• Title/Summary/Keyword: cDNA 라이브러리

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Construction of Human cDNA Library Analysis Pipeline (인간 cDNA 라이브러리 분석 파이프라인 구축)

  • Jung, Jaeeun;Kim, Dae-Soo
    • Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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    • 2018.05a
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    • pp.323-324
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    • 2018
  • 전장 cDNA 클론을 시퀀싱하는 것은 선택적 스플라이싱 형태를 비롯한 정확한 유전자 구조를 정의하는데 유용하게 사용될 수 있으며, 유전자 및 단백질의 생물학적 기능연구에 중요한 자원을 제공한다. 포괄적이며 비 중복적인 cDNA의 생산은 인간 유전체 연구의 중요한 목표이다. 본 연구에서 제공하는 인간 cDNA 라이브러리 분석 파이프라인은 전장 cDNA를 분석하는 자동화 도구로 여러 연구자들에게 활용 될 수 있을 것으로 사료된다.

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Construction of Human cDNA Library Analysis Pipeline (인간 cDNA 라이브러리 분석 파이프라인 구축)

  • Jung, Jaeeun;Kim, Dae-Soo
    • Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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    • 2018.05a
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    • pp.83-84
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    • 2018
  • 전장 cDNA 클론을 시퀀싱하는 것은 선택적 스플라이싱 형태를 비롯한 정확한 유전자 구조를 정의하는데 유용하게 사용될 수 있으며, 유전자 및 단백질의 생물학적 기능연구에 중요한 자원을 제공한다. 포괄적이며 비 중복적인 cDNA의 생산은 인간 유전체 연구의 중요한 목표이다. 본 연구에서 제공하는 인간 cDNA 라이브러리 분석 파이프라인은 전장 cDNA를 분석하는 자동화 도구로 여러 연구자들에게 활용 될 수 있을 것으로 사료된다.

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Studies on the differentiation of Myoblasts: Molecular Cloning of differentiation related Genes in the Chick Embryonic Myoblasts by Differential Hybridization. (근세포 분화에 관한 연구: 차별 혼성화 스크리닝법에 의한 근원세포 분화 관련 유전자의 클로닝)

  • 강봉석;장세헌유병제양재섭
    • The Korean Journal of Zoology
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    • v.37 no.2
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    • pp.240-248
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    • 1994
  • 골격근 세포는 미분화 단핵 근원세포로부터 신장과 융합을 거쳐 다핵 횡문근섬유로 분화되어 가며 동시에 근특이 유전자의 발현이 선택적으로 일어난다. 본 연구에서는 계배 배양 근원세포의 분화동안 유전자 발현 조절 양상에 대한 연구를 위해, 계배 근원세포를 72시간 배양한 근섬유로부터 CDNA 라이브러리를 제작하였다. 이 cDNA 라이브러리를 미분화 단핵 근원세포(배양 36시간)와 분화된 다핵 근섬유(배양 72시간)의 poly(A)+ RNA 주형에서 합성된 [32P〕cDNA를 Probe로 사용한 differential plaque hybridization 방법으로 스크리닝하였다 분화된 다핵 근섬유 CDNA probe에 강한게 흔성화되는 CDNA clone을 선별하여 클로닝하였다. 선별한 CDNA clone 들 중 하나는 약 1.3 Kb 크기의 삽입절편을 갖고 있는 것으로 나타났고, 이 CDNA를 probe로 사용하여 northern blotting 한 결과, 이 CDNA엑 대한 유전자는 미분화 단핵 근원세포에서 분화된 다핵 근섬유로 분화가 진행됨에 따라 유전자 산물인 RNA 양이 증가되는 것으로 나타났다 또한 이 1.3 Kb CDNA에 대한 RNA의 크기는 약 2 7 Kb로 확인되었다.

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Bacterial Diversity in the Mud Flat of Sunchon Bay, Chunnam Provice, by 16S rRNA Gene Analysis (16S rRNA 유전자 분석에 의한 전남 순천만 갯벌의 세균 다양성)

  • 이명숙;홍순규;이동훈;배경숙
    • Korean Journal of Microbiology
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    • v.37 no.2
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    • pp.137-144
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    • 2001
  • In order to investigate the diversity of bacterial community in the mud flat of Sunchon Bay, Chunnam province, diversity of amplified 16S rDNA was examined. Total DNA was extracted from sediment soils and 16S rDNAs were amplified using PCR primers based on the universally conserved sequences in bacteria. Clonal libraries were constructed and 111 clones were examined by amplified rDNA restriction analysis (ARDRA) using HaeIII. Clones were clustered based on restriction patterns using computer program, GelCompar II. One hundred different RFLP types were detected from 111 clones. The 20 clones were selected and sequenced according to dendrograms derived from ARDRA, to cover most of the bacterial diversity in the clone libraries. None of the clones were identical to any representatives in the Ribosomal Database Project small subunit RNA databases and GenBank. All sequences showed between 77 and 96.8% similarity to the known 16s rRNA sequence from cultured organisms. The 20 clones sequenced fell into seven major lineages of the domain Bacteria: alpha-, delta-, gamma-Proteobacteria, low G+C Gram positive bacteria, high G+C Gram positive bacteria, Sphingobacteria (Cytophaga) and Cyanobacteria (chloroplast). Among the clones, the Proteobacteria were dominant.

