The aim of this study was to optimize staining procedures for muscle fiber typing efficiently and rapidly in bovine and porcine skeletal muscles, such as longissimus thoracis, psoas major, semimembranosus, and semitendinosus muscles. The commercially available monoclonal anti-myosin heavy chain (MHC) antibodies and fluorescent dye-conjugated secondary antibodies were applied to immunofluorescence histology. Two different procedures, such as cocktail and serial staining, were adopted to immunofluorescence analysis. In bovine muscles, three pure types (I, IIA, and IIX) and one hybrid type, IIA+IIX, were identified by the cocktail procedure with a combination of BA-F8, SC-71, BF-35, and 6H1 anti-MHC antibodies. Porcine muscle fibers were typed into four pure types (I, IIA, IIX, and IIB) and two hybrid types (IIA+IIX and IIX+IIB) by a serial procedure with a combination of BA-F8, SC-71, BF-35, and BF-F3. Unlike for bovine muscle, the cocktail procedure was not recommended in porcine muscle fiber typing because of the abnormal reactivity of SC-71 antibody under cocktail procedure. Within the four antibodies, combinations of two or more anti-MHC antibodies allowed us to distinguish pure fiber types or all fiber types including hybrid types. Application of other secondary antibodies conjugated with different fluorescent dyes allowed us to get improved image resolution that clearly distinguished hybrid fibers. Muscle fiber characteristics differed depending on species and muscle types.
Kim, S.M.;Park, M.Y.;Seo, K.S.;Yoon, D.H.;Lee, H.-G.;Choi, Y.J.;Kim, S.H.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.19
no.10
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pp.1496-1502
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2006
Skeletal muscle contains slow and fast twitch fibers. These skeletal muscle fibers express type I and type II myosin, respectively, and these myosin isoenzymes have different ATPase activity. The aim of this study was to investigate protein profiles of bovine skeletal muscles by proteomic analysis. Fifty seven spots of distinct proteins were excised and characterized. The expression of sixteen spots was differed in longissimus dorsi muscle with a minimal 2-fold change compared to biceps femoris muscle. The majority of differentially expressed proteins belonged to metabolic regulation-related proteins such as glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase, triosephosphate isomerase and carbonic anhydrase 3. The real time-PCR assay confirmed an increase or induction of specific genes: RGS12TS isoform, GAPDH, triosephosphate isomerase and carbonic anhydrase. These results suggest that the expression of metabolic proteins is under a specific control system in different bovine skeletal muscle. These observations could have significant implications for understanding the physiological regulation of bovine skeletal muscles.
Muscle fiber characteristics account for meat quality and muscle fibers are mainly classified into three or more types according to their contractile and metabolic properties. However, the majority of previous studies on bovine skeletal muscle are based on myosin ATPase activity. In the present study, the differences in the characteristics of muscle fibers classified by the expression of myosin heavy chain (MHC) among four bovine skeletal muscles such as longissimus thoracis (LT), psoas major (PM), semimembranosus (SM) and semi-tendinosus (ST) and their relationships to beef quality were investigated. MHCs 2x, 2a and slow were identified by LC-MS/MS and IIX, IIA and I fiber types were classified. PM, which had the smallest size and highest density of fibers regardless of type, showed the highest myoglobin content, CIE $L^*$, $a^*$, $b^*$ and sarcomere length (p<0.05), whereas ST with the highest composition of IIX, showed high shear force and low sarcomere length (p<0.05). The correlation coefficients between muscle fiber characteristics and meat quality showed that type IIX is closely related to poor beef quality and that a high density of small-sized fibers is related to redness and tenderness. Therefore, the differences in meat quality between muscles can be explained by the differences in muscle fiber characteristics, and especially, the muscles with good quality are composed of more small-sized fibers regardless of fiber type.
