• Environmental Engineering Research
• /
• 제20권2호
• /
• pp.127-132
• /
• 2015

Perfluorooctane sulfonate (PFOS) and Perfluorooctanoic acid (PFOA) are persistent environmental pollutants, extremely stable, and possibly adversely affect human health. They are widely used in many industries and consumer goods, including sunscreen products. These substances are stable chemicals made of long carbon chains, having both lipid- and water-repellent qualities. The research objectives are (1) to find the most effective method for the preparation of semi-liquid samples by comparing solid phase extraction (SPE) and centrifugation after Pressurized liquid extraction (PLE), and (2) to determine the contamination levels of PFOS and PFOA in waterproof sunscreen samples. All sunscreen samples were analyzed by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). Sunscreen samples were purchased from domestic and international brands sold in Thailand. Special chemical properties were considered for the selection of samples, e.g., those found in waterproof, sweat resistant, water resistant, and non-stick products. Considering the factors of physical properties, e.g., operation time, chemical consumption, and recovery percentage for selecting methods to develop, the centrifugation method using 2 mL of extracted sample with the conditions of 12,000 rpm and $5^{\circ}C$ for 1 hour after PLE was chosen. The highest concentrations of PFOS and PFOA were detected at 0.0671 ng/g and 21.0644 ng/g, respectively. Even though present concentrations are found at ng/g levels, the daily use of sunscreen products is normally several grams. Therefore, a risk assessment of PFOS and PFOA contamination in sunscreen products is an important concern, and more attention needs to be paid to the long-term effects on human health.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제37권3호
• /
• pp.168-174
• /
• 1994

여과 및 원심 분리가 $70^{\circ}C$ 저장 중 참기름의 산화 안정성에 미치는 영향을 headspace gas chromatography법에 의한 헥산알 생성과 기름의 과산화물가 및 공액 이중 결합 측정에 의해 살펴보았다. 볶은 참깨로부터 얻은 조참기름은 유리지방산, 공액 이중결합과 금속(철, 구리, 마그네슘 및 아연)을 더욱 많이 함유한 반면 수분과 ${\gamma}-tochopherol$은 여과 참기름 또는 원심분리 참기름에 더 많이 함유되었다. 여과 참기름은 세 종류의 기름 중 가장 큰 L과 b값의 우수한 색도에도 불구하고 조참기름보다 많은 과산화물을 함유하였다. 모든 참기름이 $70^{\circ}C$ 저장 중 색차가 증가하는 경향을 보였으며 여과 참기름에서의 리놀렌산 감소 경향을 제외하고는 비교적 일정한 지방산 조성을 보였다. 산화 안정성에 있어서 원심분리 참기름과 조참기름은 a=1%에서 유의적인 차이를 보이지 않았으며 여과 참기름은 이들보다 산화안정성이 떨어졌다. 원심분리 참기름이 산화안정성과 유지의 색도 측면에서 가장 좋은 것으로 나타났다.

• 생명과학회지
• /
• 제8권4호
• /
• pp.400-409
• /
• 1998

Formation of adduct was studied in benzo(a)pyrene(BP)- and doxorubicin(Dx)-treated human NC-37 cells and isolated nuclei. Major adducts formed were determined by fluorescence absorption spectrophotometery and DNA-lin-ked protein assay. When isolated nuclei were exposed to carcinogens BP and DMBA, and anticancer drugs m-AMSA, ellipticine and Dx, varying degrees of adduct formation occured between DNA-protein complex and these drugs. When the mixture was centrifuged 1.7 M sucrose solution, binding BP and DMBA appeared to be similar between the sediment and the supernatant. When the sediment was centrifuged again with 0.35% polymin-P, the amount of BP bound was 2-fold greater in the protein(1077$\pm$55cpm) than in DNA fraction (470$\pm$20cpm), whereas that of DMBA was 1.6-fold greater in the DNA than in protein fraction. In the case of m-AMSA, ellipticine and Dx, the amount of binding was slightly greater in supernatant than in sediment in centrifugation with 1.7 M sucrose, and more than 3 times greater in the DNA- than in protein- fraction in centrifugation with 0.35% polymin P. DNA fractions which associated with a subset of nonhistone chromosomal protein were isolated from NC-37 cells exposed to $^{3}$H-BP and $^{14}$C-Dx. They were separated into two distince components DNA-S and DNA-P by centrifugation with 2M Nacl chromatin extraction. The results indicated that the amount of $^{3}$H-BP bound was 6.0-fold greater in DNA-P as compared with DNA-S, while that of $^{14}$C-Dx binding appreaed to be 6.2-fold greater in DNA-S than in DNA-P fraction. When $^{3}$H-BP binding wasdetermined in the presence of cold Dx, the amount of binding was reduced only in the DNA-P fraction, indicating that the interaction between DNA and protein is decreased. Gene expression by these drugs, BP treated cells were increased to compare with nomal cells but reduced by treatment with BP-Dx. These results suggest that the protein moiety which tightly bound to DNA-P fraction may play an important role in the regulation of gene expression.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
• /
• 제42권1호
• /
• pp.22-29
• /
• 2015

