ing-Nyol
Journal of Life Science
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v.16
no.3
s.76
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pp.454-458
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2006
HSF1 is the heat shock transcription factor in Saccharomyces cerevisiae. S. cerevisiae KNU5377 can ferment at high temperature such as $40^{\b{o}}C$. We have been the subjects of intense study because Hsf1p mediates gene expression not only to heat shock, but to a variety of cellular and environmental stress challenges. Basing these facts, we firstly tried to construct the hsf1 gene-deleted mutant. PCR-method for fast production of gene disruption cassette was introduced in a thermotolerant yeast S. cerevisiae KNU5377, which allowed the addition of short flanking homology region as short as 45 bp suffice to mediate homologous recombination to kanMX module. Such a cassette is composed of linking genomic DNA of target gene to the selectable marker kanMX4 that confers geneticin (G418) resistance in yeast. That module is extensively used for PCR-based gene replacement of target gene in the laboratory strains. We describe here the generation of hsf1 gene disruption construction using PCR product of selectable marker with primers that provide homology to the hsf1 gene following separation of haploid strain in wild type yeast S. cerevisiae KNU5377. Yeast deletion overview containing replace cassette module, deletion mutant construction and strain confirmation in this study used Saccharomyces Genome Deletion Project (http:://www-sequence.standard.edu/group/yeast_deletion_project). This mutant by genetic manipulation of wild type yeast KNU5377 strain will provide a good system for analyzing the research of the molecular biology underlying their physiology and metabolic process under fermentation and improvement of their fermentative properties.
The secretory overexpression of Clostridium thermocellum endoglucanase A gene (celA) was examined in Saccharomyces cerevisiae using Kluyveromyces marxianus exoinulinase (INU1) signal sequence and GAL10 promoter. The two plasmids, pYEG-CT1 with its own signal sequence, and pYInu-CT1 with INU1 signal sequence were introduced to S. cerevisiae SEY2102 and S. cerevisiae 2805 host strains, respectively, and then each transformant was selected on the synthetic defined media lacking uracil. The expression level and secretion efficiency of endoglucanase A was increased by $18{\sim}22%$ and 11%, respectively, by INU1 signal sequence over celA signal sequence. By considering the high level of expression (361 unit/I), plasmid stability (89%), and secretion efficiency (70%), S. cerevisiae 2805 harboring plasmid pYInu-CT1 was selected as the opti-mal host vector system for the production of cellulose-degrading enzyme and recombinant yeast probiotic. The total expression and secretion efficiency of endoglucanase A was 418 unit/l and 73%, respectively, in the batch fermentation of S. cerevisiae 2805/pYlnu-CT1 on galactose medium. The mo-lecular weight of secreted endoglucanase A was found to be greater than 100 kDa, presumably due to the N-linked glycosylation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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