An analytical method for the simultaneous determination of 9 quinolones (QNs) in porcine, chicken, and bovine muscles was developed and validated using liquid chromatography-fluorescence detector (LC-FLD). The samples were extracted using a liquid-liquid extraction (LLE) process. Chromatographic separation was achieved on a reverse phase $C_8$ column with a gradient elution using a mobile phase of 200 mM ammonium acetate buffer (pH 4.5) and acetonitrile (ACN). The proposed method was validated according to the Food and Drug Administration (FDA) guideline for bioanalytical assay procedures. Recoveries of QNs were 83.1-111.9% with relative standard deviations (RSDs) below 15%. Linearity within a range of 30-500 ${\mu}g/kg$ was obtained with the correlation coefficient ($R^2$) of 0.9967-0.9999. The limits of detection (LOD) were 1-16 ${\mu}g/kg$. These values were lower than the maximum residues limits (MRLs) established by the European Union (EU). The present method was successfully applied to determine QNs in edible muscles.
Rusman, H.;Gerelt, B.;Yamamoto, S.;Nishiumi, T.;Suzuki, A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.20
no.6
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pp.994-1001
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2007
Changes in shear force value, transverse sections, myofibrils and intramuscular connective tissue of bovine skeletal muscle exposed to the combination of high-pressure up to 400 MPa and heat (30 and $60^{\circ}C$) were studied. The shear force value decreased by pressure-heat treatment up to 200 MPa at 30 and $60^{\circ}C$, and then slightly increased over 200 MPa at $30^{\circ}C$. Shear force values of treated muscles were lower than those of untreated ones. Gaps between muscle fibers in the untreated muscle were a little clear, and then they became very clear in the treated muscles up to 200 MPa at 30 and $60^{\circ}C$. However, the gaps reduced significantly over 200 MPa at $30^{\circ}C$. The remarkable rupture of I-band and loss of M-line materials progressed in the myofibrils with increasing pressure applied. However, degradation and loss of the Z-line in myofibrils observed in the muscle treated at $60^{\circ}C$ was not apparent in the muscle treated at $30^{\circ}C$. The length of the sarcomere initially contracted by pressure-heat treatment of 100 MPa at $30^{\circ}C$ seemed to have recovered with increase of the pressure up to 400 MPa. In the muscle treated at $60^{\circ}C$, the length of sarcomere gradually decreased with increase of the pressure up to 400 MPa. In the treated muscles, changes in the honeycomb-like structure of endomysium were observed and accelerated with increase of the pressure. A wavy appearance clearly observed at the inside surface of endomysium in the untreated muscles gradually decreased in the treated muscles with increase of the pressure. Tearing of the membrane was observed in the muscles treated over 150 MPa at $30^{\circ}C$, as observed in the sample pressurized at 100 MPa at $60^{\circ}C$. The roughening, disruption and fraying of the membrane were observed over 200 MPa at $60^{\circ}C$. From the results obtained, the combination of high-pressure and heat treatments seems to be effective to tenderize tough meat. The shear force value may have some relationship with deformation of intramuscular connective tissue and myofibrils.
Journal of the korean veterinary medical association
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v.24
no.2
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pp.92-97
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1988
One hundred eighteen cattle in the slaughter houses of kyeong ki-do were examined for Sarcocystis cruzi using macroscopic and microscopic method of detection. Sausage-shaped Sarcocystis were detected from the heart, diaphragm, tongue, masseter, liver, kid
Roh, Su Gwon;Jang, Yun-Ho;Kim, Jongho;Lee, Kyunghyun;So, Byungjae;Choi, Eun-Jin
Korean Journal of Veterinary Research
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v.60
no.2
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pp.85-88
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2020
A 12-month-old domestic rabbit died suddenly without specific clinical signs. Gross examination revealed irregular yellowish hepatic nodules with pus in the submandibular muscles, lungs, uterus, and small intestines. Histopathological examination of the liver showed granulomatous inflammation with acid-fast-positive bacteria. Mycobacterium bovis SB1040 was identified by polymerase chain reaction and spoligotyping, and Pasteurella multocida was isolated from the multiple lesions. This report demonstrates the pathological features of rare bovine tuberculosis (bTB) in a domestic rabbit, the first case in the Republic of Korea. To ensure public safety, we recommend routine monitoring of rabbits to control the incidence of bTB.