Objective: Sperm must be properly prepared in in vitro fertilization (IVF)-embryo transfer (ET) programs in order to control the fertilization rate and ensure that embryos are of high quality and have appropriate developmental abilities. The objective of this study was to determine the most optimal sperm preparation method for IVF. Methods: Patients less than 40 years of age who participated in a fresh IVF-ET cycle from November 2012 to March 2013 were included in this study. Poor responders with less than three mature oocytes were excluded. Ham's F-10 medium or sperm-washing medium (SWM) was used in combination with the density-gradient centrifugation/swim-up (DGC-SUP) or SUP methods for sperm preparation. A total of 429 fresh IVF-ET cycles were grouped according to the media and methods used for sperm preparation and retrospectively analyzed (DGC-SUP/Ham's F-10, n=82; DGC-SUP/SWM, n=43; SUP/Ham's F-10, n=181; SUP/SWM, n=123). Results: There were no significant differences among these four groups with respect to the mean age of the female partners, duration of infertility, number of previous IVF cycles, and retrieved oocytes. We determined that both the DGC-SUP and SUP methods for sperm preparation from whole semen, using either Ham's F-10 or SWM media, result in comparable clinical outcomes, including fertilization and pregnancy rates. Conclusion: We suggest that both media and both methods for sperm preparation can be used for selecting high-quality sperm for assistive reproductive technology programs.

• 한국식품저장유통학회지
• /
• 제13권2호
• /
• pp.138-143
• /
• 2006

청징 사과주스 제조시 원심분리를 이용한 청징보다는 한외여과 또는 혼합처리에 의하여 효율적인 청징 사과주스를 제조할 수 있는 것으로 나타났다. 원심분리시 회전속도가 높고 저온에서 공정을 행할수록 청징효과가 개선되어 회전속도 증가뿐만 아니라 저온의 효과가 매우 뚜렷했다. 원심분리시 최적조건은 $5^{\circ}C$, 10,000rpm에서 10분이었다. 한외여과시 공정조건에 관계없이 청징효과가 매우 우수한 것으로 나타났는데, 한외여과 최적 공정조건은 투과플럭스와 청징효과를 고려해 볼 때 온도 및 압력이 각각 $45^{\circ}C$, 150 kPa이었다. 혼합공정 후에 청징효과가 뚜렷하게 개선되지 않았는데 이는 한외여과 공정을 거치면서 이미 일정 수준의 청징이 이루어 졌음을 의미한다. 한외여과 공정의 효율성은 색도의 변화에서도 간접적으로 측정할 수 있었는데 한외여과 처리된 시료의 L*값과 ${\Delta}E$는 가장 높고 반면 a*값은 가장 낮은 것으로 나타났다. 전반적으로 비교하여 볼 때 한외여과 방법이 고품질의 청징 사과주스를 제조하는데 우수한 것으로 판단되며 또한 배제액 중의 고형성분은 식이섬유 강화 주스 제조 시에 첨가될 수 있는 이점이 있다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
• /
• 제24권3호
• /
• pp.369-375
• /
• 1997

