The effect of hepatic injury produced by CCL, was studied on rats receiving a low protein-high carbohydrate (7% casein), standard protein (20% casein) and a high protein diet (30% casein). The rats fed low protein diet are resistant to CCl$_4$ in its effects on the liver as judged by histology, serum enzymes(guanase, ALT) and the content of hepatic protein. On the other hand, the pretreatment of hydrocortisone before injection of CCl$_4$ to the rats fed a standard diet, slightly decreased both serum ALT and guanase activities. In the pretreatment of actinomycin D, the liver and serum guanase activities were significantly decreased. It indicates that the cause of increasing serum guanase is based on the alteration of membrane permeability and the result of accelerated enzyme synthesis in liver cells of CCl$_4$ intoxicated rats.
A simplified model for the colloidal calcium phosphate (CCP) nanocluster was developed from an active role of phosphate in the precipitation of casein (CN)/Ca mixtures and the composition of casein micelles (CM). The possible shape of the CCP nanocluster was selected as a tetrahedron, and we estimated that 4 CN molecules were involved in crosslinking a single CCP nanocluster. Similar values were obtained for the number of CN molecules involved in stabilizing the nanocluster when the number of CNs attached onto each nanocluster surface was deduced from the composition of CM. If one phosphoserine cluster consisted of 3 phosphoserine residues, the theoretical molecular weight and volume for the nanocluster were estimated to be 4,898 g/mol and 2.88 $nm^3$, respectively. It was also shown that the position of Ca present in our model were reasonably located to accommodate the serine phosphate in CN molecule.
The human growth hormone (hGH) gene uder the control of the rat $\beta$-casein promoter gene was designed to produce transgenic mouse expressed hGH gene in only mammary gland. One hundred seventy two eggs microinjected were transferred to the oviducts of pseudopregnants and 43 offspring were delivered. By Southern blotting hybridization, 3 were transgenic with rat $\beta$-casein/hGH gene. The copy numbers of three transgenic founder were 1, 5, and 15, respectively. A radioimmunoassay was developed to quantitate the amount of expression of the hGH gene in mammary gland of transgenic mice. The amount of hGH was 13.3ng/ml in the lactating milk of one transgenic line, showing predominantly higher than 3.0ng/ml in milk of control mice. Therefore, our findings suggested that $\beta$-casein promoter may induce the tissue specific expression of structural gene.
본 연구는 동, 식물성 단백질 식이에 고콜레스테롤을 공급한 식이와 열수 추출한 녹차급여가 지질대사와 항산화계에 미치는 효과를 알아보고자 한국 사람들이 보통 전통차로 음용하는 조건인 $0.5\%$ 녹차열수 추출물을 동물성 단백질인 카제인,식품성 단백질인 대두 단백질과 고콜레스테롤을 체중이 약 180g이 되는 Sprague-Dawley종 수 컷 흰쥐에 공급하여 지방대사와 항산화계에 미치는 영향을 보고자하였다. 4주간 실험식이로 사육한 후 혈청지질성분과, 간의 지질성분, 간의 항산화 효소 활성과 과산화물인 TBARS의 양을 측정하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 체중증가량과 FER은 전반적으로 대두단백질 군보다 카제인 군이 높았고 카제인 군에서는 녹차열수추출물을 공급하였을 때 체중증가량과 FER이 유의적으로 감소하였다(P < 0.05). 식이섭취량은 유의적인 차이를 보이지 않았다. 2. 혈청 중의 총콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 농도는 전반적으로 대두단백질 군보다 카제인 군이 높았으나 카제인군의 LDL-콜레스테롤 농도만이 녹차열수추출물을 공급하엿을 때 유의하게 낮게 나타났다(P < 0.05). 3. 간의 중성지방 함량은 전반적으로 대두단백질 군보다 카제인 군이 높았으나 녹차열수추출물을 공급했을 때 대두단백질 군에서만 중성지방 함량이 유의하게 낮게 나타났다(P < 0.05). 4. 간의 항산화효소의 활성은 모든 군에서 유의한 차이가 없었으나 TBARS 함량은 녹차열수추출물을 공급했을 때 카제인 군에서만 유의하게 낮게 나타났다(P < 0.05). 이결과로 보면 식물성 단백질군 보다는 동물성 단백질군에 녹차 열수 추출물을 공급하였을 때 사료효율, 체중감소, 혈청 LDL-콜레스테롤과 간의 TBARS(thiovarbituric acid reactivesubstance) 생성을 낮추는 효과를 보여주었다. 간의 중성지방의 경우는 대두단백질 군에서만 녹차열수추물 공급에 따라 낮아지는 효과가 있었다(P < 0.05). 그러므로 녹차 열수 추출물이 지방대사와 항산화계에 미치는 영향은 식물성단백질 보다는 동물성 단백질이 공급된 식이에 건강에 바람직한 영향을 미치는 것으로 나타났다.