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Studies on Specific Genes Related to the Regulation of Muscle Cell Differentiation (근세포 분화 조절에 관련된 특이 유전자에 관한 연구)

  • 강성구;김상해
    • The Korean Journal of Zoology
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    • v.35 no.3
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    • pp.287-294
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    • 1992
  • 배양 중의 골격근 세포는 증식을 거쳐 세포융합을 통해 다핵세포로 분화되므로 세포분화의 연구에 좋은 모델로서 이용되고 있다. 이전 실험에서 근원세포 융합을 억제하는 단일클론항체(MII-3J31)가 제작되었으며(Kim et al., 1992)이 항체에 대한 항원은 분자량이 약 35 kDa인 세포막 단백질로 추정되었다. 본 실험에서는 13일 계배와 성체의 근섬유 mRNA에서 CDNA라이브러리를 제작하여 근원세포 분화에 특이적으로 나타나는 유전자를 추적하였다. 근원세포 융합에 관여하는 단백질에 대한 CDNA는 계배 13일 째의 근원세포 CDNA라이브러리에서 단일클론항체를 사용한 immunoscreening 방법을 이용하여 확인하였다. 이 CDNA의 크기는 약 1.5 kb였다. 한편 13일 계배와성체 근섬유 CDNA 라이브러 리를 이용하여 13일 계배에만 특이하게 유전자 발현 이 일어 나고 성체에서는 나타나지 않는 약 0.8 kb의 CDNA플 찾았다.

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Molecular Cloning and Identification of Novel Genes, Gomsin, Characteristically Expressed in Snailfish, Liparis tanakae (꼼치에서 특징적으로 발현되는 새로운 유전자 곰신의 분리 및 동정)

  • 송인선;이석근;손진기
    • Development and Reproduction
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    • v.6 no.1
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    • pp.7-16
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    • 2002
  • In order to obtain the specific genes of snailfish a subtracted cDNA library was constructed, and analysed by sequencing and GenBank search. Among them C90-171 clone was turned out to be genes showing low homology and nonredundant genes. This novel clone was named Gomsin(C90-171). Gomsin was shown to be intensely expressed in the epithelial cells, some mesenchymal cells, and sheaths of muscle bundles in the result of immunohistochemistry. In the cross reaction assay of Gomsin antibody against various human tissues, the Gomsin was strongly expressed in the ductal and acinar cells of salivary glands, which was similar to the expression patterns of proline-rich proteins(PRPs) of human. The antibody raised against the Gomsin was clearly cross-reacted with human salivary PRPs and also recombinant proteins of human PRPs in the Western blot and immunoprecipitation analysis. Contrast to the salivary PRPs, the Gomsin was not easily degraded in the mixed saliva, but rapidly attacked on the cultured keratocytes in vitro. The simulated protein structure of Gomsin was similar to the whorled pattern of PRPs, even though the amino acid sequence of Gomsin was quite different from those of PRPs. These data suggest that the Gomsin is a characteristic matrix protein in the skin and body of snailfish, which is also utilized for the tissue protection in the similar way to the PRPs of human muco-secretory organs.

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Development of Automatic Reading System for On-Off Type DNA Chip (온-오프 타입 DNA 칩의 자동판독 시스템)

  • Ryu, Mun-Ho;Kim, Jong-Dae
    • Proceedings of the Korea Information Processing Society Conference
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    • 2006.11a
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    • pp.609-612
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    • 2006
  • 본 연구는 진단용 DNA 칩의 자동판독 시스템을 제안하는 것을 목적으로 한다. 일반적인 자동판독 시스템의 사양을 정의하고 그 구현방법을 제안하였다. 응용 예로서 자궁경부암 진단용 DNA 칩을 대상으로 GenePix 스캐너 프로그램 환경에 적용하였다. 영상획득은 GenePix 의 라이브러리를 사용하여 HTML 언어로 구현하였고, 영상의 판단과 보고서 생성은 Microsoft Visual C++ 6.0를 사용하여 COM 형태로 구현하였다. 결과 보고서는 한글 2002 문서에 환자 정보와 결과 정보 등에 해당하는 곳에 미리 정의된 표지문자열들을 삽입하여 템플릿을 만들었다. 판독 시스템은 템플릿을 읽어들여 처리 결과의 내용으로 표지문자열들을 치환하여 보고서를 생성하였다. 제안한 시스템을 통해서 스캐닝을 통한 영상획득, 영상읠 판독, 결과 보고서 생성으로 구성된 전체 판독과정이 사용자의 개입 없이 자동으로 처리될 수 있었다. 본 시스템은 기존에 수작업을 자동화여 판독 시간을 단축하고 판독 기준을 정량화하여 진단용 DNA 칩이 대량검사 활용되는 공헌할 것으로 기대된다.