Studies were conducted to determine the efficiency of decondensation protocols. Sperm obtained from seven normal donors was immediately washed after liquefaction and then decondensed using the method of West et al. (1989) and my original protocol. My optimized protocol entailed mixing 1 ml aliquots of semen with 4 ml phosphate buffered saline (PBS). Following centrifugation, pellets were resuspended in 1 ml PBS containing 6 mM EDTA. After centrifugation, pellets were resuspended in 1 ml PBS containing 2 mM dithiothreitol at $37^{\circ}C$ for 45 min. Following mixing with 2 ml PBS and centrifugation, pellets were resuspended by vortexing. While vortexing, 5 ml of fixative were gently added. Slide preparation was accomplished using the smear method and it was stored at $4^{\circ}C$. When comparing these protocols, the degree of sperm decondensation and head swelling was monitored by measuring nuclear length, area, perimeter, and degree of roundness using FISH analysis software. Apparent copy number for chromosome 1 and, separately, for the sex chromosomes was determined by FISH using satellite DNA probes for loci DIZ1, DXZ1 and DYZ3. Sperm treated by my decondensation protocol showed significant increases (p<0.05) in length, area, perimeter, and degree of roundness. There was a significant decrease (p<0.05) in the frequency of nuclei displaying no signal but no change in the frequency of nuclei with two signals in samples decondensed by my protocol. My data suggested that decondensation using my original protocol may lower the frequency of cells with spurious "nullisomy" due to hybridization failure without inducing spurious "disomy" resulting from increased distances between split signals.

• Restorative Dentistry and Endodontics
• /
• 제17권1호
• /
• pp.222-234
• /
• 1992

The purpose of this study was to evaluate the systemic and local production of immunoglobulins and their levels in patients with periapical cysts using Enzyme - Linked Immunosorbent Assay. Streptococcus sanguis, Bacteroides gingivalis, and Bacteroides intermedius were grown for use as antigen and they were harvested by centrifugation. The patients were divided into two groups: patients of periapical cysts and normal control. 5 patients of each group were selected and their blood were obtained via intravenous puncture prior to surgical operation. Sera were prepared by centrifugation of each blood samples. Cyst fluid were aspirated from cystic cavity and cyst wall were excised at operation. Control tissue were also excised at extraction site of impacted wisdom teeth from normal control. Each tissue was prepared by homogenization and centrifugation. Then antibodies of each sample were measured by modified ELISA. The following results were obtained: 1. Serum IgG and IgM levels were not significantly different between patients with periapical cyst and normal control. 2. IgG and IgM levels of cyst fluid to Bacteroides gingivalis and Bacteroides intermedius were significantly higher than those of serum of patients with periapical cyst, but there was no significant difference to Streptococcus sanguis. 3. IgG and IgM levels of cyst wall to Bacteroides gingivalis and Bacteroides intermedius were significantly higher than those of control tissue, but there was no significant difference to Streptococcus sanguis. 4. IgG and IgM levels in cyst fluid and IgG levels in cyst wall were highest to Bacteroides gingivalis, and IgM levels in cyst wall were highest to Bacteroides intermedius.

• 핵의학기술
• /
• 제18권1호
• /
• pp.153-157
• /
• 2014

Anti double-stranded DNA (Anti-ds DNA)항체의 검출은 SLE의 진단에 중요하며 American College of Rheumatologists의 SLE 진단기준에 포함되어 있다. 또한 SLE 질병의 활성도와 Anti-ds DNA 항체 수준의 상관성이 보고되어 있으며 Anti-ds DNA 항체 정량검사는 SLE의 치료 전, 후 추적에 매우 유용하다. Anti-ds DNA 항체의 검출을 위한 검사 방법으로 방사면역측정법(radioimmunoassay, RIA)을 이용한 Farr assay, Crithidia luciliae를 이용한 면역형광 측정법(immunofluorescence Test, CLIFT), 효소면역측정법(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA), 화학발광면역 측정법(chemiluminescence immunoassay, CLIA)이 있다. 본원에서 방사면역측정법(radioimmunoassay, RIA)으로 Anti-ds DNA 항체 검사 과정에서 lipemic한 검체의 경우 침전물의 형성이 원활하지 않거나 침전물도 같이 흡입되는 상황이 발생 하였고, 이러한 문제점을 해결하기 위해 lipemic 검체가 분석 결과에 미치는 영향 정도를 평가하였다. 2012년 9월부터 2013년 2월까지 Anti-ds DNA 항체 검사가 의뢰된 검체 중 lipemic한 검체(n=81)를 선택하여 마이크로 원심분리기로 전처리(고속 원심분리: 14,000 rpm 5 mins)한 후 동시에 Anti-ds DNA 항체 검사(Anti-ds DNA kit, Trinity Biotech, Ireland)를 시행하였다. 실험군 1 (lipemic 검체의 Anti-ds DNA 항체 농도 ${\leq}7IU/mL$)에서 y=0.3636x+4.7322, $R^2=0.0238$, Pearson 상관계수는 0.154, paired t-test (P=0.003), Difference (%) mean 65.7의 결과를 얻었으며 통계적으로 유의한 차이를 보였다. 그러나 실험군 2 (lipemic 검체의 Anti-ds DNA 항체 농도 ${\geq}8IU/mL$)에서 y=0.9837x+0.2982, $R^2=0.994$, Pearson 상관계수는 0.997, paired t-test (P=0.181), Difference (%) mean -5.53을 보였고 통계적으로 유의한 차이가 없음을 확인할 수 있었다. 임상에서 SLE (systemic lupus erythematosus)의 진단에 중요한 역할을 하는 Anti-ds DNA 항체 검사는 lipemic 검체의 영향을 배제하기 위해서 반드시 전처리(고속 원심분리: 14,000 rpm 5 mins) 과정을 통해 혈청 내 지질 성분을 제거한 후 검사를 시행하여야 한다.

