• 제목/요약/키워드: cELISA

검색결과 678건 처리시간 0.025초

유아용 조제분유 내 Cronobacter muytjensii 검지를 위한 간접 비경합 면역분석법의 개발 (Development of an Indirect Non-Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for the Detection of Cronobacter muytjensii in Infant Formula Powder)

  • 송신지에;김명희
    • 한국식품영양학회지
    • /
    • 제26권4호
    • /
    • pp.936-944
    • /
    • 2013
  • Cronobacter muytjensii는 유아용 조제분유(IFP)의 잠재적 위험요인으로 중요한 식품 기인성 병원균이다. 이 연구에서는 C. muytjensii 검지를 위한 특이적 면역글로불린 G(IgG)를 개발하고, 이 anti-C. muytjensii IgG를 이용하여 간접 비경쟁 효소면역측정법(INC-ELISA)을 개발하였다. 그 결과, 새롭게 개발한 INC-ELISA 방법은 C. muytjensii에 매우 민감하고, 순수배양 시 $6.5{\times}10^3CFU/ml$의 검출한계와 유아용 조제분유에서 1 cell/25 g의 검출한계를 나타내었다. INC-ELISA 방법은 또한 C. muytjensii에 탁월한 특이성을 보이고, Cronobacter 속 외 11종의 다른 식품 기인성 병원균 계통과의 교차반응을 보이지 않았다. 이러한 결과는, 개발된 INC-ELISA 방법이 C. muytjensii에 매우 민감하고 효율적이며, 신속하고 용이한 검출을 위한 진단 키트 개발에 적용할 수 있음을 시사한다.

ELISA법에 의한 zearalenone 생성균주의 검색 (Screening of zearalenone-producing strains by ELISA method)

  • 김성영;정선희;정덕화
    • Applied Biological Chemistry
    • /
    • 제36권1호
    • /
    • pp.7-10
    • /
    • 1993
  • ELISA법을 zearalenone 생성균주 검색에 응용하였다. 먼저 zearalenone에 대한 항체를 500배 희석한 후 microtiter well에 $125\;{\mu}l$씩 주입하여 $40^{\circ}C$에서 overnight시켜 coating하고, 시료용액과 enzyme을 $37^{\circ}C$에서 30분간 반응시켰다. 배양후 washing buffer로 6회 세척한 다음 plate에 2,2'-azino-di-3-ethyl-benzthiazoline sulfonic acid(ABTS) 용액을 $100\;{\mu}l$씩 첨가하여 15분간 발색시킨 다음 반응 정지액 $100\;{\mu}l$씩을 가해 반응을 정지시키고 ELISA Reader로서 흡광도(410 nm)를 측정하였다. 그 결과 zearalenone 생성이 확인된 19 균주 중 분리균 R-5, C-46 및 S-134가 50 ng/ml 이상의 zearalenone을 생성하였다.

  • PDF

우백혈병(牛白血病) Virus 항체측정(抗体測定)을 위한 효소면역법(酵素免疫法) (Microplate Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Bovine Virus Antibody)

  • 최원필
    • Current Research on Agriculture and Life Sciences
    • /
    • 제1권
    • /
    • pp.195-199
    • /
    • 1983
  • 우백혈청(牛白血病)virus에 대한 혈청항체의 측정(測定)을 위한 간접효소면역법(間接酵素免疫法)(ELISA)의 확립(確立) 및 ELISA법(法)의 감도(感度)를 알기 위하여 한천(寒天) gel 면역확산법(免疫擴散法)(ID)과 비교검토(比較檢討)하였으며 한우(韓牛), 유우(乳牛) 및 육우(肉牛)등 264두(頭)의 혈청(血淸)을 공시(供試)하였다. 혈청(血淸)을 가(加)하지 않은 공(孔)의 흡광치(吸光値)(C)로서 혈청치(血淸値)를 제(除)한 후, 표준(標準)BLV항체흡성혈청치(N)로서 피검혈청치(被檢血淸値)(T)를 나눈치(値)(T-C/N-C)가 1.5이상(以上)인 것을 BLV항체 양성(陽性)으로 하였을 때 gp-ID의 성적(成績)과 98.5%(259/263)가 일치(一致)되었다. gp-ID 향성혈청(陽性血淸) 145예(例)중 144예(例)가 ELISA 양성(陽性)으로 99.6%, gp-ID 음성혈청(陰性血淸) 118예(例)중 115예(例)가 ELISA음성(陰性)으로 97.5%가 일치(一致)되었다. 이상에서와 같이 gp-ID용(用)의 BLV 항원(抗原)을 사용한 ELISA법(法)을 gp-ID와 동등(同等) 또는 더 감도(感度)가 우수한 BLV의 혈청항체측정법 임이 입증되었으며 실용성(實用性)이 충분(充分)하다고 사료(思料)된다.

