Effects of the cell wall-degrading enzymes derived from Acremonium cellulolyticus and Trichoderma viride on the silage fermentation and in sacco degradation of tropical grasses i.e. rhodesgrass (Chloris gayana Kunth. cv. Callide) and guineagrass (Panicum maximum Jacq. cv. Natsukaze) were investigated in laboratory-scale experiments. These two grasses were either treated with or without the enzymes before ensiling. Untreated rhodesgrass produced acetate fermentation silage (lactate, $13.0\;g\;kg^{-1}$ DM; acetate, $38.7\;g\;kg^{-1}$ DM) with high final pH value and $NH_3$-N content (5.84 and $215\;g\;kg^{-1}$ DM). Addition of enzymes significantly increased (p<0.01) the lactate production (lactate, 45.6; acetate, $34.0\;g\;kg-^{1}$ DM) and decreased (p<0.01) the pH and $NH_3$-N (4.80 and $154\;g\;kg^{-1}$ DM) in the ensiled forages when compared with the control silages. Untreated guineagrass was successfully preserved with a high lactate proportion (lactate, 45.5; acetate, $24.1\;g\;kg^{-1}$ DM), and the addition of enzymes further enhanced the desirable fermentation (lactate, $57.5\;g\;kg^{-1}$ DM; acetate, $19.4\;g\;kg^{-1}$ DM). The content of NDF was lowered (p<0.05) by enzymes in both silages, but the extent appeared greater in the enzyme-treated rhodesgrass (rhodesgrass, $48\;g\;kg^{-1}$ DM; guineagrass, $21\;g\;kg^{-1}$ DM). Changes in the kinetics of in sacco degradation showed that enzyme treatment increased (p<0.01) the rapidly degradable DM (rhodesgrass, 299 vs. $362\;g\;kg^{-1}$ DM; guineagrass, 324 vs. $343\;g\;kg^{-1}$ DM) but did not influence the potential degradation, lag time and degradation rate of DM and NDF in the two silages.
The softening of the femented vegetables and the fruits was resulted from the degradation of pectin substances, cellulose, hemicellulose by polygalacturonase(PG), pectinesterase(PE), Cx-cellulase, $\beta$-galctosidase. The conversion of insoluble pectin to soluble pectin in cell wall-middle lamella was a major factor in the changes of firmness. Ca2+ was substantially increased firmness. However, Ca2+ could be removed from cell wall by chelating agents such as oxalic acid and citric acid. And Ca2+ was replaced with Na+ by ion exchange reaction. Ca2+ deficient tissue was vulnerable to attack by PG. Preheating treatment and Ca2+ addition is most effective in inhibiting the vegetable food softening and in increasing middle lamella-cell wall regidity, which PE activation by preheating treatment and Ca2+ addition could created more anionic carboxyl groups for cationic materials binding such as Ca2+ and chitosan and for polypectategel formation. Excessive demethylation by PE was associated with loosening of middle lamella cell wall components and softening.
Stem tissues of tomato plants (cv. Kwanyang) inoculated with Phytophthora capsici were examined by light and electron microscopy to compare early cytological differences between comaptible and incompatible interactions of tomatoes with the fungus. Twenty four hours after inoculation, the compatible isolate S 197 colonized severely the epidermis, cortex, and xylem vessels of stem tissue, whereas only few fungal cells colonized the stem tissues inoculated with the incompatible isolate CBS 178.26. Fragmented plasma membrane, distorted chloroplast, degraded cell wall, remnants of host cytoplasm were early ultrastructural features of the damaged host cell observed both in the compatible and incompatible interaction, a number of vesicles were distributed in the space between fungal cell walls and plasma membrane. The degradation of host cell walls by P. capsici was more pronounced in the compatible than the incompatible interactions. The incompatible interactions of tomato cells with P. capsici were characterized by formation of host cell wall apposition in the cortical parenchyma cells, indicating that the apposition of electron-dense material from the host cell walls may function as a plant defense reaction to the fungus. The fungal cells encased by wall appositions had abnormal cytoplasm and separated plasma membranes. The haustorium which formed from the fungal hyphae did not further penetrate through the host wall apposition and cytoplasmic aggregation, especially in the incompatible reactions. In contrast, the haustorium of the compatible isolate S 197 was not encased by wall appositions.
Tripitaka Koreana were made during Coryo Dynasty from 1236 to 1251 A.D. Buddhist scriptures were engraved on 81.340 wooden plates. Some plates were varnished with Rhus lacquer, but most of them were uncoated. Macroscopically, most of the plates appeared intact due to the storage in a well-ventilated wooden house. Because, they were irregularly used for printings with ink, it can be assumed that they were repeatedly exposed to ink-water and drying processes. The present were made to examine the changes of wood cell structures occurred during long-term aging deterioration processes in these dry archaeological wooden plates. Light, scanning and transmission electron microscopes were employed for this study. Wedge-shaped cracks and delamilations were found from the lumen side toward the compound middle lamellae and they progressed toward primary or secondary walls. A large amount of hypae in vessels and the degradation of vessel-ray pit walls by the fungal hyphae were observed. When compared to the recent wood, the birefringence of wood fibers was considerably lower or completly disappeared, suggesting the degradation of crystalline cellulose in these wood samples. The degradation of the cell wall could be also revealed the calculation of crystallinity with X-ray diffraction and the size of crystalline region was estimated.
