This study was carried out to establish simple and easy methods to judge the survival, senescence and death of the protoplasts in culture system by identifying the marker substance related to metabolic status of the cells. When rice and tobacco protoplasts were cultured in MS and KM-8P media containing 2,4-D or coconut milk ABA decreased especially in the media containing coconut milk, but GA$_3$, IAA and zeatin increased as the cultures progressed. The decrease of ABA and increase of zeatin was especially remarkable. When the supraoptimal amount of osmoticum (mannitol) was added to the culture media ABA decreased after a momentary increase, but other growth hormones slowly increased as the concentration of the osmoticum increased. Contents of individual hormones were contrasted when protoplasts rice and tobacco were cultured on the same medium containing 10mM super mine or NaCl. Tobacco protoplasts were more sensitive to NaCl stress and stopped protoplast division at the late stage of culture. Protoplast viability decreased greatly in 48 hours when the protoplast were at 32$^{\circ}C$ on a medium lacking several components. ABA content increased up to 10 days from incubation in negative proportion to the protoplast viability. On the other hand contents of other growth hormones, especially zeatin, decreased. The present results clearly showed that the contents of individual growth hormones in the plant protoplasts in culture varied sensitively in response to environmental factors that they are faced with. This indicates that the physiological states of the protoplast, such as survival, senescence or death can be simply judged based on the quantitative analysis of those hormones by ELISA.
Sera of cancer patients may contain antibodies that react with a unique group of autologous cellular antigens called tumor-associated antigens (TAAs). The present study aimed to determine whether a mini-array of multiple TAAs would enhance antibody detection and be a useful approach in esophageal cancer detection and diagnosis. Our mini-array of multiple TAAs consisted of eleven antigens, p53, pl6, Impl, CyclinB1, C-myc, RalA, p62, Survivin, Koc, CyclinD1 and CyclinE full-length recombinant proteins. Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) were used to detect autoantibodies against eleven selected TAAs in 174 sera from patients with esophageal cancer, as well as 242 sera from normal individuals. In addition, positive results of ELISA were confirmed by Western blotting. In a parallel screening trial, with the successive addition of antigen to a final total of eleven TAAs, there was a stepwise increase in positive antibody reactions. The eleven TAAs were the best parallel combination, and the sensitivity and specificity in diagnosing esophageal cancer was 75.3% and 81.0%, respectively. The positive and negative predictive values were 74.0% and 82.0%, respectively, indicating that the parallel assay of eleven TAAs raised the diagnostic precision significantly. In addition, the levels of antibodies to seven antigens, comprising p53, Impl, C-myc, RalA, p62, Survivin, and CyclinD1, were significantly different in various stages of esophageal cancer, which showed that autoantibodies may be involved in the pathogenesis and progression of esophageal cancer. All in all, this study further supports our previous hypothesis that a combination of antibodies might acquire higher sensitivity for the diagnosis of certain types of cancer. A customized mini-array of multiple carefully-selected TAAs is able to enhance autoantibody detection in the immunodiagnosis of esophageal cancer and autoantibodies to TAAs might be reference indicators of clinical stage.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
/
v.33
no.4
/
pp.587-596
/
2006
Most of oral streptococci express the Antigen I/II (AgI/II) proteins, cell wall anchored adhesions. AgI/II protein binds to salivary agglutinin glycoprotein, a component of tooth pellicle and to ligands in other bacteria. These associations play important roles in bacterial colonization. Recently, it was reported that diverse host molecules also interact with AgI/II protein and that these interactions induce inflammatory responses from host cells. Among mutans streptococci containing -type hemolytic activity, Streptococcus mutans is a causative agent for dental caries. Compared with many other strains of S. mutans, GS-5 strain is unique in that this bacterium expresses truncated secretory AgI/II protein due to the nonsense mutation in the agI/II gene. This indicates that S. mutans GS-5 has a different clinical role and a recent report supported this idea based on the results from clinically isolated S. mutans strains. Previously, we had cloned agI/II gene from S. mutans GS-5 and generated recombinant N-terminal AgI/II protein. In this study, we further produced a hybridoma line expressing anti-AgI/II monoclonal antibodies named as 1C11A. This antibody showed high sensitivity to AgI/II protein in Western blot and ELISA. This new reagent will provide a basis for investigating the mechanisms of AgI/II-related diseases.
