Jose Roberto Aguirre-Sanchez;Nohemi Castro-del Campo;José Andres Medrano-Felix;Alex Omar Martínez-Torres;Cristobal Chaidez;Jordi Querol-Audi;Nohelia Castro-del Campo
Journal of Veterinary Science
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v.25
no.4
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pp.42.1-42.12
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2024
Importance: Bovine mastitis, predominantly associated with gram-positive Staphylococcus aureus, poses a significant threat to dairy cows, leading to a decline in milk quality and volume with substantial economic implications. Objective: This study investigated the incidence, virulence, and antibiotic resistance of S. aureus associated with mastitis in dairy cows. Methods: Fifty milk-productive cows underwent a subclinical mastitis diagnosis, and the S. aureus strains were isolated. Genomic DNA extraction, sequencing, and bioinformatic analysis were performed, supplemented by including 124 S. aureus genomes from cows with subclinical mastitis to enhance the overall analysis. Results: The results revealed a 42% prevalence of subclinical mastitis among the cows tested. Genomic analysis identified 26 sequence types (STs) for all isolates, with Mexican STs belonging primarily to CC1 and CC97. The analyzed genomes exhibited multidrug resistance to phenicol, fluoroquinolone, tetracycline, and cephalosporine, which are commonly used as the first line of treatment. Furthermore, a similar genomic virulence repertoire was observed across the genomes, encompassing the genes related to invasion, survival, pathogenesis, and iron uptake. In particular, the toxic shock syndrome toxin (tss-1) was found predominantly in the genomes isolated in this study, posing potential health risks, particularly in children. Conclusion and Relevance: These findings underscore the broad capacity for antibiotic resistance and pathogenicity by S. aureus, compromising the integrity of milk and dairy products. The study emphasizes the need to evaluate the effectiveness of antibiotics in combating S. aureus infections.
The objective of this study was to detect three non-halal meat products consisted of dog, pork, and rat species in meatball using novel multiplex-PCR with 12S rRNA gene as target sites. A total of 33 self-made meatballs were used, and they were grouped into eleven types of meatball based on meat species origin contained in the meatballs. Each type consisted of three meatballs. Extraction of genomic DNA from the meatballs was used as a DNA template for simplex-, duplex-, and multiplex-PCR processes. The result of simplex-PCR, duplex-PCR, and multiplex-PCR showed that the 12S rRNA primer gene successfully amplified DNA for each species bovine, dog, pig, and rat, which are respectively indicated by 155, 244, 357, and 491 bp of DNA bands. In addition, multiplex-PCR with 12S rRNA gene primers can be uniquely and accurately used for detection bovine, dog, pig, and rat species on beef meatball in one reaction.
Constitutive cyclooxygenase (COX-I) is present in cells under physiological conditions, whereas inducible cyclooxygenase (COX-II) is induced by some cytokines, mitogens, and endotoxin presumably in pathological conditions such as inflammation. We have evaluated the inhibitory effects of solvent fractionated extracts of natural products on the activities of COX-I and COX-II. Oxygen uptake COX assay was performed, as a primary screening from the tissue extracts of bovine seminal vesicles (BSV), by monitoring the initial rate of oxygen uptake using an oxygen electrode. Additionally, we evaluated plant extracts for the inhibitory effects of COX-I (in HEL cells) and COX-II (in lipopolysaccharide activated J774A.1 macrophages) using thin layer chromatography of prostanoids produced from $^{14}C-labelled$ arachidonic acid (AA). The use of such models of COX-I and COX-II assay will lead to the identification of specific inhibitors of cyclooxygenases with presumably less side effects than present therapies. Inhibitory effects of 50 kinds of plant extracts on the COX-I and COX-II activities were determined and the active fractions were found in the ethyl acetate fractions of Dryopteris crassirhizoma (roots), Amomum cardamomum (roots), Triticum aestivum (seeds), Perilla sikokiana (leaves), Anemarrhena asphodeloides (roots). Especially, the ethyl acetate fraction of Dryopteris crassirhizoma (roots), which exhibited the strong inhibition against BSV COX $(IC_{50},\;65.4\;{\mu}g/ml)$, COX-I $(IC_{50},\;8.5\;{\mu}g/ml)$, and COX-II $(IC_{50},\;17.2\;{\mu}g/ml)$, is under investigation to isolate active principles using activity-guided fractionation method.