Glucocorticoid는 비유기 동물의 유선세포 pro-lactin receptor(PRL-R) 발현을 증가시키며, 전반적인 유선세포의 유합성 작용을 활성시킴으로 유합성 능력을 증진시킨다. 유선세포 PRL-R 발현량 증가는 유생산량 향상과 밀접한 관계를 갖는다. 본 실험은 비유중기의 재래산양의 유합성 능력을 향상시키고자, 0.05. 0.1과 0.2 g hydrocortisone을 5ml의 생리식염수에 현탁하여, 정맥투여하고 유선세포 PRL-R와 $\alpha$-유단백 질 mRNAs 발현 량을 조사하였다. 대조구로는 5$m\ell$의 생리식염수를 정맥투여 하였다. 24시간 후 유선조직을 채취하여 $\alpha$-유단백질과 PRL-R mRNA 발현량을 competitive PCR(polymerase chain reaction)로 발현량을 조사하였다. Hydrocortisone 처리 24시간 후 재래산양 유선세포의 PRL-R mRNA 발현량은 대조구의 PRL-R mRNA 발현량과 유의한 차이가 없었다. $\alpha$-유단백질 mRNA 발현은 대조구에 비하여 0.05g hydrocortisone투여구는 37%, 0.1g hydrocortisone 투여구는 630%, 0.2g hydrocortisone 투여구는 386% 증가하였다. Hydrocortison 처리에 의한 유선세포 PRL-R mRNA 발현에 변화가 없었으나 $\alpha$-유단백질 mRNA 발현 증가는 세포 내 기능성 단백질 발현과 세포 외부로 분비되는 단백질의 시간에 따른 발현양상의 차이인 것으로 사려된다. 본 연구에서 비유중기 재래산양에 hydrocortisone 투여는 $\alpha$-유단백질 mRNA 발현을 증가시키는 것으로 나타났다.
본 연구는 안전성 확보차원에서 식품분야에 활용성이 증가하고 있는 감마선 조사처리가 유제품의 항원성 저감에도 효과가 있음을 보이기 위해 수행되었다. 모세관전기영동 결과 ${\alpha}_{S1}$-케이신과 ${\beta}_{A1}$-케이신이 ${\alpha}_{S0}$-케이신과 ${\beta}_{A2}$-케이신보다 상대적으로 많이 분해되었음을 확인하였다. cELISA를 이용한 in vitro 시험 결과와 기니픽을 이용한 수동피부아나필랙시스(Passive cutaneous anaphylaxis) 반응을 통해 10 kGy의 감마선 조사에서 뚜렷한 항원성 저감을 확인하였다. 이상의 결과는 감마선 조사가 우유 단백질의 항원, 특히 ${\alpha}_{S1}$-케이신과 ${\beta}_{A1}$-케이신의 구조를 변화시켜 항원성을 감소시키는 것으로 판단되며, 따라서 감마선 조사는 알레르기 유발 식품의 항원성 감소에 유용한 기술로 생각된다.
성장기 수컷 흰쥐를 대상으로 콩단백질과 콩의 isoflavones의 함량이 골밀도 및 골함량에 미치는 효과를 알아본 결과는 아래와 같다. 1) 식이 효율은 대조군인 casein군에 비하여 콩단백질군이 낮았다. 2) 단백질의 종류나 isoflavones의 유무에 따른 혈 중이나 뇨 중 Ca과 P의 함량에는 유의적인 차이가 없었다. 3) 체중 당 총골밀도는 두 군의 콩단백질군이 대조군 보다 높았고, 콩단백질 내에서는 isoflavones를 함유한 군이 더 높았다. 4) 체중 당 spine의 골밀도나 골함량은 두 군의 콩단백질군이 대조군 보다 높았고, 콩단백질 내에서는 골밀도는 isoflavones를 함유한 군이 유의적으로 더 높았다. 5) 체중 당 femur의 골밀도는 콩단백질군이 대조군 보다 높았고, 콩단백질 내에서는 isoflavones를 함유한 군이 더 높았으나 통계적 유의성은 없었다. 결론적으로 콩단백질은 체중당 총골함량이나 칼슘함량에 있어서 동물성 단백질인 casein 보다 유익하였고 특히 isoflavones를 함유한 콩단백질은 체중당 총골밀도와 spine 골밀도에서 isoflavones 함량이 낮은 콩단백질에 비하여 더 유익하여 콩단백질과 isoflavones은 성장기 수컷 흰쥐에서 골밀도 향상에 유익함을 확인하였다. 따라서 성장기에 콩의 섭취는 casein 단백질에 비하여 골밀도나 골함량을 높이는데 유익하며 특히 isoflavones를 함유한 콩의 섭취는 골밀도를 높이는데 더욱 유익하다고 사료된다.
