Hydrocortisone 5 mg/kg which exerts minimal effect on the renal function and furosemide 1 mg/kg which induces moderate amount of diuresis were injected intraperitoneally to study their effects on the renal cyclic nucleotides content in rats. 1) The renal tissue levels of cAMP were significantly increased by administration of hydrocortisone, but there was no significant change in the furosemide group compared with that of saline treated control group. Moderate elevation in renal cAMP level was noted by the combined administration of hydrocortisone and furosemide, but this elevation was less than that of hvdrocortisone treated group. 2) The renal cGMP level did not show nay remarkable change after the administration of hydrocortisone, however, there were a significant increase by the administration of furosemide alone or combination of both drugs. The level of renal cGMP was higher and maintained longer in the combined treated group than furosemide treated group. The result of this experiment indicates that the potentiating effect of hydrocortisone on the diuretic action of furosemide nay be related to the renal levels of cGMP rather than that of cAMP.
Platelet activation is essential for hemostatic process on blood vessel damage. However, excessive platelet activation can cause some cardiovascular diseases including atherosclerosis, thrombosis, and myocardial infarction. Scoparone is commonly encountered in the roots of genus Artemisia or Scopolia, and has been studied for its potential pharmacological properties including immunosuppression and vasorelaxation, but antiplatelet effects of scoparone have not been reported yet. We investigated the effect of scoparone on human platelet activation prompted by an analogue of thromboxane A2, U46619. As the results, scoparone dose-dependently increased cyclic adenosine monophosphate (cAMP) levels as well as cyclic guanosine monophosphate (cGMP) levels, both being aggregation-inhibiting molecules. In addition, scoparone strongly phosphorylated inositol 1, 4, 5-triphosphate receptor (IP3R) and vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP), substrates of cAMP dependent kinase and cGMP dependent kinase. Phosphorylation of IP3R by scoparone resulted in inhibition of Ca2+ mobilization in calcium channels in a dense tubular system, and phosphorylation of VASP by scoparone led to an inability of fibrinogen being able to bind to αIIb/β3. Finally, scoparone inhibited thrombin-induced fibrin clotting, thereby reducing thrombus formation. Therefore, we suggest that scoparone has a strong antiplatelet effect and is highly probable to prevent platelet-derived vascular disease.
Cordycepin (3'-deoxyadenosine), which comes from Cordyceps militaris, the Chinese medicinal fungal genus Cordyceps, is used in the treatment of various diseases such as cancer and chronic inflammation. We recently reported that cordycepin has a novel antiplatelet effect through the down regulation of $[Ca^{2+}]_{i}$ and the elevation of cGMP/cAMP production. In this study, we further investigated the effect of cordycepin on collagen-induced platelet aggregation in the presence of cGMP-dependent protein kinase (PKG)- or cAMP-dependent protein kinase (PKA)-inhibitor. PKG inhibitor Rp-8-pCPT-cGMPS potentiated the collagen-induced platelet aggregation, but PKA inhibitor Rp-8-Br-cAMPS did not. However, both Rp-8-pCPT-cGMPS and Rp-8-Br-cAMPS reduced inhibition by cordycepin of collagen-induced platelet aggregation. Moreover, cordycepin inhibited $Ca^{2+}-dependent$ phosphorylation of both 47 kDa- and 20 kDa-protein in the presence of both PKG inhibitor and PKA inhibitor. Taken altogether, these results suggest that the inhibitory effect of cordycepin on collagen-induced platelet aggregation is associated with cGMP/PKG- and cAMP/PKA-pathways, and thus cordycepin may be an efficacious intervention against platelet aggregation-mediated thrombotic disease.
