Male germ cell apoptosis has been extensively explored in rodent. In contrast, very little is known about their susceptibility to apoptosis stimuli of developing germ cell stages at the time when germ cell depletion after busulfan treatment occurs. Furthermore, it is still unanswered how spermatogonial stem cells are resistant to busulfan treatment. We examined the change of gene expression in detail using cDNA microarray analysis of mouse testis treated with busulfan. A subtoxic dose of busulfan (40mg/kg of body weight) transiently increased 228 mRNA levels among of the 8000 genes analyzed. TagMan analysis confirmed that the mRNA levels such as defensive protein, support protein, enzymatic protein, transport protein, and hormonal protein were rapidly increased. These results were re-confirmed by real-time PCR analysis. However, the expression levels of these genes induced by busulfan treatment were significantly reduced in control testis, indicating that both of male germ cells and somatic cells after busulfan treatment induces self-defense mechanism for protection of testicular cell death. Among them, we conclude that defense proteins play a key role in testis injury induced by busulfan.
Antioxidants either scavenge superoxide and free radicals or stimulate the detoxification mechanisms within cells, resulting in increased detoxification of free radicals formation. Hyperin, isolated from the stem of Uncaria rhynchophylla, prevented oxygen radical formation and inhibited lipid oxidation. The effective concentrations were 31.3 $\mu$M for a radical scavenging assay and 2.2 $\mu$M for a microsome assay. cDNA microarray analysis to determine which genes were modulated by hyperin found that 50 genes were upregulated and 37 genes were downregulated in SNU-668 human gastric cancer cells. Among these genes, thirteen genes that were significantly affected by hyperin were verified by RT-PCR for their effect of genetic reprogramming.
Kim, Jin-Oh;Kim, Ji-Young;Kwack, Mi-Hee;Hong, Su-Hyung;Kim, Moon-Kyu;Kim, Jung-Chul;Sung, Young-Kwan
BMB Reports
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v.43
no.9
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pp.599-603
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2010
Troglitazone is an anti-diabetic agent that improves hyperglycemia by reducing peripheral insulin resistance in type II diabetic patients. Troglitazone has been shown to cause growth inhibition of various normal and cancerous cells. However, the molecular mechanism by which troglitazone affects the growth of these cancer cells remains unclear. Here, we report that troglitazone treatment of Hep 3B human hepatocellular carcinoma cells resulted in dose-dependent growth inhibition. Analysis of cell cycle distribution by flow cytometry showed that the number of apoptotic cells was increased in a dose-dependent manner in response to troglitazone treatment. cDNA microarray analysis showed a number of differentially expressed genes in response to troglitazone. Among the upregulated genes, hypoxia-inducible factor 1 (HIF-1)-responsive RTP801 was induced in a dose-dependent manner. We also observed HIF-1 accumulation by immnocytochemistry after troglitazone treatment. These results strongly suggest that RTP801 might be involved in troglitazone-induced apoptosis in Hep 3B cells.
Roh, Kyung Hee;Park, Jong-Sug;Kim, Jong-Bum;Kim, Hyun Uk;Lee, Kyeong-Ryeol;Kim, Sun Hee
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.55
no.4
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pp.227-234
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2012
We observed that oil began to accumulate at 25 seed days after flowering (DAF) and reached the maximum potential at 35 seed DAF of oilseed rape, and the greatest weight of 100 seeds was obtained at 35 seed DAF. To survey a broad analysis of gene expression in developing embryos of Brassica napus, the Bn 300k microarray have been constructed. The Bn 300k Microarrary was designed from 80,696 unigenes clustered from 543,448 ESTs and 780 cDNA at NCBI. These arrays have been hybridized in a series of experiments with probes derived from seeds and leaf of B. napus. Approximately 8.5% of the 7,000 genes were expressed as ratios 2-fold higher in seed (25 DAF) than leaves and 0.4% at ratios 10. Also we observed that storage and cell differentiation-related genes were highly expressed at 10 DAF, whereas energy-related genes including fatty acid metabolism were increased up depending on seed maturation using Microarray, which was confirmed by reverse transcriptase polymerase chain reaction. These results suggest that B. napus arrays provide a very useful data set of seed-specific expression that can be further analyzed by examination of the promoter regions of these genes and help our understanding of the complex regulatory network in developing seeds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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