  • PDF

넙치 혈청의 보존 조건이 ELISA 결과에 미치는 영향 (Effect of storage conditions of olive flounder Paralichthys olivaceus serum on enzyme-linked immunosorbent assay)

  • 김위식;장민석;김종오;김두운;정성주;김석렬;박명애;오명주
    • 한국어병학회지
    • /
    • 제22권2호
    • /
    • pp.167-172
    • /
    • 2009
  • 본 연구에서는 넙치 혈청의 보존 조건이 ELISA 결과에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 항 BSA 넙치 혈청을 이용해 보존 온도, 보존 기간 및 해동 횟수에 따른 ELISA값을 비교하였다. 넙치 혈청을 보존 온도 (-80, -20, 4 및 20${^{\circ}C}$) 및 기간 (1, 30, 69 및 124일)에 따른 ELISA OD 값을 비교한 결과, 모든 시료에서 뚜렷한 OD값의 차이는 확인되지 않았다. -80℃ 및 -20${^{\circ}C}$에 보존된 혈청을 사용하여 해동횟수 (1, 5, 10회)에 따른 ELISA OD값을 비교한 결과, 해동을 반복한 혈청 및 미동결 혈청의 OD값은 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. 이상의 결과로 넙치 혈청은 -80, -20, 4 및 20${^{\circ}C}$에서 124일간 보존하거나 혈청을 10회 반복 해동하여도 ELISA 결과에 영향을 끼치지 않는 것이 확인되었다.

돼지 brucellosis에 대한 항체가 조사 (Serosurvey for antibodies against brucellosis in pigs)

  • 허진;백병걸
    • 한국동물위생학회지
    • /
    • 제34권2호
    • /
    • pp.153-157
    • /
    • 2011
  • In order to investigate serum antibodies for detection of brucellosis in pigs, a total of 1208 sera were tested by Rose Bengal test (RBT), the standard tube agglutination test (STAT) and competitive ELISA (cELISA). The sera were collected from pigs of Gyeonggi, Chungnam, Chungbuk, Jeonnam and Jeonbuk, provinces during the period 2002 to 2004. All the sera were screened by RBT, and were confirmed by STAT and cELISA. Among 1208 sera, 26 sera (2.2%) were positive in screening test. All the 26 positive sera were positive by STAT, while all the sera were negative by cELISA. On the basis of this study, farmed pigs may be exposed to Brucella species. Furthermore, these results suggest that establishment of diagnoses for detection of porcine brucellosis is necessary.

농가 생산성 증대를 위한 육계 초생추 질병 실태조사 (A survey on diseases to improve productivity in 1-day-old chicks of broiler farms)

