The effects of nutrients and cell aggregate size on the cell growth of D. carota and the biosynthesi of carotenoid were investigated. Highest carotenoid content was obtained with sucrose as a carbon source and the equal ratio of ammonium to nitrate. High phosphate concentration stimulated the carotenoid biosynthesis in D. corota. 2,4-D inhibited the cell growth but stimulated the specific carotenoid content at high concentration. By modifying the medium composition based on these findings, three times higher specific carotenoid content and 2.5 times higher total carotenoid content were obtained as compared with the results obtained with basic MS media. Biosynthesis of carotenoid was found to be affected by cell aggregate size; high carotenoid production was obtained from the large aggregated cells resulted from high sucrose concentration.
Unicellular green algae of the genus Haematococcus have been studied extensively as model organisms for secondary carotenoid accumulation. Upon environmental stress, such as strong irradiance or nitrogen deficiency, unicellular green algae of the genus Haematococcus accumulate secondary carotenoids in vesicles in the cytosol. Because secondary carotenoid accumulation occurs only upon specific environmental stimuli, there is speculation about the regulation of the biosynthetic pathway specific for secondary carotenogenesis. Because the carotenoid biosynthesis pathway is located both in the chloroplast and the cytosol, communication between both cellular compartments must be considered. Recently, the induction and regulation of astaxanthin biosynthesis in microalgae received considerable attention because of the increasing use of this secondary carotenoid as a source of pigmentation for fish aquaculture, as a component in cancer prevention, and as a free-radical quencher. This review summarizes the biosynthesis and regulation of the pathway, as well as the biotechnology of astaxanthin production in Haematococcus.
In this study, we attempted to understand signaling pathways behind lipid biosynthesis by employing a chemical genetics approach based on small molecule inhibitors. Specific signaling inhibitors of MAP kinase or modulators of cAMP signaling were selected to evaluate the functional roles of each of the key signaling pathways in three different microalgal species: Chlamydomonas reinhardtii, Chlorella vulgaris, and Haematococcus pluvialis. Our results clearly indicate that cAMP signaling pathways are indeed positively associated with microalgal lipid biosynthesis. In contrast, MAP kinase pathways in three microalgal species are all negatively implicated in both lipid and carotenoid biosynthesis.
Ha, Sun-Hwa;Lee, Shin-Woo;Kim, Jong-Guk;Hwang, Young-Soo
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.42
no.2
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pp.92-96
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1999
To study the regulatory mechanism of isoprenoid (carotenoid) biosynthesis, we have compared the expression patterns of nine isoprenoid biosynthetic genes in Korean red pepper (Capsicum. annuum cv. NocKaung). The expression of geranylgeranyl pyrophosphate synthase gene was initially induced at early ripening stage (I1) and was rather slightly decreased during pepper fruit ripening. The ex-pression of phytoene synthase gene was strongly induced at semi-ripening stage (I2) and the phytoene desaturase transcript was maximally induced at the fully ripened stage (R). Our results suggest that genes encoding two 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase isozymes (HMGR1 and HMGR2) and farnesyl pyrophosphate synthase might be not so critical in pepper carotenoid biosynthesis but three genes encoding geranylgeranyl pyrophosphate synthase, phytoene synthase and phytoene desaturase were induced in a sequential manner and coordinately regulated during the ripening of pepper fruit.
Choi, Ahyoung;Chung, Eu Jin;Nam, Young Ho;Choi, Gang-Guk
Korean Journal of Microbiology
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v.53
no.4
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pp.347-350
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2017
We sequenced the genome of the Sphingobacteriaceae bacterium SH-48 isolated from the Sohan stream in Republic of Korea by using a dilution-to-extinction culturing method. The sequences were assembled into a draft genome containing 5,650,162 bp with a G + C content of 35.4% and 4,856 protein-coding genes in 2 contigs. This strain contains the carotenoid biosynthesis genes crtY, crtZ, crtD, crtI, crtB, and crtH as gene clusters. This genomic information provides new insights into the carotenoid biosynthesis pathway.
Jegadeesh Raman;Young-Joon Ko;Jeong-Seon Kim;Da-Hye Kim;Soo-Jin Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.34
no.3
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pp.710-724
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2024
Flavobacterium can synthesize xanthophyll, particularly the pigment zeaxanthin, which has significant economic value in nutrition and pharmaceuticals. Recently, the use of carotenoid biosynthesis by bacteria and yeast fermentation technology has shown to be very efficient and offers significant advantages in large-scale production, cost-effectiveness, and safety. In the present study, JSWR-1 strain capable of producing xanthophyll pigment was isolated from a freshwater reservoir in Wanju-gun, Republic of Korea. Based on the morphological, physiological, and molecular characteristics, JSWR-1 classified as belonging to the Flavobacterium species. The bacterium is strictly aerobic, Gram-negative, rod-shaped, and psychrophilic. The completed genome sequence of the strain Flavobacterium sp. JSWR-1 is predicted to be a single circular 3,425,829-bp chromosome with a G+C content of 35.2% and 2,941 protein-coding genes. The optimization of carotenoid production was achieved by small-scale cultivation, resulting in zeaxanthin being identified as the predominant carotenoid pigment. The enhancement of zeaxanthin biosynthesis by applying different light-irradiation, variations in pH and temperature, and adding carbon and nitrogen supplies to the growth medium. A significant increase in intracellular zeaxanthin concentrations was also recorded during fed-batch fermentation achieving a maximum of 16.69 ± 0.71 mg/l, corresponding to a product yield of 4.05 ± 0.15 mg zeaxanthin per gram cell dry weight. Batch and fed-batch culture extracts exhibit significant antioxidant activity. The results demonstrated that the JSWR-1 strain can potentially serve as a source for zeaxanthin biosynthesis.
