• 미생물학회지
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• 제40권2호
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• pp.104-110
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• 2004

임상균주인 Enterobacter spp.가 생성하는 신규 chromosomal AmpC $\beta$-lactamases의 유전자형 및 진화적 측면을 고찰하기 위해서 항생제 감수성 시험, pI값 측정, DNA 염기서열 분석, 진화적 유연관계를 새로운 발현$.$분비 벡터를 이용하여 수행하였다. 6개 임상균주에서 cephamycins (cefoxitin and cefotetan), amoxicillin, cephalothin 및 amoxicillin-clavulanic acid에 내성 요인인 AmpC $\beta$-lactamase 유전자를 pMSG1219에 cloning하여 그 특성을 조사하였다. 381-amino-acid $\beta$-lactamase를 암호화 하는 4개의 ampC 유전자($bla_EcloK992004.1$, $bla_EcloK995120.1$, $bla_EcloK99230$ 및 $bla_EareK9911729$)는 E. cloacae MHN1의 chromosomal ampC 유전자($bla_EcloMHN1$)와 99.6% 이상의 상동성을 나타냈으며 두 ampC 유전자($bla_Eclok9973$ and $bla_EcloK9914325$)는 E. cloacae 908R의 chromosomal ampC 유전자($bla_EcloQ9908R$)와 99.7% 상동성을 나타냈다. 이런 결과는 6개 ampC 유전자가 $bla_EcloMHN1$ or $bla_EcloQ9908R$로부터 유래되었음을 시산한다. 발현ㆍ분비 벡터를 이용하여 제조한 6개 transformant의 MIC값 양상 및 정확한 pI값은 E. coli 균주에 외부 유전자의 특성을 고찰하는 목적에 개발된 발현$.$분비 백터(pMSG1219)가 유용함을 의미한다.

• 생명과학회지
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• 제13권5호
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• pp.642-650
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• 2003

인체 신경아세포종의 성장에 미치는 cAMP의 영향을 조사하기 위하여 Ewing's sarcoma 세포주인 CHP-100 세포에 dibutyry1-cAMP 및 8-bromo-cAMP를 처리하였다. 두 종류의 cAMP analog처리 시간 증가에 따라 CHP-100 세포의 증식이 처리 시간 의존적으로 억제되었으며, 이는 핵의 형태변화 및 DNA 단편화 현상을 수반한 apoptosis 유발과 연관성이 있었다. 또한 DNA flow cytometry 분석결과 cAMP는 세포주기 G1기 특이적 arrest를 유발하였다. cAMP 처리에 의하여 retinoblastoma 단백질(pRB)의 인산화가 억제되었으며, 전사조절인자 E2F-1과의 결합이 증대되었다. cAMP는 cyclin-dependent kinase (Cdk) 2 및 cyclin E 단백질의 발현변화에는 영향을 미치지 않았으나, 그들의 kinase 활성은 처리시간 의존적으로 매우 감소되었다. 또한 cAMP 처리에 의하여 Cdk inhibitor인 $p21^{WAF1/CIP1$의 발현이 증가되었으며, 증가된 p21 단백질은 Cdk2와 강한 결합을 형성하고 있었다. 이상의 결과에서 cAMP의 암세포 성장억제 효과에 pRB 및 p21이 매우 중요한 역할을 함을 알 수 있었다.

• 생명과학회지
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• 제16권7호
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• pp.1225-1228
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• 2006

cAMP와 복합체를 형성한 cAMP 수용성 단백질은 DNA와 결합하여 ${\sim}90$도 정도의 예리한 DNA bending을 유도한다. 그러나 이전의 논문[5]에 의하면 돌연변이 CRP:cGMP 복합체는 돌연변이 CRP:cAMP 복합체보다 아크릴아미드 겔에서 상대적으로 빠른 이동속도를 보였다. CRP와 cyclic nucleotide 존재하에서 DNA의 구조 변화를 알아보기 위하여 6가지 준비된 DNA조각들을 사용하여 몰 고리화 인자(molar cyclization factor)[13]를 측정하였다. 이들 자료를 사용하여 nonlinear regression analysis를 통하여 cGMP 존재하에서 돌연변이 CRP는 DNA bending을 형성하지 않으나 CAMP 존재하에서 나선 꼬임과 같은 DNA 구조 변화없이 DNA bending을 형성한다.