The cell wall material from fruiting bodies of Laetporus sulphureus has been suggested as a new alternative to mutan for the mutanase induction in Trichoderma harzianum. Structural analyses revealed that the cell wall fraction from this polypore fungus contained 56.3% of (1$\rightarrow$3)-linked $\alpha$-glucans. When the strain T. harzianum F-340 was grown on a cell wall preparation from L. sulphureus, the maximal enzyme productivity obtained after 3 days of cultivation was 0.71 U/ml. This yield was about 1.8-fold higher than that achieved on mutan, known so far as the best, but expensive and inaccessible, inducer of mutanase production. Cell-wall-induced mutanase showed a high hydrolytic potential in reaction with a dextranase-pretreated mutan, where maximal degrees of saccharification and solubilization of this biopolymer (80% and 100%, respectively) were reached in 3 h at 45$^{\circ}C$. The mutanase preparation was also effective in degradation of streptococcal mutan and its removal from oral biofilms, especially in a mixture with dextranase.
The capability of higher ascomyceteous fungi to cause typical soft-rot decay for wood under laboratory conditions is reviewed and discussed. Fungi tested were extremely active in the decomposition of timbers. Scanning electron micrographs illustrated typical soft-rot decay pattern of higher wood decay ascomycetes, with the exception of H. trugodes that caused white-rot decay. Most of the fungi tested could be grouped as soft-rot fungi that showed typical soft-rot type II. Hypha confined primarily to the resin canals in softwoods or vessel elements in hardwoods and spread tracheid to tracheid via pits of cell wall to cell wall with mechanical force.
대두(Glycine max)의 ${\beta}$-1,3-glucanase를 분리동정하고 benzyladenine(BA)이 이 효소의 세포내 함량과 활동도에 미치는 영향을 조사하였다. 또 세포벽의 callose함량과 protoplast의 세포벽재생에 미치는 BA의 영향을 조사하여, cytokinin이 식물의 세포벽재생을 촉진하는 기능이 있음을 확인하고 세포벽재생에 있어서 cytokinin의 작용기구를 검토하였다. 대두 ${\beta}-1,3-glucanase$는 21 kD의 polypeptide로 동정되었는데 이 polypeptide의 세포내함량과 효소활성은 BA처리에 의하여 저하되었다. 그리고 callus세포벽의 callose함량과 protoplast의 세포벽재생율이 BA처리에 의하여 증가되었다. 이 결과들은 cytokinin이 세포의 ${\beta}-1,3-glucanase$수준을 저하시켜 callose분해를 억제함으로써 세포벽 재생을 촉진할 수 있음을 보여주었다.
Rice straw treated with anhydrous ammonia and/or sulphur dioxide was incubated with rumen liquor for 24 hours and 48 hours to investigate the changes in cell wall structure caused by the treatments and bacterial degradation using scanning electron microscopy (SEM). A less significant tissue loss of untreated rice straw was inspected after incubated for 24 hours and 48 hours. Sulphuration decreased the thickness of sclerenchyma and apparently removed parenchyma tissues. Ammoniation degraded the phloem, and the lignified inner portion of the cell wall was completely, however, little collapsed epidemis and vascular bundles. Ammonia and Sulphur dioxide combined treatment removed the inner layer from outer layer. The extent of apparent degradability following combination treatment was the largest due to the enhanced microbial degradation of sclerenchyma and parenchyma cells.
An oil-degrading yeast, Yarrowia lipolytica 180, exhibits interesting cell surface characteristics under the growth on hydrocarbons. An electron microscopic study revealed that the cells grown on crude oil showed protrusions on the cell surface, and thicker periplasmic space and cell wall than the cell surface, and thicker periplasmic space and cell wall than the cells grown on glucose. Y. lipolytica cells lost its cell hydrophobicity after pronase(0.1 mg/ml) treatment. The strain produced two types of emulsifying materials during the growth on hydrocarbons; one was water-soluble extracellular materials and the other was cell wall-associated materials. Both emulsifying materials at lower concentration (0.12%) enhanced the oil-degrading activity of Moraxella sp. K12-7, which had medium emulsifying activity and negative cell hydrophobicity; however, it inhibited the oil-degrading activity of Pseudomunas sp. K12-5, which had medium emulsifying activity and cell hydrophobicity. These results suggest that the oil-degrading activity of Y. lipolytica 180 is closely associated with cell surface structure, and that a finely controlled application of Y.lipolytica 180 in combination with other oil-degrading microorganisms showed a possible enhancing efficiency of oil degradation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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