In vitro organogenesis system of the valuable ornamental species, Prunus yedoensis which is native to Korea, was established through callus culture derived from root tissues. Callus were induced on the medium supplemented with 2,4-D and BA or NAA and kinetin. Organogenesis was differ from the callus type, and NAA and kinetin combination was effective to induce organogenic callus. Growth of callus was influenced by sucrose concentrations. High level of sucrose (over 5%) had adverse effects such as decreased fresh weight and increased mortality of callus. Shoots developed from the callus when $GA_3$ was treated with BA in the medium. Results showed that $GA_3$ is essential for shoot development and elongation from callus in this species.
Effects of growth regulators and medium components were tested for shoot multiplication and callus growth from shoot explants of black locust. During shoot multiplication, callus growth at the cut end of shoot explants proceeded shoot development. The basal callus growth seemed to be a function of both mineral components and cytokinin supplemented in the medium. Maximum callus growth was induced by 0.5${\mu}$M BAP and the callus growth decreased as the level of BAP increased. Positive correlations were found between basal callus growth, and shoot multiplication and growth. Shoot multiplication was greatest on BSM medium (black locust shoot culture medium) supplemented with 1 $\mu$M BAP. With medium containing high nitrogen content, both shoot multiplication and growth were significantly enhanced. A new BRM medium was the most effective for rooting of black locust among three rooting media tested.
The development of a protocol for high efficiency of embryogenic callus separation, maintenance and plant regeneration from the seeds of zoysiagrass cv. Zenith was studied. Embryogenic callus ratio is absolutely determined by genotype, but by adding high concentration of copper into medium, changing light condition and maintaining callus on initial induction medium for 8∼10 weeks, embryogenic callus can be easily distinguished and its growth can be promoted. There were significant differences among selected callus lines (each from one seed) according to their growth rates and regeneration percentages. Callus pre-treatment with activated charcoal inhibited callus growth, increased the level of precocious germination during culture and promoted shoot cluster formation after transfer to regeneration medium. For long-term callus maintenance, N6AA medium was better than MS medium, because the former inhibited non-embryogenic callus formation and kept vigor of embryogenic callus. The best callus lines Z-(5) has been successfully used for transformation and somaclonal variation selection in our laboratory.
The ability to form embryiod from callus in satsuma mandarin is low and unstable. In this study, the conditions of embryogenic calli induced from nucellar tissue for promotion of plant regeneration in satsuma mandarin were investigated. The calli of I, II and III line were divided into two sizes of 0.5 mm and 1.0 mm in diameter and two weight gradients of percoll at 40% and 50% though the filter mesh. The frequency of embryo formation from $\phi$ 1.0mm-40% was slightly higher than callus that from others. Adventitious embryoids developed to a globular stage were transferred to regeneration medium. In 'Miyagawa Wase', the embryos from I and II line developed into a heart stage from most of $\phi$ 0.5 mm- 40% and $\phi$1.0 mm-40% calli, but it failed in 'Sugiyama Unshu'. In the cultivar of 'Miyagawa Wase', 63% of adventitious embryos transferred to the regeneration medium developed into the heart stage from the most $\phi$ 1.0 mm-40% calli of I line, but of 'Sugiyama Unshu' failed in some calli condition. The embryoids from two callus lines developed further to shoots and plantlets, while the embriods from III line abnormal failed to regenerate in the cultivar. From these results, it is suggested that the plant regeneration from embryogenic callus in satsuma mandarin could be affected by callus conditions.
The activities of auxins and cytokinins have been examined in the growth of callus tissue derived from Phaseolus vulgaris L. cv. Damyang. The synthetic auxin, picloram was the most effective in promoting callus growth and the range of effective concentrations (0.1$\mu{M}$ to 32$\mu{M}$) was broad. 2, 4-D also enhanced callus growth at the optimal concentration of 3.2$\mu{M}$. NAA promoted callus growth at relatively higher concentrations than other auxins tested. IAA was less effective in supporting callus growth. Cytokinin bearing saturated side chain ($N^6$-isopentyladenine) was approximately 30 times more active than the corresponding unsaturated compound, $N^6$-($\D^2$-isopentenyl) adenine. The abilities of cytokinin-autonomous growth were also examined. Callus tissues previously grown on concentrations lower and/or higher than optimal concentrations of cytokinins were better habituated in the subsequent passage. It was suggested that the development of cytokinin autonomy may be related to dosage-concentrations of cytokinin in the previous passage.
