Mechanical transmission of barley seedlings with barley yellow mosaic virus (BaYMV) is generally inefficient and is the major constraint for testing cultivar resistance to the virus. To explore mechanical transmission, BaYMV-infected barley plants were grown at different conditions and used as inoculum sources to seedlings of susceptible barley cultivar Baegdong. Extracts prepared from BaYMV-infected Baegdong plants at 47, 53, 74, and 90 days after symptom appearance (DASA) and grown at 10 and $12^{\circ}C$ gave 10, 30, 68 and 76% infection, respectively on inoculated susceptible barley cv. Baegdong seedlings. While Jinyangbori, another susceptible cultivar obtained 95% infection rate inoculated with extracts from 90 DASA disease source and grown at $10/12^{\circ}C$. However, low infection rates were obtained when the virus sources were grown in a greenhouse at $15-18^{\circ}C$. Our results indicate that longer incubation period and lower temperature are required for virus accumulation and stability.
Two distinct and stable isolates of Barley mild mosaic virus(BaMMV) designated as Naju82-S(severe) and Naju82-M(mild) were obtained. These two isolates differed in their symptomatology, virus transmission characteristics and cultivar specificity at various temperature. Thus, these isolates were referred to as strains in this study. BaMMV Naju-S strain showed severe mosaic symptoms accompanied by necrosis on the infected leaves. Naju82-S strain is more virulent demonstrated by shorter incubation period and relatively high virus concentration than Naju82-M strain. Five Korean cultivars were tested for their pathogenicity to different strains based on the rate of infection. Results showed that infection rate of cultivars to both strains did not significantly differed from each other. However, under different temperatures, the pathogenicity on the two cultivars such as cultivars Hopumbori and Sessalbori were significantly affected. Hopumbori was moderately resistant to both strains at $10-12^{\circ}C$ and susceptible at $15-18^{\circ}C$. Similarly, Sessalbori was moderately resistant at $10-12^{\circ}C$ to both strains but distinctly differentiated at $15-18^{\circ}C$ wherein it was resistant to mild strain and highly susceptible to severe strain. Other cultivars including Baegdong, Jinyangbori and Neahanssalbori consistently showed susceptible reaction to both strains at varying temperatures tested in this study.
Barley mild mosaic virus(BaMMV) is a soilborne Bymovirus vectored by root-infecting fungus, Polymyxa graminis. Mechanism of cultivar's resistance to BaMMV in field tests are difficult to assess since resistance could be either due to the virus or to P. graminis, or both. Whereas, available mechanical inoculation methods for BaMMV and other related viruses are labor intensive, give inconsistent results and generally result in low infection rates. Inoculation method using stick with gauze(SWG) was developed for BaMMV. The improved method proved to be simple, efficient, and reliable. The infected leaf tissues were preserved by drying in a frozen state under high vaccum(freeze dried barley infected leaves) to circumvent reduction of virus infectivity during storage. Five Korean barley cultivars were mechanically inoculated with BaMMV-infected sap by the improved method. Infection rates obtained were compared with natural infection. Cultivar Naehanssalbori showed resistance to BaMMV in the field trials but was found highly susceptible in the greenhouse tests by mechanical inoculation, indicating that the field resistance may be possibly due to resistance to P. graminis.
An isolate of barley yellow mosaic virus(BaYMV-HN) obtained from Haenam, Korea was compared with two BaYMV strains. BaYMV-Ⅱ-1 from Japan and BaYMV-G from Germany. The sequence of the 3'-terminal 3817nucleotides[excluding the poly (A) tail] of RNA 1 of BaYMV-HN was determined to start within a long open reading frame coding for a part of the NIa-VPg polymerase(26 amino acids). NIa-Pro polymerase (343 amino acids), NIb polymerase(528 amino acids) and the entire capsid protein(297 amino acids), which is followed by a noncoding region(NCR) of 235 nucelotides. In the partial ORFs, BaYMV-HN shows higher sequence homology with BaYMV-Ⅱ-1(99.5%) than BaYMV-G(92.7%). The 3' non-coding regions of BaYMV-HN(235nt) shows higher nucleotide sequence homology with BaYMV-G(235nt)(99.6%) than BaYMV-Ⅱ-1(231nt)(97.0%). The 3' NIa-Pro protein sequence of BaYMV-HN shows higher amino acid sequence homology with BaYMV-Ⅱ-1(95.0%) than BaYMV-G(93.6%), but, NIb protein sequence of BaYMV-HN shows same all amino acid sequence. The capsid protein sequence of BaYMV-HN(297aa) shows same with BaYMV-Ⅱ-1, and shows higher nucleotide sequence homology with BaYMV-UK (from United Kingdom)(97.3%) than BaYMV-G(96.9%) and G2(96.9%). Difference of capsid protein amino acid were 0-9 between the Japan, United Kingdom and Germany and were 2-6 between all Korean isolates. Many of the amino acid differences are located in the N-terminal regions of the capsid proteins from 1 to 74 amino acid positions.