For deciphering the cyclic guanosine monophosphate (cGMP) signaling pathway, we employed chemical proteomics to identify the novel target molecules of cGMP. We used cGMP that was immobilized onto agarose beads with linkers directed at three different positions of cGMP. We performed a pull-down assay using the beads as baits on tissue lysates and identified 9 proteins by MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight) mass spectrometry. Some of the identified proteins were previously known cGMP targets, including cGMP-dependent protein kinase and cGMP-stimulated phosphodiesterase. Surprisingly, some of the co-precipitated proteins were never formerly reported to associate with the cGMP signaling pathway. The competition binding assays showed that the interactions are not by nonspecific binding to either the linker or bead itself, but by specific binding to cGMP. Furthermore, we observed that the interactions are highly specific to cGMP against other nucleotides, such as cyclic adenosine monophosphate (cAMP) and 5'-GMP, which are structurally similar to cGMP. As one of the identified targets, MAPK1 was confirmed by immunoblotting with an anti-MAPK1 antibody. For further proof, we observed that the membrane-permeable cGMP (8-bromo cyclic GMP) stimulated mitogen-activated protein kinase 1 signaling in the treated cells. Our present study suggests that chemical proteomics can be a very useful and powerful technique for identifying the target proteins of small bioactive molecules.
Background: We have previously reported that not only cGMP but also 8-Br-cGMP or 8-pCPT-cGMP, specific and potent stimulators of cGMP-dependent protein kinase (cGMP-PK), increased basal L-type calcium current $(I_{Ca})$ in rabbit ventricular myocytes. Our findings in rabbit ventricular myocytes were entirely different from the earlier findings in different species, suggesting that the activation of cGMP-PK is involved in the facilitation of $I_{Ca}}$ by cGMP. However, there is no direct evidence that cGMP-PK can stimulate $I_{Ca}}$ in rabbit ventricular myocytes. In this report, we focused on the direct effect of cGMP-PK on $I_{Ca}}$ in rabbit ventricular myocytes. Methods and Results: We isolated single ventricular myocytes of rabbit hearts by using enzymatic dissociation. Regulation of $I_{Ca}}$ by cGMP-PK was investigated in rabbit ventricular myocytes using whole-cell voltage clamp method. $I_{Ca}}$ was elicited by a depolarizing pulse to +10 mV from a holding potential of -40 mV. Extracellular 8-(4-Chlorophenylthio)-guanosine-3',5'-cyclic monophosphate (8-pCPT-cGMP), potent stimulator of cGMP-dependent protein kinase (cGMP-PK), increased basal $I_{Ca}}$. cGMP-PK also increased basal $I_{Ca}}$. The stimulation of basal $I_{Ca}}$ by cGMP-PK required both 8-Br-cGMP in low concentration and intracellular ATP to be present. The stimulation of basal $I_{Ca}}$ by cGMP-PK was blocked by heat inactivation of the cGMP-PK and by bath application of 8-(4-chlorophenylthio)-guanosine-3',5'-cyclic monophosphate, Rp-isomer (Rp-pCPT-cGMP), a phosphodiesterase-resistant cGMP-PK inhibitor. When $I_{Ca}}$ was increased by internal application of cGMP-PK, IBMX resulted in an additional stimulation of $I_{Ca}}$. In the presence of cGMP-PK, already increased $I_{Ca}}$ was potentiated by bath application of isoprenaline or forskolin or intracellular application of cAMP. Conclusions: We present evidence that cGMP-PK stimulated basal $I_{Ca}}$ by a direct phosphorylation of L-type calcium channel or associated regulatory protein in rabbit ventricular myocytes.
Chemotactic behavior is essential for the survival of animals. However, the mechanism by which animals carry out chemotaxis is poorly understood. To explore the biochemical events underlying chemotaxis, we isolated C. elegans mutants that displayed abnormal chemotactic responses to cAMP, a strong attractant for C. elegans. Based on their responses to other chemoattractants, the mutant animals could be classified into five groups: (1) animals with defective chemotaxis to cAMP only; (2) animals with defective chemotaxis to both cAMP and cGMP; (3) animals with defective chemotaxis to water-soluble attractants; (4) animals with defective chemotaxis to both water-soluble and volatile attractants; and (5) animals with enhanced chemotactic responses. We expect that analyses of these mutants will help understand the molecular mechanisms underlying chemotaxis in C. elegans.