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Expression of Human ALDH2 Gene in escherichia coli (대장균에서 사람 ALDH2 유전자의 발현)

  • 곽보연;이기환;정한승
    • The Korean Journal of Food And Nutrition
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    • v.10 no.2
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    • pp.268-271
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    • 1997
  • Human mitochondrial aldehyde dehydrogenase(ALDH2) is mainly responsible for the oxidation of acetaldehyde generated during alcohol oxidation in vivo. To investigate the role of ALDH2 in alcohol metabolism, it was needed to get solubilized enzyme. The cDNA of ALDH2 is isolated from cDNA library and ligated to several expression vectors for E. coli. At almost expression system to be constructed, the broad expression band of ALDH2 was detected. But, the large part of the expressed protein consisted as inclusion body, the yield of solubilized enzyme was not more tan 5% of the total expressed amount. Recombinant ALDH2 was verified from the several expression systems.

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ChIP-seq Library Preparation and NGS Data Analysis Using the Galaxy Platform (ChIP-seq 라이브러리 제작 및 Galaxy 플랫폼을 이용한 NGS 데이터 분석)

  • Kang, Yujin;Kang, Jin;Kim, Yea Woon;Kim, AeRi
    • Journal of Life Science
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    • v.31 no.4
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    • pp.410-417
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    • 2021
  • Next-generation sequencing (NGS) is a high-throughput technique for sequencing large numbers of DNA fragments that are prepared from a genome. This sequencing technique has been used to elucidate whole genome sequences of living organisms and to analyze complementary DNA (cDNA) or chromatin immunoprecipitated DNA (ChIPed DNA) at the genome level. After NGS, the use of proper tools is important for processing and analyzing data with reasonable parameters. However, handling large-scale sequencing data and programing for data analysis can be difficult. The Galaxy platform, a public web service system, provides many different tools for NGS data analysis, and it allows researchers to analyze their data on a web browser with no deep knowledge about bioinformatics and/or programing. In this study, we explain the procedure for preparing chromatin immunoprecipitation-sequencing (ChIP-seq) libraries and steps for analyzing ChIP-seq data using the Galaxy platform. The data analysis steps include the NGS data upload to Galaxy, quality check of the NGS data, premapping processes, read mapping, the post-mapping process, peak-calling and visualization by window view, heatmaps, average profile, and correlation analysis. Analysis of our histone H3K4me1 ChIP-seq data in K562 cells shows that it correlates with public data. Thus, NGS data analysis using the Galaxy platform can provide an easy approach to bioinformatics.

Isolation and Characterization of Dehydrin 1 (Dhn1) gene from Codonopsis lanceolata (더덕의 주근에서 유래한 Dehydrin 1 (Dhn1) 유전자의 분리 및 분석)

  • Lee, Kang;Yang, Duk-Chun
    • Korean Journal of Plant Resources
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    • v.16 no.3
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    • pp.238-244
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    • 2003
  • During the life cycle, plants have to suffer from various environmental stresses. A common element in response to many environmental stresses is cellular dehydration. Dehydrins are a family of proteins commonly induced by environmental stresses associated with low temperature or dehydration and during seed maturation drying. For the study in the defense mechanism against various stresses, a cDNA clone encoding a dehydrin gene was isolated from a cDNA library prepared from tab root mRNAs of Codonopsis lanceolata. The cDNA, designated ClDhn1, is 893 nucleotides long and has an open reading frame of 480 bp with a deduced amino acid sequence of 159 residues. The ClDhn1 amino acid sequence is highly hydrophilic and possesses two conserved repeats of characterized lysine­rich K­segment (KIKEKLPG), and a 7­serine residue stretch prior to the first lysine­rich repeat that is common to many dehydrins. The DEYGNP conserved motif is, however, modified in the sequence of ClDhn1 gene. The deduced amino acid sequence of ClDhn1 was compared with other plant dehydrinls and showed high homology with Solanum commersonii