Testing a large number of samples from field monitoring and routine indexing is cumbersome and the available virus detection tools were labor intensive and expensive. To circumvent these problems we established tissue blot immunoassay (TBIA) method an alternative detection tool to detect Barley mild mosaic virus (BaMMV) and Barley yellow mosaic virus (BaYMV) infection in the field and greenhouse inoculated plants for monitoring and routine indexing applications, respectively. Initially, leaf and stem were tested to determine suitable plant tissue for direct blotting on nitrocellulose membrane. The dilutions of antibodies were optimized for more efficient and economical purposes. Results showed that stem tissue was more suitable for direct blotting for it had no background that interferes in the reaction. Therefore, this technique was referred as direct stem blot immunoassay or DSBIA, in this study. Re-used diluted (1:1000) antiserum and conjugate up to 3 times with the addition of half strength amount of concentrated antibodies was more effective in detecting the virus. The virus blotted on the nitrocellulose membrane from stem tissues kept at room temperature for 3 days were still detectable. The efficiency of DSBIA and RT-PCR in detecting BaMMV and BaYMV were relatively comparable. Results further proved that DSBIA is a rapid, reliable and economical detection method suitable for monitoring BaMMV and BaYMV infection in the field and practical method in indexing large scale of barley materials for virus resistance screening.
Park, Jong-Chul;Noh, Tae-Hwan;Kim, Mi-Jung;Lee, Sang-Bok;Park, Chul-Soo;Kang, Chun-Sik;Lee, Jung-Joon;Kim, Tae-Soo
Research in Plant Disease
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v.16
no.2
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pp.115-120
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2010
In this study, changes in virus disease occurrence and yield were monitored in conventional cropping system(rice-barley) and soybean-barley double cropping system in virus-prone area for 5 years. Also, changes in the density of Polymyxa graminis, a fungal vector, was investigated. In assay tests, mixed infection of Barley yellow mosaic virus (BaYMV) and Barley mild mosaic virus (BaMMV) was observed. Disease severity was in the range of 7~9 in conventional cropping system. In continuous cropping of soybean-barley and 3-yearfallow land, disease severity also was around 7. However, disease severity was reduced to medium level (5) when barley cultivation was paused for one or two years in soybean-barley cropping. When barley cultivation was paused for a year, the density of P. graminis, a fungal vector for BaYMV and BaMMV, reduced in barley root and soil. Similarly, barley growth was also enhanced by adopting fallow seasons. Compared with the fifth year of conventional cropping, the number of tillers per $m^2$ was increased by 158 when barley cultivation was paused for an year in soybean-barley cropping. When soybean and barley were cultivated continuously or complete fallow period was extended to three years, plant height and the number of tillers of barley were decreased. Yield components of barley in soybean-barley cropping were superior to those in rice-barley cropping. Compared with the fifth year of conventional cropping and soybean-barley cropping, culm length of barley was 1.3~2.3 cm higher and the number of tillers per $m^2$ was 36~90 higher when barley cultivation was paused for one or two years. However, those in continuous cropping of soybean-barley and 3-year-fallow land were lower compared with conventional cropping. Similarly, yield was increased when barley cultivation was paused for one or two years in the third, forth, and fifth years when compared with conventional cropping.
Park, Jong-Chul;Kim, Mi-Jung;Lee, Eun-Sook;Park, Chul-Soo;Kang, Chun-Sik;Hyun, Jong-Nae;Lee, Jung-Joon;Kim, Tae-Soo;Kim, Ki-Jong
Research in Plant Disease
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v.16
no.1
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pp.21-26
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2010
Viral diseases, especially Barley yellow mosaic virus (BaYMV) and Barley mild mosaic virus (BaMMV) have been most serious in barley fields. In this study, we investigated the effect of different level of resistance to viral diseases on the plant growth and yield in malting barley. In diagnosis of virus infection, BaYMV and BaMMV were detected in 'Doosan 29' (susceptible), however, 'Jinyangbori' (moderate susceptible) and 'Hopumbori' (moderate) was infected by only BaYMV. Plant height was restrained about 8~29% in overwintered plant regeneration stage depending on the resistant of each cultivar. The culm length damaged also to 9~12% by BaYMV infection. The tiller numbers reduced to 10~14% in overwintering season, however, the head numbers in harvest season more decreased to 26~33%. Heading date was delayed to 3~3 days by the infection. In examination of yield components, 1,000 kernel weight and $\ell$ weight reduced according to culrivar's resistant degrees to 4.0~6.4% and 1.0~4.2%, respectively. The yield of abortive grain was doubled in BaYMV infection comparing to non-infested field. Three varieties tested in the non-infected field over two years were not significantly different for yield potential with ranges of 509kg~632kg/10a. However, significant yield reduction was observed in 'Saessalbori' and 'Baegdong' with ranges of 77~177kg/10a as compared to 'Hopumbori' (467 kg/10a) when tested in the virus-infected field. Yield potentials of these cultivars reduced by 26~43%, respectively, in the virus-infected field as compared to those in the non-infected field.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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