  • 고원석;엄성심;조범준;;이병종;이성효;배정준
    • 한국동물위생학회지
    • /
    • 제30권3호
    • /
    • pp.329-338
    • /
    • 2007
  • Samples collected from 15 broiler farms(47 flocks, 920 1-day-old chicks) during March to December, 2006, To survey serum antibody titers of NDV, IBDV and MG/MS, the antibodies of ND viruses were detected by HI test and ELISA, against antibodies of IBD viruses and MG/MS by ELISA. The antibody titers of NDV showed 6.4, HI and 6,968, ELISA, respectively. The rate to below protective antibody levels(${\ge}5$, HI and ${\ge}1,000$, ELISA) were 8%, HI, 5%, ELISA, specially, Baeksemi were 22%, HI, 14%, ELISA. The rate of positive by ELISA showed 99%(914/920). The ELISA titer of IBDV showed mean titer 3,890. The rate of positive were 93% (857/920), specially, Baeksemi were 84%. The ELISA titers of MG/MS showed mean titer 5,666. The rate of positive were 78% (715/920) and 100%, Abor-Acre, 97%, Baeksemi, respectively. The antibodies not detected from 18%, ELISA titers was varied from 500 to 20,000. At antimicrobial susceptibility of E coli, Staphylococcus spp and Salmonella spp isolated from 1-day-old chicks, E coli were susceptible to AmC, AM, NOR, SXT, ENR, CIP, Staphylococcus spp were susceptible to AmC, SXT, AM, ENR and Salmonella spp were susceptible to AM, AmC, SXT and P.

가공식품 중 돈육 검출을 위한 샌드위치 ELISA 개발 (Development of Sandwich ELISA for the Detection of Pork in Processed Foods)

  • 백수연;도정룡;손동화
    • 한국식품과학회지
    • /
    • 제47권3호
    • /
    • pp.401-404
    • /
    • 2015
  • 가공식품 중 돈육의 검출을 위한 샌드위치 ELISA (sELISA)의 조건을 확립하기 위해 항돼지IgG 항체(goat anti-pig IgG antibody)를 이용하였다. 이때, 돈육의 검출범위는 $3-1,000ppm({\mu}g/mL)$이며, 검출한계는 2 ppm이었다. 특이항체의 교차반응 결과, 돼지IgG에 대한 반응성을 100%로 하였을 때, 돈육에 대한 반응성은 0.18%로 나타났으나, 여타의 식품원료에 대하여 반응하지 않았다. 열처리한 돈육에 대한 항체의 반응성은 $70^{\circ}C$까지는 32% 이상으로 양호하였으나 $80^{\circ}C$ 이상에서는 0.11% 이하로 반응성 급격히 감소하였다. 크림스프, 이유식, 어묵, 소스에 대한 spike test에서 돈육의 분석회수율은 각각 8.8, 45, 36, 39%로 나타났다. sELISA에 의하여 12점의 시판 가공식품 시료 중 돈육의 함유 유무를 조사한 결과, 정성적으로 원료의 표시사항과 100% 일치하였다.

Canine brucellosis 검출을 위한 ELISA 진단법 확립 (Development of ELISA for detection of canine brucellosis)

  • 허진;백병걸
    • 한국동물위생학회지
    • /
    • 제34권2호
    • /
    • pp.159-166
    • /
    • 2011
  • This study was carried out to develope enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of canine brucellosis in dogs experimentally inoculated with Brucella abortus 1119-3 and B. canis RM666. Groups A, B and C of dogs (each group consisting of three dogs) were orally inoculated with approximately $5{\times}10^9$ colony-forming units of B. abortus and B. canis, and with sterile pyrogen-free PBS, respectively. The animals were monitored at regular intervals upto the 12th week post inoculation (PI) by standard tube agglutination test (STAT), plate agglutination test (PAT), Rose Bengal test (RBT), 2-mercaptoethanol rapid slide agglutination test (2ME-RSAT) and ELISA. The induced antibody titers in group A dogs were detected from the first week PI to the eighth week PI in STAT, PAT and RBT using the inactivated whole cells of B. abortus 1119-3 as antigens, while no sera in groups B and C dogs reacted with the antigens. In 2ME-RSAT using whole cells of B. canis M-strain as antigens, the induced antibody titers in group B dogs were observed at the second week PI and persisted for the 12th week PI, while sera of groups A and C dogs did not react with the whole cells. In ELISA using cytoplasmic fractions antigen of B. abortus 1119-3, the mean optical density of antibodies in groups A and B was detected from the first and second weeks PI, respectively, and persisted for 12th week PI, while sera of group C did not cross-react with the fractions antigen. However, in ELISA using the hot saline extracts of B. canis M- as an antigen, the induced antibody titers in only group B dogs were detected from second week PI and persisted for until the end of this study. These results indicate that the ELISA using B. abortus 1119-3 cytoplasmic fractions as antigens can be a good candidate for detection of brucellosis by B. abortus as well as B. canis in dogs.

