We researched effects of growth on initial inoculum size, liquid volume, and medium feeding rate etc. Cell suspension inoculated at low cell concentrations showed a typical growth reduction, whereas root cultures showed an improvement in growth. In this paper, Hairy roots showed high growth rate at 0.4 % inoculum size and 100 mL liquid volume in 250 mL flask cultures.
인간배아줄기세포는 인간배아줄기세포가 가지는 전 분화능 등의 특이적 특성으로 인해 재생의학 분야에서 세포 치료제의 근원으로 널리 각광받고 있다. 그러나, 미분화 상태의 인간배아줄기세포를 세포치료제로 이용하기 위해서는 인간배아줄기세포 주 유래 기능성 세포를 확립이 반드시 요구된다. 본 연구에서는, 미분화 상태의 인간배아줄기세포주로부터 기능성 세포의 확립을 위해, 혈관계통의 세포로 분화를 유도하였으며, 분화 유도 후 세포의 크기 차이를 이용하여 특정 세포군 만을 분리하여 그 기능성을 비교 분석하였다. 그 결과, VEGF를 이용하여 분화 시킨 세포군에서 약 10%의 PECAM 양성 세포군을 확인할 수 있었으며, 분리 및 세포 이식을 위해 세포를 단일 세포군으로 만들었다. 단일 세포군의 형성 후, 유세포 분석기를 이용한 세포 분리 기법을 이용하여 FCS를 기준으로 한 세포 크기의 차이를 이용하여 특정 세포군 만을 분리하여, 하지 허혈 동물 모델로의 이식을 통해, 비 분리 세포군과 치료 효능을 비교 분석을 실시하였다. 세포 이식 4주 후, 혈류량 복구율이 FSC 기준 분리 군의 경우 54%, 비 분리군의 경우 17%를 보이는 것을 확인하였다. 이 결과는, 초기 분화 유도 후 세포 크기차이를 이용한 세포 분리법이 기능성 세포 획득에 이용될 수 있음을 시사한다. 이와 같은 방법을 통해 다양한 종류의 기능성 세포 분리에 이용될 수 있을 것이라 생각된다.
동질의 유전적 배경을 가지는 1, 2, 3, 4 배체의 효모에 있어서 세포 체적, 세포 표면적, 균체농도, 건조 균체량, 자외선 저항성, 호흡결손 출현빈도. 발효력, 핵산 함량을 조사하였다. 자연 돌연변이에 의한 호흡결손 변이의 출현빈도는 2, 3, 4 배체보다 1배체에서 현저히 높게 나타났다. 세포 체적, 세포 포면적, 균체농도, 건조 균체량, 자외선 저항성, 발효력, DNA함량 등은 고차배수성에 따라 현저히 높아지는 경향을 나타냈다.
The changes in the red cell volume and the plasma chloride level were measured when the blood $CO_2$ content was altered by equilibration with the atmospheric air or pure $CO_2$ for 20 minutes. The red cell volume was expressed in terms of hematocrit and mean corpuscular volume (M.C.V.). The results obtained were as follows. 1) On equilibration with the atmospheric air, the MCV and the plasma chloride level were $91.6{\pm}1.26\;c.{\mu}$ and $110.7{\pm}6.28mEq/L.$ respectively. 2) On equilibration with pure $CO_{2}$, the MCV and the plasma chloride level were $109.6{\pm}2.0\;c.{\mu}$ and $90.7{\pm}5.17\;mEq/L.$ respectively. 3) When the blood was subjected to equilibration with the atmospheric for air 20 minutes after equilibration with pure $CO_{2}$ for the same period of time the MCV and the plasma chloride level were $89.9{\pm}6.34\;c.{\mu}$ and $100.3{\pm}5.50\;mEq/L.$ respectively. From the above results it can be concluded that an increase of the blood $CO_2$ content in the experimental condition causes definitely a decrease of the plasma chloride level and a concomitant increase of the red cell volume, and that a decrease of the blood content $CO_2$ in the experimental condition causes definitely an increase of the plasma chloride level and a concomitant decrease of the red cell volme. Apparantly there exists a parallel relationship between the extent of the decrease of the plasma chloride level and that of the increase of the red cell volume when the blood $CO_2$ content increased in the experimental condition. When the blood $CO_2$ content decreased, the extent of the decrease of the red cell volume exceeds that of the increase of the plasma chloride level.
