Previously, we observed high level expression of goat β-casein/genomic hGH fusion gene in mammary gland of transgenic mice. To develop an expression vector to make a human granulocyte-colony stimulating factor (hG-CSF) protein efficiently produced in milk of transgenic animals, we designed a new bicistronic vector using the goat β-casein/genomic hGH fusion gene as regulation sequences for expression and internal ribosome entry site (IRES) as a mediator for second gene expression. This vector was constructed by insertion of encephalomyocarditis virus (EMCV) IRES-dependent second gene region coupled with hG-CSF cDNA into 3' untranslated region of an intact hGH gene. By microinjcetion, four transgenic mice were generated and three of them transmitted the bicistronic vector to their progeny. (omitted)
Kim, Wan-Seop;Davis, Sean;Wong, Grace;Demain, Arnold-L.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.13
no.4
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pp.560-563
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2003
During our previous studies on the relationship between nutrient requirements of S. hygroscopicus C9 and rapamycin biosynthesis, we developed chemically-defined media containing among other nutrients, aspartic acid, arginine, histidine, or ammonium sulfate. However, these media (“Cheng et al. medium” and “Lee et al. medium”) showed very slow growth characterized by a very long lag phase of growth. In an attempt to develop a chemically-defined or semi-defined medium to support more rapid growth and increased cell production, we have carried out studies to shorten the lag phase. Of the various additives tested, vitamin-free casein acid hydrolysate was the most significant by shortening the lag phase by 2-3 days. Mixtures of amino acids failed to replace casein acid hydrolysate. The active principle passed through an ultrafilter with a molecular weight cutoff of 1,000 and thus may be a peptide. The present work has yielded a semi-defined medium which should be useful for further growth studies on S. hygroscopicus C9.
The model rats with postmenopausal osteoporosis were comparatively observed with regard to the effects of bovine ash and calcium phosphate on calcium metabolism. The modelling design involved the five week-old week-old female SD-strain rats ovariectomized and fed a low-Ca diet(20% casein, 0.06% Ca and 0.38% P) for three weeks. The rats were divided into five groups, one of which was fed the low-Ca diet(basal), and the rest of which were divided into five groups, one of which was fed the low-Ca diet(basal), and the rest of which were fed four kinds of Ca-supplemental diets(20% protein, 1.06% Ca and 0.8% P) for three weeks. The Ca-suplements diets contained two kinds of Ca sources, bovine bone ash(BBA) or calcium phosphate, tribasic [Ca3(PO4)2] and two kinds of protein sources, casein or isolated soy protein(ISP). The model rats of postmenopausal osteoporosis fed basal diet showed a significant decrease in Ca utilization in reference to serum Ca concentration, breaking force of bone, Ca and P contents of bone, and Ca absorption and retention. However, the supply of Ca for three weeks demonstrated the improved utilization of Ca. One step further, BBA was more effective than calcium phosphate in improving Ca utilization in ISP-fed groups. On the other hand, no significant difference was seen in casein-fed groups. It is to conclude that BBA could be more effective in accelerating Ca utilization under vulnerable dietary or physiological conditions such as vegetable protein intake and osteoprosis.
This study was designed to investigate the nutritional effect of mugowrt powder supple mentation to rice diets with different protein levels. Thirty female albino rats weighing 39-43g were adopted for the feeding trial for 4 weeks. The different 5 kind of experimental diets were performed . Control diet was commercially available forage for rats, experimental diet (I-C) highly milled rice, (Ⅰ) highly milled rice 95% and mugwort powder 5%, (Ⅱ-C)highly milled rice 95% and milk casein 5%, and (Ⅱ) highly milled rice 90%, milk casein 5 % and mugwort powder 5%. Growth rate was remarkably high in the dietary group fed on highly milled rice supplemented with 5% mugwort powder (protein 8%) (P<0.05), but it showed the tendency to be rather low in the group fed on highly milled rice supplemented with 5% casein and 5% mugwort powder (protein 12%). Food efficiency as well as protein efficiency appeared similar to the growth rate. Hematodcrit level demonstrated the same tendency as growth rate, but hemoglobin content was observed to increase by diets supplemented with increasing amount of mugwort regardless of protein level. Each nutrient intake was increased by adding mugwort powder to diets after a week's feeding, but it was increased by 8% protein diet, and decreased by 12% protein diet in 3 weeks as well as 4 weeks after feeding . The absorption rate of carbohydrate and protein decreased by feeding mugwort supplemented diets regardless of protein level and feeding period, and that of lipid increased with 12% protein diet.