Nucleocapsid protein (NP)which exists in the particle of hantavirus and surrounds the viral RNA genome is one of the major structural proteins and plays role of antigen to elicit the antibody detected predorminantly right after infection of the virus in the patients of hemorragic fever with renal syndrome (HFRS)or experimental animals. NP is important target antigen in serological diagnostic system of HFRS utilizing whole antigens from the native virus particle, such as IFA, ELISA and Western blotting. Therefore, the preparation of this protein in the level of higher quantity and purity is desirasble for developed dianosis of the disease. The purpose of this study is the cloning of NP gene which exists in the S genome segment of Maaji (MAA) virus and expression of the gene to obtain qualified, genetically engineered NP to be utilized as an immunodiagnostic antigen. First of all, for the purpose of amplifing the MAA-NP gene by PCR, the specific primers were built from the known nucleotide sequence of Hantaan viral NP gene. The viral cDNA of the NP gene was synthesized by using the primers and RNase $H^-$ AMV reverse transcriptase. Thereafter, using this cDNA as a template, the NP gene was amplified specifically by Taq DNA polymrerase. The pT7blue (R)T-overhang vector systems were used for cloning of the amplified NP gene. The expression system was consisted of BL21 (DE3)pLysS and pET16b as a host and a plasmid repectively. Into Ndel site of pET16b, NP gene was ligated with cohesive end for the expression. Insertion of NP gene in the plasmid was confirmed by PCR and mini prep methods. For expression, IPTG was used and the expressed protein was characterized by Western blotting. The MAA-NP was expressed as the form of inclusion body (insoluble fraction)and the protein purified by affinity and metal chealating columns reacted specifically with the sera from patients of HFRS as to be tested by ELISA and Western blotting.
House dust mite allergens have been well established as sensitizing agents that are important in the induction of allergic diseases. In order to analyze epitopes of the allergen and to develop a quantitative method of the allergen exposure, monoclonal antibodies against a recombinant Der p 2 (rDer p 2), one of the major allergens of Dermatophogoides pteronyssinus, were produce. Four monoclonal antibodies produced wee species-specific and did not cross-react to the D. farinae crude extract. Two of the monoclonal antibodies were found to be IgG1 and the others were IgM. For the analysis of epitopes, a Der p 2 cDNA encoding 126 amino acids (aa) was dissected into three fragments with several overlapping peptides, A (aa residues 1-49), B (44-93), and C fragment (84-126). Three monoclonal antibodies showed reactivities to the recombinant B fragment and to the full-length rDer p 2, but one monoclonal antibody reacted only with the full-length rDer p 2. Two-site capture ELISA was developed using two different monoclonal antibodies for quantitating Der p2 in house dust. The sensitivity limit was 4ng/ml with rDer p2 and $8{\;}\mu\textrm{g}/ml$ with the d. pteronyssinus crude extract. The result suggested that the assay using monoclonal antibodies against rDer p2 could be useful for the environmental studies and for the standardization of mite allergen extracts.
Objectives PRAL (Prunus armniaca Linne Var) is a herbal formula in Oriental Medicine, known for its anti-inflammatory and anti-allergenic properties. However, its mechanism of action and the cellular targets have not yet been found enough. The purpose of this study is to investigate the effects of PRAL on Th2 cytokines expression in MC/9 mast cells. Methods The effect of PRAL was analyzed by ELISA, Real-time PCR, Western blot in MC/9 mast cells. mRNA levels of GM-CSF, IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ were analyzed with Real-time PCR. Levels of IL-13, MIP-$1{\alpha}$ were measured using enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). NFAT, AP-1 and NF-${\kappa}B$ p65 were examined by Western blot analysis. Results PRAL inhibited GM-CSF, IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ mRNA expression in a dose dependent manner. GM-CSF, IL-4, IL-5 mRNA expression were inhibited significantly in comparison to DNP-IgE control group at concentration of 100 ${\mu}g/ml$ and IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ mRNA expression were inhibited at concentration of 50 ${\mu}g/ml$, 100 ${\mu}g/ml$. PRAL also inhibited the IL-13, MIP-$1{\alpha}$ production significantly in comparison to DNP-IgE control group in a dose dependent manner. IL-13 production was inhibited at a concentration of 200 ${\mu}g/ml$, 400 ${\mu}g/ml$ and MIP-$1{\alpha}$ was inhibited at a concentration of 100 ${\mu}g/ml$, 200 ${\mu}g/ml$, 400 ${\mu}g/ml$. Western blot analysis of transcription factors involving Th2 cytokines expression revealed prominent decrease of the mast cell specific transcription factors including NFAT-1, c-Jun as well as NF-${\kappa}B$ p65 but not NFAT-2 and c-Fos. Conclusion These results indicate that PRAL has the effect of suppressing Th2 cytokines production in the MC/9 mast cells. These data represent that PRAL potentiates therapeutic activities to the allergic disease by regulating Th2 cytokines in the MC/9 mast cells.