Kim, Youngkyu;Kim, Tae-Keun;Shin, Yeonhee;Tak, Eunyoung;Song, Gi-Won;Oh, Yeon-Mok;Kim, Jun Ki;Pack, Chan-Gi
Molecules and Cells
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제44권11호
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pp.851-860
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2021
Label-free optical diffraction tomography (ODT), an imaging technology that does not require fluorescent labeling or other pre-processing, can overcome the limitations of conventional cell imaging technologies, such as fluorescence and electron microscopy. In this study, we used ODT to characterize the cellular organelles of three different stem cells-namely, human liver derived stem cell, human umbilical cord matrix derived mesenchymal stem cell, and human induced pluripotent stem cell-based on their refractive index and volume of organelles. The physical property of each stem cell was compared with that of fibroblast. Based on our findings, the characteristic physical properties of specific stem cells can be quantitatively distinguished based on their refractive index and volume of cellular organelles. Altogether, the method employed herein could aid in the distinction of living stem cells from normal cells without the use of fluorescence or specific biomarkers.
본 논문에서는 광 회절 단층 촬영 (Optical Diffraction Tomography, ODT) 기법을 사용해 얻어진 세포 영상을 3차원 가상 공간에 시각적으로 표현하고 기존의 세포 영상들과의 일치감을 주는 색상 매핑 기술을 포함한 가시화 프레임 워크를 소개한다. 전체 볼륨을 구성하는 내부 구조에 대한 정보가 잘 알려져 있거나 명확하게 구분 가능한 인체의 장기 또는 산업 기기와 같은 기존의 볼륨 데이터와는 달리 세포 영상 데이터는 세포소기관들 간의 경계가 모호하거나 상황에 따라 형상의 변화가 다양하다는 특징을 가지고 있어, 세포의 형상에 대한 일관적인 시각 표현이 상대적으로 어렵다는 문제가 있다. 본 논문에서는 이를 해소하기 위해 세포의 3차원 형상을 실시간으로 렌더링 할 수 있는 가시화 기법을 제안한다. 제안하는 기법에서는 우선 세포의 3차원 형상을 나타내기 위해 볼륨 데이터의 가시화에서 널리 활용되고 있는 볼륨 렌더링 기법을 ODT 영상에 맞게 적용했으며, 빈 공간 교란 기법을 통한 렌더링 결과의 개선으로 세포내 구조의 연속성을 나타낼 수 있게 했다. 또한 다중 전이 함수에 대해 레이어 기반 독립 렌더링을 적용하는 것을 통해 다수의 세포내 구조를 하나의 화면에 표현하는 복합 가시화 기법을 제안했다. ODT 영상 및 염색 영상을 동시에 촬영 가능한 현미경으로부터 얻어진 세포 영상을 가시화 하는 것을 통해 제시된 가시화 기법의 유용성을 확인했다.
Halberstadt, Craig R.;Palsson, Bernhanrd O.;Midgley, A.Rees;Curl, Rane L.
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제7권3호
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pp.163-170
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2002
This report describes the use of a transtubular bioreactor to study the relative effects of diffusion versus perfusion of medium on antibody production by a hybridoma cell line. The study was performed with a high-density cell culture maintained in a serum-free, low-protein medium for 77 days. It was determined that the reactor possessed a macro-mixing pattern residence time distribution similar to a continuous stirred tank reactor (CSTR), However, due to the arrangement of the medium lines in the reactor, the flow patterns for nutrient distribution consist of largely independent medium path lengths ranging from short to long. When operated with cyclic, reversing, transtubular medium flow, some regions of the reactor (with short residence times) are more accessible to medium than others (with long residence times). From this standpoint, the reactor can be divided into three regions: a captive volume, which consists of medium primarily delivered via diffusion; a lapped volume, which provides nutrients through unilateral convection; and a swept volume, which operates through bilateral convection. The relative sizes of these three volumes were modified experimentally by changing the period over which the direction of medium flow was reversed from 15 min (larger captive volume) to 9 h (larger swept volume). The results suggest that antibody concentration increases as the size of the diffusion-limited (captive) volume is increased to a maximum at around 30 min with a sharp decrease thereafter. As reflected by changes in measured consumption of glucose and production of lactate, no significant difference in cellular metabolism occurred as the reactor was moved between these different states. These results indicate that the mode of operation of the transtubular bioreactor may influence antibody productivity under serum-free, low-protein conditions with minimal effects on cellular metabolism.