This study investigated the effects of dietary soy protein and Ca on the lipid profiles of rats fed fat-enriched diets. Rats were divided into two groups and fed either a casein-low Ca (Exp I) or ISP-high Ca diet (Exp II) for a control period of 4 weeks. The two groups of rats were again subdivided into 4 groups and fed one of 4 experimental diets for another 4 weeks. The experimental diets consisted of 18% beef tallow and 1 % cholesterol, in which either 20 % casein or ISP with one of two levels of Ca, high (1 %) or low (0.1 %). The concentrations of total lipid, cholesterol and triglyceride in serum, liver and feces were determined. At the end of the control period, the serum total lipid and cholesterol concentrations were low in the rats fed ISP-high Ca diet (67~76% and 83~86%). During the next 4 week period, these concentrations remained significantly lower in rats fed the diets containing ISP and high Ca compared with those on casein and low Ca diets (p < 0.05). Total lipid and cholesterol concentrations in feces were significantly higher in the ISP-high Ca dietary group at 4 weeks, and high in both high Ca groups at 8 weeks. This study demonstrates that both soy protein and Ca reduce serum and liver cholesterol, triglyceride, and total lipid in rats fed fat-enriched diet, and that they have an additive effect when combined.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.5
no.1
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pp.1-9
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1976
The variations of growth gain and the composition of free amino acid levels in plasma and erythrocytes of young rats(wistar strain male) were determined by microbioassay method, feeding diets of rice group and 7% casein group as a control for three weeks. The results were as follows; 1. The growth gain of control diet group was higher than the rice diet group. 2. The contents of free tryptophan, lysine, and threonine levels in plasma and erythrocytes on rats of 7% casein group were higher than the rice group. 3. In the 7% casein diet group and the rice group, these free amino acids were included more in erythrocytes than in plasma. 4. Therefore, generally feeding by high protein score diet was included more Try, Lys, Thr in plasma and erythrocytes than feeding by low protein score diet. So the high and low of protein score was assumed by the contents of Try, Lys, Thr in plasma and erythrocytes on rats.
The secretory efficiency of recombinant xylanase xynB from yeast Pichia pastoris between the ${\alpha}$-factor preprosequence and a classical mammalian signal peptide derived from bovine ${\beta}$-casein was compared. The results showed that although the bovine ${\beta}$-casein signal peptide could direct high-level secretion of recombinant xylanase, it was relatively less efficient than the ${\alpha}$-factor preprosequence. In contrast, the bovine ${\beta}$-casein signal peptide caused remarkably more recombinant xylanase trapped intracellularly. Real-time RT-PCR analysis indicated that the difference in the secretory level between the two signal sequences was not due to the difference in the transcriptional efficiency.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.20
no.1
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pp.7-12
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2000
This study was carried out to improve the ability of embryo formation and the efficiency of plant regeneration from suspension cultured cells of seed derived calli of orchardgrass (Dactylis glomerata L.). The frequency of formation of round cell and cell colonies was highest at 50 days after suspension culture in $N_6$ medium supplemented with $4\;g/{\ell}$ casein hydrolysate (CH), $20\;g/{\ell}$ sucrose and $30\;g/{\ell}$ sorbitol. The highest frequency of plant regeneration and somatic embryo formation was obtained from suspension cultured cells of 60 days. Addition of CH ($4\;g/{\ell}$) in suspension culture medium gave the highest frequency of embryo formation (39.6%) and plant regeneration (73.0%).
The effects of vitamin $D_{3}$ supplementation on bone mineral density and bone mineral content in ovariectmized rats were investigated. Forty female Sprague-Dawley rats (body weight 180 g) were divided into two group, ovariectomy and Sham groups, which were each randomly divided into two subgroups that were fed casein and casein supplemented with vitamin $D_{3}$ diets. Bone mineral density (BMD) and bone mineral content (BMC) were measured using PIXlmus (GE Lunar Co, Wisconsin, USA) in spine and femur on 6 weeks after feeding. Osteocalcin and urinary DPD crosslinks value were measured as markers of bone formation and resorption. The body weight gain and food efficiency ratio (FER) were higher in OVX groups than in Sham groups regardless of diets. Serum Ca concentration and urinary Ca excretion were higher in vitamin $D_{3}$ supplemented group than in casein group in Sham and OVX. Crosslinks values were higher in OVX groups than in Sham groups. Spine BMD and femur BMD of ovariectomy group were significantly lower than Sham groups, however vitamin $D_{3}$ supplemented groups were significantly higher than control groups in Sham and OVX. In conclusion, dietary vitamin $D_{3}$ supplementation on ovariectimized rats were significantly increased bone mineral density and bone mineral content in spine and femur.
Although beneficial effects of dietary plant proteins on lipid metabolism are well documented, not much information exists on the influence of different seafood proteins on the lipid metabolism. The present study evaluated the effect of 2 marine proteins (tuna protein and scallop ovary proteins) in comparison to casein and soy protein in male Wistar rats. The concentration of total lipids in the plasma of rats fed experimental diets was significantly lower from that of control (278.2 mg/dL) group (p<0.05); and, the liver lipid content was not significantly different (p>0.05). Fecal excretion of cholesterol and bile acids was significantly higher in marine proteins and soy protein fed groups compared to casein only fed control (6.1 and 6.4 mg/day, respectively) group (p<0.05). No significant differences were observed in the mRNA concentrations of different transcriptional factors (p>0.05).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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