330 Samples of the slaughtered cattle heart muscle were collected from the abattoirs of five regions in Kangwon - do to reveal the frequency of sarcocystis infections during January through December in 1991. The samples were inspected for bradyzoites by the trypsin digestion technique and the possitive samples were fed to dogs and cats for the detection of sporocysts shed in the feces. The results obtained were summarized as follows : 1. The infection rate of bovine Sarcocystis investigated from 330 samples was 43.6%. 2. It revealed that the infection rate of Sarrocystis increased gradully with the advance in the age, 14.5% in below two years, 26.1% in the three years, 30% in four years, 54.7% in five years, 74.4% in six years, 90% in seven years and 100% in older than eight years. 3. The cyst walls detected out from the heart muscles were less than l${\mu}{\textrm}{m}$ in thickness and the size of bradyzoites were $11.8{\times}2.8{\mu}m$ in average. 4. The size of sporocysts shed in the feces of dogs were $15.8{\times}9.8{\mu}m$ in average and the prepatent periods ranged from 12 to 16days. 5. Sarcorystis found in the bovine heart muscles were identified as Sascocystis cruzi ( Hasselman, 1923) , wenyon, 1926.
The present paper describes the effects of pressure and post-mortem aging treatments on in situ proteasome activity in rabbit and bovine skeletal muscles. Synthetic peptide hydrolyzing activity of rabbit proteasomes remained in the muscle after exposure to pressures up to 100 MPa. However, when a pressure of 400 MPa or more was applied, proteasomes were markedly inactivated. The extraction of proteasomes from excessively pressurized muscle appeared to be difficult. Proteasomes in aged muscle remained relatively stable throughout the aging process, with activity after 168 h (7 days) being 35%, 48%, 53% and 31% of the 0 h post-mortem LLVY, LSTR, AAF and LLE total hydrolyzing activities, respectively. The synthetic peptide hydrolyzing activities of bovine muscle proteasomes were similar to those of rabbit skeletal muscle proteasomes. The results suggest that synthetic peptide hydrolyzing activity remains in muscle exposed to relatively low pressures. Furthermore, it is known that high-pressure treatment induces fragmentation of myofibrils, modification of actin-myosin interaction and activation of intramuscular proteinases, cathepsins and calpains. Thus, proteasomes are probably involved in the tenderization process in combination with other intramuscular proteinases under high-pressure conditions. Our findings confirmed that proteasomes play a role in meat tenderization induced by high-pressure treatment or aging.
The objective of this study was to determine the relationship between composition of muscle fiber types and meat quality traits of eight major muscles from Hanwoo steers. Longissimus lumborum (LL), psoas major (PM), semimembranosus (SM), semitendinosus (ST), gluteus medius (GM), triceps brachii (TB), rectus abdominis (RA) and superficialis flexor (SF) muscles were obtained from 9 Hanwoo steers and subjected to histochemical analysis. There were significant (p<0.05) differences in fiber number percentage (FNP) and fiber area percentage (FAP) of fiber types among these 8 major muscles. SF had the highest FNP of type I (55.9%), followed by PM (46.4%), TB (45.4%), RA (38.5%), LD (36.8%), GM (36.0%), SM (22.2%), and ST (18.8%). FAP of type IIB ranged from 9.9% in SF to 58.7% in ST. Meat quality traits, including fat content, myoglobin content, collagen content, CIE $L^*$ and $a^*$, drip and cooking loss, sarcomere length and Warner-Bratzler shear force, were all significantly (p<0.05) different among these muscles. Due to such diversities among these 8 muscles, lack of correlations were found between fiber type composition and meat quality traits. These results suggest that correlation for each individual muscle should be used to improve meat quality and profitability of retail beef cuts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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