Ramos, Ana A.;Polle, Jurgen;Tran, Duc;Cushman, John C.;Jin, Eon-Seon;Varela, Joao C.
ALGAE
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v.26
no.1
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pp.3-20
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2011
The physiology of the unicellular green alga Dunaliella salina in response to abiotic stress has been studied for several decades. Early D. salina research focused on its remarkable salinity tolerance and ability, upon exposure to various abiotic stresses, to accumulate high concentrations of $\beta$-carotene and other carotenoid pigments valued highly as nutraceuticals. The simple life cycle and growth requirements of D. salina make this organism one of the large-scale commercially exploited microalgae for natural carotenoids. Recent advances in genomics and proteomics now allow investigation of abiotic stress responses at the molecular level. Detailed knowledge of isoprenoid biosynthesis mechanisms and the development of molecular tools and techniques for D. salina will allow the improvement of physiological characteristics of algal strains and the use of transgenic algae in bioreactors. Here we review D. salina isoprenoid and carotenoid biosynthesis regulation, and also the biotechnological and genetic transformation procedures developed for this alga that set the stage for its future use as a production system.
Seo, Yong Bae;Choi, Seong Seok;Nam, Soo-Wan;Kim, Gun-Do
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.45
no.3
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pp.226-235
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2017
Carotenoids such as phytoene, lycopene, and ${\beta}-carotene$ are used as food colorants, animal feed supplements, and for human nutrition and cosmetic purposes. Previously, we reported the isolation of a novel marine bacterium, Kocuria gwangalliensis, which produces a pink-orange pigment. Phytoene desaturase (CrtI), encoded by the gene crtI, catalyzes lycopene formation from phytoene and is an essential enzyme in the early steps of carotenoid biosynthesis. CrtI is one of the key enzymes regulating carotenoid biosynthesis and has been implicated as a rate-limiting enzyme of the pathway in various carotenoid synthesizing organisms. Here, we report the cloning of the crtI gene responsible for lycopene biosynthesis from K. gwangalliensis. The gene consisted of 1,584 bases encoding 527 amino acid residues. The nucleotide sequence of the crtI gene was compared with that of other species, including Kocuria rhizophila and Myxococcus xanthus, and was found to be well conserved during evolution. An expression plasmid containing the crtI gene was constructed (pCcrt1), and Escherichia coli cells were transformed with this plasmid to produce a recombinant protein of approximately 57 kDa, corresponding to the molecular weight of phytoene desaturase. Lycopene biosynthesis was confirmed when the plasmid pCcrtI was co-transformed into E. coli containing the plasmid pRScrtEB carrying the crtE and crtB genes required for lycopene biosynthesis. The results from this study will provide valuable information on the primary structure of K. gwangalliensis CrtI at the molecular level.
Lilium ${\times}$ formolongi was genetically engineered by Agrobacterium-mediated transformation with the plasmid pCrtZW-N8idi-crtEBIY, which contains seven enzyme genes under the regulation of the CaMV 35S promoter. In the transformants, ketocarotenoids were detected in both calli and leaves, which showed a strong orange color. In transgenic calli, the total amount of carotenoids [133.3 ${\mu}g/g$ fresh weight (FW)] was 26.1-fold higher than in wild-type calli. The chlorophyll content and photosynthetic efficiency in transgenic orange plantlets were significantly lowered; however, after several months of subculture, they had turned into plantlets with green leaves that showed significant increases in chlorophyll and photosynthetic efficiency. The total carotenoid contents in leaves of transgenic orange and green plantlets were quantified at 102.9 and 135.2 ${\mu}g/g$ FW, respectively, corresponding to 5.6- and 7.4-fold increases over the levels in the wild-type. Ketocarotenoids such as echinenone, canthaxanthin, 3'-hydroxyechinenone, 3-hydroxyechinenone, and astaxanthin were detected in both transgenic calli and orange leaves. A significant change in the type and composition of ketocarotenoids was observed during the transition from orange transgenic plantlets to green plantlets. Although 3'-hydroxyechinenone, 3-hydroxyechinenone, astaxanthin, and adonirubin were absent, and echinenone and canthaxanthin were present at lower levels, interestingly, the upregulation of carotenoid biosynthesis led to an increase in the total carotenoid concentration (+31.4%) in leaves of the transgenic green plantlets.
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