Injection of bovine growth hormone (bGH) to lactating dairy cows increases milk yield and yields of milk components including fat. It is generally believed that most of the anabolic effects derived from bGH in animal tissues are primarily mediated by IGF-1. IGF-1 is a strong anabolic peptide in the plasma of animals and exerts mitogenic and metabolic effects on target cells. Contrary to most protein hormones, the majority of IGF-1 in circulation is bound to the binding proteins (IGFBPs) which are known to be responsible for modifying the biological actions of IGF-1, thus making determinations of IGF-1 actions more difficult. On the other hand, fat is a major milk component and the greatest energy source in milk. Currently, the fat content of milk is one of the major criteria used in determining milk prices. It has been known that flavor and texture of dairy products are mainly affected by milk fat and its composition. Acetyl-CoA carboxylase (ACC) is the rate limiting enzyme which catalyzes the conversion of acetyl-CoA to malonyl-CoA for fatty acid synthesis in 1ipogenic tissues of animals including bovine lactating mammary glands. In addition to the short-tenn hormonal regulation of ACC by changes in the catalytic efficiency per enzyme molecule brought about by phosphorylation and dephosphorylation of the enzyme, the long-term hormonal regulation of ACC by changes in the number of enzyme molecules plays an essential role in control of ACC and lipogenesis. Insulin, at supraphysiological concentrations, binds to IGF-1 receptors, thereby mimicking the biological effects of IGF-1. The receptors for insulin and IGF-1 share structural and functional homology. Furthermore, epidermal growth factor increased ACC activity in rat hepatocytes and adipocytes. Therefore, it can be assumed that IGF-1 mediating bGH action may increase milk fat production by stimulation ACC with phosphorylation (short term) and/or increasing amounts of the enzyme proteins (long term). Consequently, the main purpose of this paper is to give the readers not only the galactopoietic effects of bGH, but also the insight of bGH action with regard to stimulating milk fat synthesis from the whole body to the molecular levels.
A simple and rapid high-performance liquid chromatography assay for the determination of residual novobiocin levels in bovine, porcine, chicken, flatfish and japanese eel muscle has been developed and validated. The separation condition for HPLC/UV was optimized with phenyl hexyl ($4.6{\times}150mm$, $5{\mu}m$) column with 10 mM monobasic sodium phosphate buffer (pH 2.5)/acetonitrile (50/50, v/v) as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min and detection wavelength was set at 254 nm. Residues were extracted from tissue by blending with methanol and lipid materials were removed with n-hexane. Then, the methanol extract was evaporated to dryness under a nitrogen stream, reconstituted in the mobile phase. Aliquot of the organic extract was decanted and filtered through $0.45{\mu}m$ syringe filter. The $20{\mu}L$ of the resulting solution was injected into the HPLC system. The calibration ranges were $0.5{\sim}5{\mu}g/g$ and calibration curves were linear with coefficients of correlation better than 0.95. The limits of quantification were $0.5{\mu}g/g$ for all muscles. The recoveries of bovine, porcine, chicken, flatfish and japaneseel muscles were 99.8%, 102.4%, 91.0%, 104.0% and 93.0%, respectively. The procedures were validated according to the CODEX guideline, determining specificity, linearity, accuracy, precision, quantitation limit and recovery.
The analytical method of trace toxic metals in livestock products was confirmed and validated through certified reference material (CRM) and the international proficiency tests. There are some difficulties to determine low levels of toxic metals in livestock products because of interferences due to the matrix. The recoveries of CRM (NIST 1577c) ranged from 73.9 to 119% for lead and from 86.4 to 111% for cadmium in bovine liver. The international proficiency tests were carried out with the milk powder and cocoa powder samples including metals provided by Food Analysis Performance Assessment Scheme (FAPAS$^{(R)}$, UK). The test samples were prepared by microwave digestion using solution of $HNO_3:H_2O_2:H_2O$ (v/v/v = 5 : 2 : 4) and analyzed by ICP/MS. The analytical result of cadmium in milk powder was $121{\mu}g/kg$ with -0.3 of the z-score compared to the assigned value of $131{\mu}g/kg$ by FAPAS$^{(R)}$. The analytical results of lead and cadmium in cocoa powder were $29.2{\mu}g/kg$ and $97.6{\mu}g/kg$, respectively, which satisfied the assigned values of $34.2{\mu}g/kg$ for lead and $126{\mu}g/kg$ for cadmium by FAPAS$^{(R)}$. It is verified that the analytical method is accurate and reliable to determine trace lead and cadmium in livestock products by microwave digestion and ICP/MS.