• 생명과학회지
• /
• 제19권6호
• /
• pp.728-734
• /
• 2009

본 연구에서는, PBMC로부터 고순도 및 고수율의 단세포를 분리하기 위해 Histopaque 용액의 density 및 osmolarity를 PBS와 NaCI 용액으로 1.072 g/ml 및 335 mOsm로 조절하여 간단하고 경제적인 방법인 부유밀도구배 원심분리법을 개발하였다. 위와 같이 조절된 Histopaue 용액을 사용하여 부유밀도구배 원심분리를 시행한 결과 단세포는 Top층에서 가장 많이 회수되었다. 회수된 단세포의 순도는 71.44${\sim}$82.38%의 범위를 나타내었고 평균 74.75${\pm}$3.84% 이었다. 또한, 수율은 21.02${\sim}$53.63%의 범위를 나타내어 평균 32.62${\pm}$11.16% 이었다. 이러한 방법의 부유밀도구배 원심분리에 의해 분리된 단세포를 수지상세포로 분화 유도시켜 그 형태, 표현형, 기능적인 면을 분석해 보았을 때 전형적인 수지상세포의 기능을 나타내었다. 결론적으로, PBMC로부터 단세포를 분리하기 위해 본 연구에서 사용된 부유밀도구배 원심분리 방법은 plastic adherence, elutriation 및 immunomagnetic selection보다 용이하고 경제적인 방법이다. 나아가 이러한 장점을 바탕으로 임상단계에서 수지상세포를 안전하고, 효율적으로 배양할 수 있는 closed system에도 적용이 가능할 것으로 기대된다.

• 한국식품과학회지
• /
• 제36권2호
• /
• pp.321-328
• /
• 2004

오디 과실을 이용한 고부가가치의 가공식품의 개발에 관한 연구 일환으로 먼저 최소가공기술을 이용한 오디 과실주스 제조 방법을 조사하였다. 오디 과실의 물추출액을 면포여과, 감압여과(Whatman No. 4 filter paper를 이용한) 및 원심분리를 각각 실시한 결과 원심분리가 가장 좋은 청징효과를 나타내었다. 그리고 여러 여과보조제 및 청징제를 첨가한 후 원심분리하여 얻은 오디 과실즙의 색의 변화는 처리한 여과보조제, 청징제 및 청징 효소의 종류에 따라 차이가 있었으며, 특히 casein, gelatin, chitin, chitosan 및 PVPP는 오디 색소를 강하게 흡착하였으며, 그리고 청징효소 중 ${\alpha}-amylase$ 처리구가 가장 좋은 청징효과를 나타내었다. 다음, 오디 과즙을 원심분리한 후 $0.01\;{\mu}m$ 막여과를 실시한 결과 오디주스의 청징효과가 매우 우수하였으나 한외여과방법은 오디 색소의 강한 흡착으로 적절하지 않았다. 한편, 4가지 갈변저해제 처리에 따른 오디 과실주스의 갈변억제 효과를 측정한 결과 200ppm sodium hydrosulfite 처리구가 가장 갈변억제 효과가 우수하였으며, 아울러 0.1% L-ascorbic acid(L-AsA) 및 citric acid(CA)도 갈변억제 효과가 있었다. 그리고 위의 3가지 갈변저해제를 2중 복합병행 처리한 결과 0.1% L-AsA+0.1% CA 처리구가 가장 좋은 갈변억제 효과를 나타내었다. 마지막으로 관능검사를 실시한 결과 오디주스의 최적 당/산비는 40-50이었으며, 또한 상업적 살균 온도($85-90^{\circ}C$)에서 처리시간은 10분이 가장 적합함을 알 수 있었다.