동물에서 Coxiella burnetii 항체를 진단하기 위한 경쟁효소면역법 개발 (Development of competitive enzyme linked immunosorbent assay for detection of Coxiella burnetii antibody in animal)

  • 조동희;김용주;위성환;조미영;권창희;강영배;박용호;조상래
    • 대한수의학회지
    • /
    • 제40권1호
    • /
    • pp.81-85
    • /
    • 2000
  • Coxiella burnetii (C burnetii) is the causative agent of Q fever in animal and human. The distribution of the disease has been documented around world. In this study we developed the competitive enzyme linked immunosorbent assay(cELISA) and compared it with indirect immunofluorescent assay(IFA). A monoclonal antibody(Mab) against C burnetii and a peroxidase-conjugated anti-mouse IgM were used as an indicator system competing against antibody in animal serum or as an indicater of the absence of antibody. Sera were considered antibody positive when the percentage inhibition index(PI index) is upper than 30. PI index is calculated as 100-[sample OD/Mab OD)${\times}100$]. Among 162 bovine serum samples, 23 samples were antibody positive both in cELISA and IFA. And 156 samples showed same results. From goat with experimentally induced infection with C burnetii the antibody was detected 20 days early in cELISA compared to IFA. On the basis of present findings, it was demonstrated that cELISA is a reliable diagnostic method for The detection of specific antibodies against C burnetii infection.

  • PDF

돼지에서 브루셀라병 항체조사 및 Yersinia enterocolitica O:9의 분리 (Seroprevalence of Brucellosis and Isolation of Yersinia enterocolitica O:9 in Pigs)

  • 정병열;변재원;김하영;신동호;박최규;정석찬
    • 생명과학회지
    • /
    • 제20권5호
    • /
    • pp.697-702
    • /
    • 2010
  • 2007년 전국 10개의 일반 양돈장에서 다양한 일령의 돼지 578두를 채혈하여 Rose Bengal test 진단액으로 스크리닝을 하고, 양성 혈청에 대해서는 시험관응집반응과 C-ELISA를 적용하여 브루셀라병 항체 분포도 양상과 브루셀라 교차반응 유발균의 분리를 시도하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 돼지에서 브루셀라병 Rose Bengal 스크리닝 결과, 10주령 미만(양성률; 14.6%, 95% CI; 10.1-19.1)자돈보다 10주령에서 17주령 미만(양성률; 31.3%, 95% CI; 22.8-39.8)과 17주령 이상(양성률; 30.4%, 95% CI; 34.3-36.4)의 돼지에서 양성률이 유의성 있게 높았다(p<0.05). 따라서 검사돈 중 139두 (24.0%)에서 Rose Bengal test 양성반응이 나타났다. 양돈장별 Rose Bengal test 양성률 조사에서 6개 양돈장이 10% 미만의 양성률을 보였고, 2개 양돈장에서는 70% 이상의 높은 양성률이 관찰되었다. Rose Bengal test 양성 혈청 139건을 시험관응집반응과 C-ELISA에 적용한 결과, 시험관응집반응에서 100배 이상의 양성이 48건(34.5%)이었으나 C-ELISA에서는 전 두수 음성으로 나타나 돼지 혈청에 대해서는 시험관응집반응 성적과 C-ELISA 성적에 많은 차이가 있었다. 시험관응집반응에서 높은 항체가를 보인 돼지의 직장 swab 시료(n=26)에서 브루셀라 균과 교차반응을 유발하는 균종에 대해 균분리를 실시한 결과 E. coli O157:H7, Salmonella N group은 분리되지 않았으나 Y. enterocolitica O:9은 7건(26.9%)이 분리되었다.