야생 흰제비꽃의 엽병 유래 callus를 장기 계대배양하는 과정 중에 발생하는 순화된 friable callus와 분화능이 높은 compact callus를 비교 관찰한 바, friable callus는 연초록색으로 부서지기 쉬운 부드러운 callus이고, compact callus는 진녹색으로 단단한 callus였다. 동결처리 한 시료를 주사전자 현미경에서 동일하게 200배로 관찰하여 보면, friable callus 는 작은 세포집단으로 이루어진 세포군의 주변부에 고도로 액포화된 세포가 광범위하게 분포되어 있는 반면, compact callus는 거의 균일한 세포들로 구성되어 세포구성이 치밀한 것으로 관찰되었다. 또한 friable callus와 compact callus로 부터의 체세포배형성은 배양세포에서 배가 발생하여 배양기간이 지남에 따라 식물체로 분화하였다. 이와 같은 과정은 배양세포의 세포질이 보다 충만한 부위에서 배유사체 (embryo like body)의 발생이 이루어지는 것으로 관찰되었다.
Teff grass is a warm season C4 annual grass that is used for dry hay, silage and haylage. We have developed a high-frequency plant regeneration system for teff grass via callus culture using mature seeds. It was revealed that mature seeds cultured on MS medium supplemented with 2 mg/l 2,4-D, 0.5 g/L proline, 0.5 g/L casamino acid and 3 g/L Gelrite under light condition produced the highest percentage of callus formation (91.9%). Addition of cytokinins (BA) at 0.0~0.5 mg/L to media containing 2 mg/l 2,4-D enhanced callus growth. The most suitable medium for plant regeneration from dehydrated calli was MS agar medium supplemented with 0.1 mg/l NAA, 1 mg/l BA, 0.5 g/L proline, 0.5 g/L casamino acid 3 g/L Gelrite which induced the highest percentage of calli forming shoots (47.0%). The shoots were rooted at the highest rate (100%) when transferred onto 1/2 MS medium and acclimated in greenhouse conditions.
The callus from the hypocotyl region of immature embryo of Citrus junos Sieb. was efficiently induced in the $\frac{1}{2}$ MS medium containing 45uM BA after 8 weeks culture. The callus was developed into the two callus type, embryogenic callus and nonembryogenic callus, which can be distinguished by visual examination depending on color and appearence. In vitro regeneration of callus established efficiently in the hormone-free MS medium from the embryogenic callus. In order to investigate the physiological changes depending on the developmental stage of embryo, the embryo was formed in the MS medium. The embryogenic and nonembryogenic callus, and the various stages of the somatic embryo were examimed the changes of esterase activity, and their isozyme patterns as well. The protein content and esterase activities was gradually increased on the developmental stages of embryo. Total protein pattern were different by the SDS-PAGE and were appeared strong band of 23 KD in the torpedo stage. The pattern of the esterase isozyme was exhibited a difference between embryogenic callus and nonembryogenic callus. It was appered pI 6.0, 8.0, 8.2 in the embryogenic callus. Also the new band of pI 4.75 was appeared in the cotyledon. These results suggest that the changes of esterase activities and isozyme patterns are importent factor in the differentiation and development of citrus.
녹두 유식물체 줄기를 조직배양하여 캘러스조직을 형성하였고 이로부터 부정아 형성을 유도한 다음, 캘러스 조직과 부정아 분화에 대한 기원을 조직해부학적으로 연구하였다. 녹두 줄기절편으로부터 캘러스조직의 유도는 0.5 mg/L 2,4-D와 1.0 mg/L kinetin이 첨가된 MS배지가 효과적이었고, 캘러스로부터의 부정아 분화에는 0.75 mg/L NAA와 1.5 mg/L kinetin이 첨가된 MS배지가 매우 효과적이어서 약 21%의 기관형성율을 나타내었다. 캘러스 조직을 조직 학적으로 관찰한 결과, 캘러스조직은 유관속 형성층 외측에 새롭게 형성된 분열능력이 있는 캘러스 형성층환인_바깥쪽으로 생장을 함으로써 유도되었다. 부정아는 캘러스 조직의 외부 표면부위에서 기원된 부정아 정단분열조직으로부터 발생되었다. 부정아 정단분열조직은 엽원기를 형성하여 나중에 잎이 발생되었다.
Peppermint (Mentha piperita L.) belongs to a member of the mint family (Lamiaceae) and is widely used in food, cosmetics and medicines. This study was carried to investigate the variation of essential oil content and its composition during callus subculture of M. piperita. For callus induction from the leaf explant of peppermint, the basal medium was supplemented with various concentrations of 2, 4-D. The best callus induction rate (93%) of M. piperita. was obtained in MS medium containing 2 mg/l 2, 4-D. The induced peppermint callus maintained on Lin-Staba medium were studied during a period of 20th subcultures for the stability of essential oil production. Growth rates of peppermint callus increased during prolonged subculture. However, there was a progressive decrease of essential oil content and unstability of monoterpene productions when callus cultures were serially subcultured.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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