• 한국동물학회지
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• 제31권1호
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• pp.35-48
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• 1988

Testosterone과 cyclic AMP(cAMP)가 부정소에 미치는 영향을 조사하기 위하여 흰쥐의 복강내로 testosterone 및 cAMP를 투여하여 acid phosphatase(ACP),alkaline phosphatase(ALP), lactate dehydrogenase(LDH)의 활성도를 측정하였으며 상피세포내 미세구조의 변화를 전자현미경으로 관찰하였다. 그 결과 거세한 실험군에서 ACP활성도는 거세 후 3일째까지 감소하기 시작하였으며 ALP활성도는 5일째,LDH활성도는 7일째부터 각각 감소하였다. 또한 거세 후 14일째 부터 testosterone을 7일간 투여한 경우 ACP와 ALP의 활성도는 5일간 계속 투여하였을 때,LDH의 활성도는 7일간 계속 투여하였을 때만 각각 유의성있게 증가하였다. cAMP 및 cAMP-theophyllin을 투여한 경우 LDH 및 ACP의 활성도가 증가하였으나 그 증가폭은 큰 의미가 없었다. ALP의 활성도는 두 가지의 경우에서 모두 증가를 나타내었다. 미세구조를 관찰한 결과는 거세한 실험군에서 골지체가 점차 변형되어 층상구조가 없어지며 미토콘드리아도 파괴되었고 상당수 존재하던 부동모 (stereocilia)도 파괴되었다. 이 경우 testosterone투여시 파괴되었던 고리지체, 미토콘드리아 및 부동모가 회복되었고 cAMP 및 cAMP-theophyllin 을 투여하였을 때는 골지체 및 여러 세포기관들이 대조군과 같은 수준으로 회복되었으나 부동모는 거세군과 같은 수준으로 관찰되었다. 이상의 결과는 부정소액에서 정자성숙시 나타나는 효소활성도 증가와 유사하게 나타났는데, 이것은 정자↔부정소액↔부정소 상피세포 와 같은 상호작용을 통하여 정자성숙이 이루어지며 이는 상피세포에서 합성된 물질이 부정소내 강으로 방출된다는 것을 의미하며 cAMP를 처리하였을 경우 효소활성도 증가 및 여러 세포소기관의 회복 등 testosterone과 유사한 작용을 나타내는 것은 cAMP가 웅성호르몬 작용시 화확적으로 전달자로 작용할 수 있다는 가능성을 나타내는 것으로 생각된다.

• International Journal of Oral Biology
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• 제36권2호
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• pp.83-89
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• 2011

Substantia gelatinosa (SG) neurons receive synaptic inputs from primary afferent $A{\delta}$- and C-fibers, where nociceptive information is integrated and modulated by numerous neurotransmitters or neuromodulators. A number of studies were dedicated to the molecular mechanism underlying the modulation of excitability or synaptic plasticity in SG neurons and revealed that second messengers, such as cAMP and cGMP, play an important role. Recently, cAMP and cGMP were shown to downregulate each other in heart muscle cells. However, involvement of the crosstalk between cAMP and cGMP in neurons is yet to be addressed. Therefore, we investigated whether interaction between cAMP and cGMP modulates synaptic plasticity in SG neurons using slice patchclamp recording from rats. Synaptic activity was measured by excitatory post-synaptic currents (EPSCs) elicited by stimulation onto dorsal root entry zone. Application of 1 mM of 8-bromoadenosine 3,5-cyclic monophosphate (8-Br-cAMP) or 8-bromoguanosine 3,5-cyclic monophosphate (8-Br-cGMP) for 15 minutes increased EPSCs, which were maintained for 30 minutes. However, simultaneous application of 8-BrcAMP and 8-Br-cGMP failed to increase EPSCs, which suggested antagonistic cross-talk between two second messengers. Application of 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX) that prevents degradation of cAMP and cGMP by blocking phosphodiesterase (PDE) increased EPSCs. Co-application of cAMP/cGMP along with IBMX induced additional increase in EPSCs. These results suggest that second messengers, cAMP and cGMP, might contribute to development of chronic pain through the mutual regulation of the signal transduction.

• 한국균학회지
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• 제15권4호
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• pp.238-246
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• 1987

1. 검정곰팡이(Aspergillus niger)를 실험균주로 하여 동조적으로 액침배양한 결과 포자의 발아로 부터 균사의 생장, 생식기관의 성숙 및 무성포자의 형성까지를 재현시켰다. 2. 포자형성용 배지(D배지)에 cAMP를 첨가한 실험구에 있어서는 포자형성이 촉진되었고, 그 최적 농도는 $10^{-4}M$이었다. 3. 포자형성용 배지(D배지)에 첨가한 테오필린은 포자형성을 촉진하였고, 그 최적농도는 10mg/ml이었다. 4. 포자형성용 배지(D배지)에 첨가한 카페인은 포자형성을 촉진하였고, 그 최적농도는 300mg/ml이었다. 5. 포자형성용 배지(D배지)에 cAMP와 테오필린을 함께 첨가한 실험구에서는 cAMP 단독 첨가 실험구보다 포자형성 촉진효과가 더욱 강화되었다. 6. 포자형성용 배지(D배지)에 cAMP와 카페인을 함께 첨가한 실험구에서는 cAMP 단독 첨가 실험구보다 포자형성 촉진효과가 더욱 강화되었다. 7. 포자형성용 배지(D배지)에 AMP나 ATP를 첨가한 실험구에서는 포자형성 촉진효과가 거의 없었다. 8. 아세트산염 배지에 cAMP, 테오필린, 카페인을 각각 첨가한 실험구에서는 포자형성에 대해 촉진효과를 나타내었다.