The double tracer study on erythrokinetics was carried out experimentally with radioactive iron ($^{59}Fe$) and chromium ($^{51}Cr$) in rabbits. The 0.1% canthalidin solution and 1% pot. perchlomate solution was given subcutaneously to 20 rabbits respectively. 3 and 6 days after injection, the blood chemistry, urine examination, ferrokinetics and apparent half survival time of RBC were ($^{51}Cr\;T\frac{1}{2}$)determined. Following were the results: 1) Red blood cell hematocrit and hemoglobin values were moderately reduced and B.U.N. and serum creatinine values were slight]y inercased in the canthalidin group, while B.U.N. and serum creatinine values were within normal limits in the pot. perchlomate group. Reticulocyte values were slight]y increased in the canthalidin group, while was normal range in the pot. perchlomate group. 2) Blood chemistry finding was not significant statistically in both experimental groups, but serum iron value was moderately reduced in both group. 3) Plasma volume was unchanged in both group, but red cell volume and whole blood volume were slightly reduced in both groups. 4) Results of ferrokinetics were as follows: i) The plasma iron disappearance rate was delayed in both groups. Plasma iron turnover rate, red cell iron utilization and red cell iron turnover rate were decreased in both groups, and then red cell iron turnover rate was more decreased than plasma iron turnover rate in both groups. Circulating red cell iron was slight]y increased in canthalidin group and red cell iron concentration was within normal range in both groups. ii) P.I.T.R.-R.C.I.T. value was moderately increased in the canthalidin group and slightly increased in the pot. perchlomate group. Reticulocyte index, red cell iron turnover index, plasma iron turnover index and effective erythropoiesis index were whole]y reduced in both groups. iii) The red cell life span was slightly shortened in the canthalidin group while was within normal range in pot. perchlomate group. The pathologic finding of renal biopsy of the canthalidin group shows a selective damage in glomerulus, while shows almost normal range or slight damage in tubules. And that of the pot. perchlomate group shows a selective damage in tubules with slight damage of glomerulus.
The cell counting of colonial Microcystis spp. is a rather difficult and error-prone proposition, as this genus forms irregularly-shaped and irregularly-sized colonies, which are packed with cells. Thus, in order to facilitate a cell count, four methods of dividing the colonies into single cells were compared, including vortexing, sonication, $TiO_2$ treatment, and boiling. As a result, the boiling method was determined to generate the greatest number of single cells from a colony, and all colonies were found to have divided completely after only 6 min of treatment. Furthermore, no significant cell destruction, which might alter the actual cell density, was detected in conjunction with the boiling method (P=0.158). In order to compute the cell number more simply, the relationship between the colony size and the cell number was determined, via the boiling method. The colony volume, rather than the area or diameter was correlated more closely with the cell number ($r^2=0.727$), thereby suggesting that the cell numbers of colonial Microcystis sp. can also be estimated effectively from their volumes.
This study is intended to develop a Feature based modeler. It is difficult to integrate CAD and CAM/CAPP with information that is given only by a conventional CAD system. Therefore a lot of studies have concentrated on a Feature based CAD system. But conventional Feature based modelers have had limitation on providing sufficient information related to Feature interaction. If a Feature based modeler is to be used in assembly simulation, a new Feature-based modeling method needs to be developed. Also to support collision detection between parts, we have to handle Feature interaction systematically. Therefore we suggest Cell data structure which handles interaction of Features by volume. The volume created by Feature interaction is saved as a Cell. With the Cell structure we solve problems involved with Feature interaction. This study shows how the Cell data structure can manage Feature interaction and give enough information in assembly simulation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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