목적 - Inflammatory cytokine으로 알려진 interleukin 1$\beta$, tumor necrosis factor $\alpha$는 치수 및 치근단질환에서 주요한 역할을 하며, 골흡수를 자극하고 골형성을 방해하는 것으로 알려져 왔다. 이들 cytokine은 주로 단핵세포/대식세포가 형성하는 것으로 알려져 왔으나 최근 연구에 의하면, PMN도 또한 이 런 cytokine들을 형성할 수 있다는 것이 보고되었다. 오랫동안 염증반응이나 면역반응에서 PMN의 역할이 주로 포식작용 을 통해 병원균을 제거하는 것이라고만 생각되어져 왔던 것을 생각하면, 새로운 발견이라 할 수 있다. 또, PMN은 IL-1ra도 생성하는 것으로 보고되었는데, IL-1ra란 IL-1의 생물학적 작용을 방해하는 인자이므로, IL-1과 밀접한 관련을 가지는 질환의 발전에 있어서 IL-1과 IL-1ra의 balance가 매우 중요한 역할을 할 것으로 생각된다 즉, IL-1ra는 IL-1$\beta$의 proinflammatory effect를 제한할 수 있는 negative feedback mechanism이라고 할 수 있다. 이 연구의 목적은 치수 및 치근단 조직의 감염에 있어서 주요 원인균인 Porphyromonas endodontalis의 LPS가 PMN의 IL-1$\beta$, TNF-$\alpha$, IL-1ra생성에 미치는 영향을 단백질과 mRNA 수준에서 관찰하는 것이다. 잘 알려진 non-oral bacterium인 E. coli의 LPS를 positive control로 사용하였으며, IL-1ra가 IL-1$\beta$의 생물학적 작용을 방해하는 작용을 관찰하기 위해, IL-1의 biological assay도 시행하였다. 방법 - P. endodontalis ATCC 35406을 혐기성 조건에서 배양하고, hot phenol-water extraction의 방법으로 LPS를 추출(crude LPS)한 후, 제조회사로부터 구입한 E. coli의 crude LPS와 함께 정제하였다. 건강한 자원자들을 대상으로 말초혈액을 채취한 후 dextran sedimentaion을 거쳐 Lymphoprep을 이용하여 PMN층을 분리하였다. 얻어진 세포들은 RPMI 1640 (supplemented with fetal bovine serum antibiotics)에 5$\times$$10^{6}$cells/ml이 되도록 resuspend시킨 후 각기 다른 농도 (0, 0.01, 0.1, 1 and 10$\mu$g/ml)의 LPS를 처리하여, 각기 다른 시간(Northern blot : 1, 2, 4시간 ELISA : 2, 6, 12, 18시간)동안 37$^{\circ}C$ in 5% $CO_2$ 의 조건으로 배양하였다. 상층액은 -7$0^{\circ}C$에 보관하였다가 추후에 ELISA를 이용한 단백질 농도 측정과 IL-1 biological assay에 사용되어졌으며, 배양된 세포로부터 RNA를 추출하여 Northern hybridization을 통해 mRNA expression을 관찰하였다. (중략)
In order to establish bio-marker systems for the screening of endocrine-disrupting chemicals contaminated in various environment, Vitellogenin(Vtg) bio-marker have been developed to detect Scorpion fish's(Sebastiscus marmoratus) Vtg. Vtg has been induced by administration of estradiol into S. marmoratus, and purified by gel filtration and ion-exchange chromatography from serum of the fish. After immunization of the purified Vtg into BALB/c mouse, hybridomas secreting anti-Vtg antibodies have been produced. The size of induced Vtg in the serum was about 440 kDa by gel filtration using Sepharose CL-6B. By SDS-PAGE analysis, the main band of Vtg, however, was at 175 kDa, and several minor bands have been detected with the main band. Eight different monoclonal antibodies have been produced from established hybridomas and the antibodies did not cross-react with sera from different species of fishes tested in this study except with that of Sebastes hubbsi. These results suggested that the monoclonal antibody of S28 and S15 can used as capture and tracer antibodies for ELISA and ICG assays. The detection systems developed in this study can be used as Bio-marker assays to check endocrine disrupting activity of various chemicals as well as to detect known endocrine disrupting chemicals contaminated in environment.