Antiulcer effects of ginseng saponin, acidic polysaccharide and methanol extract of Panax ginseng in the patients and experimental animals were reported. Postulated action mechanisms of ginseng were histamine-Ht receptor blocking and increasing gastric blood flow In the present study, the effect of ginsenosides, the biologically active glycosides of ginseng, on gastric acid secretion was examined using gastric cells isolated from human and rabbit gastric mucosa. Ginseng saponin, ginsenoside $Rb_1$, $Rb_2$, $Rg_1$ and $Rh_2$ were tested in unstimulated as well as stimulated gastric cells. Histamine ($10^4$M) and 3-isobutyl-1-methylxanthine ($10^4$M) were used as secretagogues. To investigate the mechanism of ginsenosides on acid secretion, the levels of cAMP and cGMP were monitored in gastric cells. As a result, high concerltration(1mg/ml) of ginseng saponin showed 73-75% of stimulated acid secretion in control gastric cells. However, ginseng saponin had no effect on unstimulated acid secretion and the levels of cGMP and cAMP in gastric cells. Ginsenoside $Rb_1$, $Rb_2$ and $Rh_2$ significantly inhibited stimulated acid secretion. Gastric cGMP levels were increased by all ginsenosides tested while cAMP levels were increased by all ginsenosides in unstimulated state of gastric cells, but increased by ginsenosides ginsenoside $Rg_1$ and $Rh_2$in stimulated state of gastric cells. The results suggest that inhibition of ginseng saponin on gastric acid secretion represents a complex effect of individual ginsenosides, which produce a range of effect on acid secretion. The inhibition site of ginseng saponin on stimulated acid secretion is postulated as post cAMP levels in acid secretary pathway such as protein phosphorylation or proton pump. Nitric oxide may not be involved in the inhibitory effect of ginseng saponin on stimulated acid secretion.
In Escherichia coli, CRP forms a complex with cAMP and acts as a transcriptional regulator of many genes, including sugar metabolism operons. The E. coli MK2001, which is introduced the altered crp, is functional in the expression of lac, ara and man, in the absence of cAMP. However, the expression of mal gene is fully activated by the addition of cAMP or cGMP. The object of the study is cloning of the sfs (sugar fermentation stimulation) genes, which was involved in regulation of mal gene expression with the altered crp gene, and structural analysis and characterization of the genes at the molecular level. We have cloned 5 different E. coli genes which stimulate the maltose metabolism in a crp, cya::km (MK2001) background. Newly identified genes were designated as sfs. One of the sfs genes (pPC1), located at the 53.2 min map position on the E. coli chromosome, was further analyzed. Expression of the genes, which is involved in maltose metabolism, malQ (amylomaltase), was increased to 5.8-fold in the presence of a plasmid, pAP5, containing the subcloned sfs4 gene. The nucleotide seguence of a common 2,126 bp segment of the pPCM1 was determined and two open reading frames (ORF1 and ORF2) were detected. The ORF1 encodes the sfs4 gene and ORF2 encodes a truncated protein. Potential CRP binding site is located in the upstream of the putative promoter in the regulatory region. Expression of the cloned sfs4 gene was positively regulated by the cAMP-CRP complex.
Potassium channels in human skin fibroblast have been studied as a possible site of Alzheimer disease pathogenesis. Fibroblasts in Alzheimer disease show alterations in signal transduction pathway such as changes in $Ca^{2+}$ homeostasis and/or $Ca^{2+}-activated$ kinases, phosphatidylinositol cascade, protein kinase C activity, cAMP levels and absence of specific $K^+$ channel. However, little is known so far about electrophysiological and pharmacological characteristics of large-conductance $Ca^{2+}$-activated $K^+$ ($BK_{Ca}$) channel in human fibroblast (CRL-1474). In the present study, we found Iberiotoxin- and TEA-sensitive outward rectifying oscillatory current with whole-cell recordings. Single channel analysis showed large conductance $K^{+}$ channels (106 pS of chord conductance at +40 mV in physiological $K^+$ gradient). The 106 pS channels were activated by membrane potential and $[Ca^{2+}]_i$, consistent with the known properties of $BK_{Ca}$ channels. $BK_{Ca}$ channels in CRL-1474 were positively regulated by adenylate cyclase activator ($10{\mu}M$ forskolin), 8-Br-cyclic AMP ($300{\mu}M$) or 8-Br-cyclic GMP ($300{\mu}M$). These results suggest that human skin fibroblasts (CR-1474) have typical $BK_{Ca}$ channel and this channel could be modulated by c-AMP and c-GMP. The electrophysiological characteristics of fibroblasts might be used as the diagnostic clues for Alzheimer disease.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.