• 약학회지
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• 제51권1호
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• pp.35-43
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• 2007

To investigate the immunomodulatory roles of cyclic AMP (CAMP) on macrophage- and T lymphocyte-mediated immune responses, CAMP elevating agents were employed and carefully re-examined under the activation conditions of the cells. Various inhibitors tested dose-dependently blocked tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ production with IC$_{50}$ values ranged from 0.04 to 300 ${\mu}$M. Of the inhibitors, cAMP-elevating agents showed lower cytotoxicity assessed by lactate dehydrogenase (LDH) release, suggesting less toxic and more selective. In particular co-treatment of dbcAMP with a protein kinase C inhibitor staurosporine displayed the synergistic inhibition of TNF-${\alpha}$ production. The modulatory effect of dbcAMP on TNF-${\alpha}$ and nitric oxide (NO) was significantly affected by treatment time of dbcAMP. Thus, post-treatment of dbcAMP (three hours before LPS) abrogated dbcAMP's inhibitory activity and rather enhanced TNF-${\alpha}$ level up to 60%. In contrast, additional NO production was shown at the co-treatment of dbcAMP with LPS. Unlike simultaneous treatment of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and interferon (IFN)-${\gamma}$co-treatment, the combination of dbcAMP with other NO-inducing stimuli did not show drastic overproduction of NO. cAMP elevating agents also diminished splenocyte proliferation stimulated by concanavalin (Con) A, phytohemaglutinin A (PHA) and lipopolysaccharide (LPS). In addition, dbcAMP but not rolipram strongly suppressed CD8$^+$ T cells (CTLL-2). Finally, cAMP elevating agents were differentially involved in regulating CD98-mediated cell-cell adhesion. Thus, dbcAMP and rolipram significantly enhanced the cell-cell adhesion, whereas forskolin blocked. Therefore, our results suggest that CAMP elevating agents participate in various immune responses mediated by macrophages and T cells with a different fashion depending on cellular environments and activation signals.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권6호
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• pp.1392-1396
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• 2005

Proteolytic digestion and CD measurement of wild-type and mutant cyclic AMP receptor proteins (CRPs) were performed either in the presence or absence of cyclic nucleotide. Results indicated that transition of a structural change to the hinge region by the binding of cAMP to the anti site was required for the binding of cAMP to the syn site near the hinge region and, although the occupancy of cAMP in the anti site increased the protein stability, CRP adopted more a stable conformation by the binding of cAMP to the syn site.

• BMB Reports
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• 제28권1호
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• pp.21-26
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• 1995

The Escherichia coli mixed-function serC-aroA operon encodes biosynthethic enzymes for unrelated pathways leading to the syntheses of serine and aromatic amino acids. It has been proposed that the operon is expressed in a cAMP-dependent manner. In this work experiments were performed to investigate the cAMP-dependent expression of the operon. Exogenous cAMP increased ${\beta}$-galactosidase synthesis in the $cya^+$ and cya strains harboring the serC-aroA-lac fusion plasmid. This enhancement was more dramatic in the $cya^-$ strain grown in a minimal medium. In a dot blot assay the serC-aroA mRNA content increased in a concentration-dependent pattern after the addition of exogenous cAMP. The activity of phosphoserine aminotransferase, encoded by the serC gene, apparently increased in E. coli cells after the addition of cAMP. All results obtained confirmed that the expression of the E. coli serC-aroA operon is positively regulated by cAMP at the level of transcription.

• Korean Journal of Acupuncture
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• 제18권1호
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• pp.143-156
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• 2001

Modulatory effect of cAMP-PKA system on inhibitory- and excitatory herbs-induced ion currents were investigated by nystatin-perforated patch clamp method under voltage-clamp condition. Ion currents induced by Bupleuri radix and Coptidis rhizoma were not affected by cAMP-PKA system. Ion current induced by Ecliptae herba was partially inhibited by cAMP-PKA system. Ion currents induced by Aconiti tuber and Boshniakiae herba were inhibitory modulated and ion current induced by Zingiberis rhizoma was excitatory modulated by cAMP-PKA system. Modulation of cAMP-PKA system on ion currents induced by Ginseng radix was fluctuated. In this results, it can be seen generally that excitatory herbs-induced ion currents were modulated by cAMP-PKA system while cAMP-PKA system did not affect inhibitory herbs-induced ion currents.