상업적 단백질 분해 효소에 0.02% $CaCl_2$를 첨가하여 응유 활성화를 시킨 탈지유에 대한 분해 작용의 결과를 요약하면 다음과 같다. 다양한 효소별 가수분해 시간에 따른 가수분해도는 미생물 유래 효소와 trypsin은 pepsin과 papain W-40보다 높은 분해도를 나타냈다. 12% TCA 용액에 가용성인 NPN의 양은 trypsin이 가장 높은 분해도를 나타내었고 rennet과 pepsin이 가장 낮은 분해도를 보였다. 전기영동에 있어서 trypsin과 protease S는 $\alpha$- lactalbumin을 분해하였고 papain w-40은 $\beta$- lactoglobulin을 미약하게 분해하였으며 neutrase 1.5는 90분 이후부터 $\alpha$-lactalbumin과 $\beta$-lactoglobulin을 분해하였다. Rennet과 비교한 전기영동상에서는 rennet에 의해 분해 되지 않은 ${\alpha}_s$- casein과 $\beta$-casein을 trypsin과 protease S가 다량 분해하였고 $\kappa$-casein은 rennet에 비해 papain W-40이 상당 수준의 분해상을 나타내었다. 이상의 결과 가수분해도 및 NPN 양은 trypsin, neutrase 1.5 및 protease S가 다른 효소에 비해 높게 나타났으며, 전기영동상에서는 pepsin과 neutrase 1.5가 rennet과 유사한 경향을 나타내었다.
우유 casein단백질을 trypsin, alcalase, neutrase, protamax, S. aureus type V8 등의 단백질분해효소를 이용하여 가수분해시키고 생성된 peptide의 철분가용화능을 측정하였을 때, trypsin과 alcalase에 의해 생성된 peptide들이 pH 6의 조건에서 각각 6.42와 $2.37\;{\mu}g/mL$를 가용화시키는 능력을 보였으며 그외의 protease들은 $1\;{\mu}g/mL$내외의 철분가용화능을 보였다. Trypsin과 alcalase에 의해 생성된 peptide를 역상 column으로 10개의 분획으로 나누어서 각각의 분획의 pH6에서의 철분가용화능을 측정한 결과, trypsin의 경우 분획 5에서 가장 높은 철분가용화능$(2.33\;{\mu}g/mL)$이 발견되었으며 alcalase의 경우에는 분획 7이 가장 높은 철분가용화능$(1.56\;{\mu}g/mL)$을 보였다. 이들 철분과 결합력이 있는 peptide를 분리하기 위하여 IMAC의 방법을 이용하여 철분을 chelating sepharose fast flow column에 고정화 시키고 이들 철분에 흡착하는 peptide의 분리를 시도한 결과, trypsin이나 alcalase에 의해 생성된 peptide중 철분을 가용화시키는 능력이 높은 peptide들이 IMAC에 의해 효과적으로 분리되었다.
대표적인 단백질 물질인 bovine serum albumin(BSA), lysozyme, pepsin, casein 그리고 ovalbumin의 이성분계 단백질 혼합물의 미세 분리 막에서 보이는 막 오염 현상에 관한 실험을 고찰하였다. 트랙 에치법에 의해 제조된 $0.2{\mu}m$ 폴리카보네이트 미세 막을 이용하여 단백질 혼합물 용액의 조성과 종류가 여과유량감속에 미치는 영향에 대한 실험을 일정한 압력(14 kPa)과 수소이온농도(pH=11) 하에서 수행하였다. 각각의 이성분 단백질 혼합물에 대한 막오염 현상을 확인하였으며, 유량 감속 데이터는 최근에 개발된 pore blockage-cake formation 모델을 이용하여 분석한 결과, 실험 결과와 일치하였다. 이성분계 단백질 혼합물의 조성과 단백질 종류가 막오염 및 유속변화에 미치는 영향은 공극막힘속도(${\alpha}$), 단백질 침적층의 초기 저항($R_{po}$) 및 단백질 저항의 증가속도(${\beta}$)에 의해 설명 할 수 있었다. 대체로 공극막힘속도의 변화는 유속감소현상과 일치함을 알 수 있으며, 특히 casein이 존재하는 단백질 혼합물에서의 급격한 유량감속은 casein에 의한 단백질 침적층의 초기저항에 크게 기인된 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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