A total of 137 strains of Staphylococcus aureus were isolated from dairy cow's milk with subclinical mastitis from 33 herds in 5 provinces and 36 strains of S aureus from clinical mastitis from 4 herds where the mastitis were severe problem. Arbitrary primed polymerase chain reactions with 10 bp oligonucleotide primer were performed and the PCR products were analysed with image analyzer, The S aureus strains were genotyped into 20 distinct DNA fingerprinting profiles. The size of PCR products ranged from 163 to 2,479 bp and PCR products of 506, 770, 784 and 2,479 bp were the most prevailing bands. Genotype 3 was founded in all 5 provinces. The various genotypes were identified in newly founded dairy herds, however, only one or two genotypes were identified in the closed herds. In clinical mastitis, only a limited number of different S aureus genotype was founded in each of the herds in comparision with subclinical mastitis. The results demonstrated that PCR-based DNA fingerprinting analysis of S aureus strain can be used to study epidemiology of mastitis, in addition, common genotype in geographic region can be useful for the development of an effective S aureus bacterin.
The ether extract from the roots of angelica clahurica was found to inhibit bovine lens aldose reductase (BLAR0 activity in vitro by 100% at 100.mu.g/ml. Systematic fractionation of the ether soluble fraction and subsequent active frctions monitorede by bioassy led to isolation of four furanocoumarins, isoimperatorin (I0, imperatorin (II), ter-O-methyl byakangelicin (III) and byakangelicin (IV), among which compound III and IV were identified as potential AR inhibitors, their $IC_{50}$ values being $2.8{\mu}M{\;}and{\;}6.2{\mu}M$, respectively. Galactosemic cataract formation tors, in rats treated with 40 g/kg/day of galactose was blocked almost completely throughout the exeprimental periods up to 44 days by i.p. administrations of byakangelicin (IV) at 50 mg/kg/day. In coincidence with the inhibitory action on cataract formation, the galactitol accumulation in rats treated with byakangelicin (IV) was found to be markedly prevented by approximately 80.5% compared to those of the contro. These results indicate that byakangelicin (IV), as a main principle of this plant, possesses high potential for a clinically useful drug of the future which prevents and/or improves sugar cataract as well as diabetic complications.
This study was conducted by using the ICP-AES (Inductively Coupled Plasma - Atomic Emission Spectrometry) to investigate the seasonal changes of copper and manganese content in the raw bovine milk. From July 2003 to June 2004, the milk samples were collected from the two geographical locations, Chungcheong-do and Jeolla-do, in Korean peninsula. Copper (Cu) content was determined in the range of min. 10.10 to max. 21.00 ${\mu}g$/100 mL (13.79 ${\mu}g$/100 mL) in spring, 5.06 to 15.41 (10.17) in summer, 5.04 to 19.70 (10.70) in autumn and 6.96 to 17.90 (12.11) in winter. For manganese (Mn), 3.00 to 8.30 (4.87) in spring, 2.30 to 6.44 (3.75) in summer, 2.81 to 6.04 (3.82) in autumn and 2.25 to 9.02 (4.48) in winter. Those data have shown that levels of copper and manganese was relatively constant but higher in Spring than other seasons, suggesting that the levels were not affected by seasons and different locations in Korea.
For an effective solid-phase labelling of protein with $^{125}I$, studies on the immobilization of lactoperoxidase(LPO) on the inner wall of polystyrene tubes were carried out. Labelling of bovine serum albumin(BSA) and insulin was also practiced using the LPO immobilized tubes. The immobilized enzyme of about $2.5{\mu}g/tube$ was sufficient for small scale labelling since the results of radio-paper chromatography of the labelling mixture of insulin indicated that the yields were sufficiently high(80%) even in the reactions conducted at room temperature for 60 sec. The results of the Sephadex column chromatography indicated that the labelled products were not contaminated with $LPO-^{125}I$, and the radiochemical purity of the products was more than 90%. In considering the general trend that the $^{125}I$ labelled protein obtained by using LPO maintains its intactness better than those obtained by using chloramine-T, together with the tendency of yield enhancing with increase of reactants-concentration, the LPO immobilized tube method is estimated to be one of the simple methods of labelling. The product might be applicable without further purification.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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