Kim, Kyeong Ri;Lee, Jin Hwa;Kim, Eun Jin;Kim, Yun Hee
The Journal of Pediatrics of Korean Medicine
/
v.32
no.4
/
pp.71-86
/
2018
Objectives The purpose of this study is to investigate the effects of Gardenia jasminoides for. grandiflora extracts' (GAJ) anti-inflammatory effect on RBL-2H3 mast cells and OVA/alum-sensitized mice. Methods In this study, IL-4 and IL-13 production was measured via ELISA analysis, and mRNA expressions of GM-CSF, IL-4, IL-5, $TNF-{\alpha}$, IL-6 were analyzed by real-time PCR. In addition, MAPKs and $NF-{\kappa}B$ p65 transcription factors were examined using western blotting, and ELISA was used to understand IgE, IL-4, and IL-13 production in ovalbumin-allergic mice in in vitro study. Results As a result of this study, 1. GAJ were observed to suppress the mRNA expression of GM-CSF, IL-4, IL-13, IL-5, $TNF-{\alpha}$, IL-6 in comparison to PMA 50 ng/ml, ionomycin $0.5{\mu}M$ (PI) control group. 2. GAJ also inhibited the IL-4, IL-13 production in comparison to PI control group. 3. Western blot analysis showed decrease on the expression of mast-cell-specific transcription factors, including MAKPs (ERK, JNK, p38) and $NF-{\kappa}B$ p65. 4. Orally-administered GAJ group in OVA/alum induced Balb/c mice showed decreased level of OVA-specific IgE in the serum. This group also has shown decreased the level of IL-4, IL-13 in the splenocyte culture supernatant. Conclusions Obtained results suggest that GAJ may regulate the allergic inflammation by transcription factors MAKPs (ERK, JNK, p38) and $NF-{\kappa}B$ p65 causing inhibition of Th2 cytokines in mast cells and OVA/alum-sensitized mice.
This study aims to evaluate the effects of antioxidant activities, protein and mRNA expressions of matrix metalloproteinase (MMP) -1 and procollagen type I C-peptide (PIP) in 70% ethanol extract from Hydnocarpus anthelmintica Pierre (HE). DPPH and ABTS+ radicals scavenging assays were measured for antioxidant activities and HE had 73.5% and 74.4% of scavenging activities at 1,000 ㎍/ml concentration, respectively. And we investigated the inhibition of collagenase by HE, and the result was a 78.8% inhibition effect on concentrations of 1,000 ㎍/ml. In addition, an MTT assay was performed to confirm the toxicity of the CCD-986sk fibroblasts to the HE, and as a result, the cell viability rate was about 91.7% at a concentration of 50 ㎍/ml or less, and subsequent cell experiments were performed at a concentration of 50 ㎍/ml or less. We treated the cells with UVB (20 mJ/cm2) for stimulation, treated HE at various concentrations, and performed ELISA tests and RT-PCR experiments. And HE increased the PIP and mRNA in a dose-dependent manner and showed an expression rate of about 64.2% and 83.4%, respectively, at a concentration of 50 ㎍/ml compared with Cont (50.3% and 45.8%, respectively). And HE suppressed the MMP-1 protein and mRNA in a dose-dependent manner and showed a low expression rate of about 48.7% and 35.9%, respectively, at a concentration of 50 ㎍/ml. These results can be applied to developing anti-wrinkle materials for functional food and cosmetics with HE.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.