Purpose: The aim of this study was to evaluate the preclinical results of 2 types of commercially available deproteinized bovine bone mineral (DBBM) when applied to alveolar bone defects in dogs. Methods: This study was conducted using 6 beagles. Alveolar defects in the mandible were formed and filled with 2 DBBMs produced by a similar procedure. Defects were randomly assigned to be filled using DBBM 1 or 2. All defects were covered with a collagen membrane and had a healing period of 12 weeks. After the dogs were sacrificed, histological, histomorphometric, and linear/volumetric analyses were performed. Results: Both DBBM groups showed similar histological findings, demonstrating that bone remodeling had occurred and new bone had formed. The residual bone particles were surrounded by newly formed vital bone. In the histomorphometric analysis, the ratio of the area of vital bone and residual bone substitute in DBBM 2 (38.18% and 3.47%, respectively) was higher than that of DBBM 1 (33.74% and 3.41%, respectively), although the difference was not statistically significant. There were also no statistically significant differences between both groups in linear and volumetric analyses using micro-computed tomography scans and digitized images of dental casts. Conclusions: In the present study, DBBM 1and 2, which were produced by similar processes, showed similar results in histological, histomorphometric, and volumetric analyses. Further studies are needed to identify more specific differences between the 2 DBBMs.
Most previous studies using ultrasound for osteoporosis diagnosis have employed ultrasound in a frequency range of 0.2-1 MHz. In this study, acoustic properties of the 12 defatted bovine cancellous bone specimens were investigated in vitro. Speed of sound (SOS) and broadband ultrasonic attenuation (BUA) were measured using three matched pairs of transducers with the center frequencies of 1, 2.25, and 3.5 MHz, respectively, in order to cover a broad frequency range of 0.5-2 MHz. The relative orientation between ultrasonic beam and bone specimens was the mediolateral (ML) direction of the bovine tibia. SOS showed significant linear positive correlations with apparent density for all three pairs of transducers of 1 MHz, 2.25 MHz, and 3.5 MHz, respectively. BUA showed relatively weak correlations with apparent density for the pairs of transducers of 1 MHz and 2.25 MHz. Furthermore, in the measurement with the pair of 3.5 MHz transducers, BUA was independent of apparent density. SOS and BUA were only weakly correlated with each other. The linear combination of SOS and BUA showed significant correlations with apparent density. These results suggest that the frequency range up to 1.5 MHz may be also useful in the osteoporosis diagnosis.
Alveolar ridge defects may limit or restrict placement of implants. The purpose of this study was to evaluate clinical and histopathologic results which occur following guided bone regeneration using platelet-rich plasma, bovine bone powder and e-PTFE membrane in the localized alveolar bone defects. Ten patients who required guided bone regeneration in implant placemnet, were slelected. Alveolar crest height and width were measured at baseline and, afer 2nd surgery 5 months later At 5 months , we obtained histopathological results as follows: 1. Alveolar crest height was an average of $8.20{\pm}3.74$ mm preoperatively and decreased to an average of $7.40{\pm}1.84$ mm postoperatively. There was no significant difference. 2. Alveolar crest width was an average of $4.25{\pm}2.03$ mm preoperatively and significantly increased to an average of $7.20{\pm}2.44$ mm postoperatively (P<0.01) 3. The change of Alveolar crest height and width were $0.80{\pm}1.40$ mm, $2.95{\pm}1.09$ mm 4. Histopathological evaluations revealed new bone formation with graft material and laminated bone containing the presence of osteocyte-like cell In conclusion, guided bone regeneration using platelet-rich plasma, bovine bone powder and e-PTFE membrane would provide a viable therapeutic alternative for implant placement in the localized alveolar defect or implant failure
Transplanted cortical bone grafts of freeze-dried bones also function as sustaining for defected bones, however, it has less strength and is fragile without rehydration. In this study, strength and stiffness of freeze-dried bone from bovine cortical bones were evaluated by three point bending test according to different time frames such as rehydration times of 0.5, 3, 6, 12 and 24 hrs in electrolyte solution and was compared with those of frozen bones. The strength and stiffness of frozen bone were $264.4\pm36.7$ MPa, $17.0\pm1.5$ GPa, respectively. The strength and stiffness of freeze-dried bone which fat was removed by treatments of chloroform-methanol solutions for 6 days, then was freeze-dried at $-80^{\circ}C$ and sterilized with ethylene oxide gas, were $224.9\pm27.6$ MPa, $19.2\pm2.8$ GPa, respectively. The strength and stiffness of feeze-dried bone were decreased 15.0% and increased 13.2% than these of frozen bone, respectively. The strength and stiffness of freeze-dried bone rehydrated for 6 hrs were restored to 96.0% strength and 99.2% stiffness of frozen bone. The rehydration time of freeze-dried bone which had the highest strength and stiffness was six hours and three hours, respectively. The results of the mathematica program for the variation of the strength and stiffness showed 3 hours and 30 minutes of rehydration time in electrolyte solution for the best condition in the strength and stiffness which was adequate to treat freeze-dried cortical bone.
Many natural medicines have been studied for their capacity and effects of antibacterial, anti-inflammatory and regenerative potential in periodontal tissues. Safflower seed has been traditionally used as a drug for treatment of bone fracture in oriental medicine. The purpose of the present study was to compare the effects of safflower seed extract and bone substitute on bone formation and regeneration in artificial defects in mongrel dogs. The bony defects were made with round bur at mandible and tibia. Extracts of safflower seed and bovine bone were placed directly at each defect for experimental group, and the defect of control group was sutured without any other treatment. Experimental animals were sacrificed at 8 weeks. And then histopathologic reading and histomorphometric study was done. There was not significant differences between control and experimental groups in osteoclastic activity and infiltration of inflammatory cells. However, new capillary proliferation, fibrosis and new bone formation were prominent in safflower seed extract group. The mandibular defects of safflower seed extract group were healed with dense connective and bony tissues, and endochondral bone formation was observed in tibial defect of safflower seed extract group only. New bone area of safflower seed extract group was more significantly increased than that of control and that of bone substitute group. These results indicate that direct local application of safflower seed extracts on bony defects seems to reduces the early inflammatory response and to promotes the bone regeneration.
본 연구의 목적은 골절 위험도가 높은 대퇴골에서 음속 및 광대역 초음파 감쇠와 같은 음향특성과 골밀도 사이의 상관관계를 조사하는 것이다. 이를 위해 0.5 및 1.0 MHz의 중심주파수를 갖는 두 쌍의 초음파 트랜스듀서와 함께 투과법을 이용하여 생체 외 조건에서 15개의 소 대퇴골 해면질골 샘플의 음속 및 광대역 초음파 감쇠를 측정하였다. 또한 마이크로 컴퓨터 단층촬영법을 이용하여 해면질골 샘플의 단위체적당 골밀도를 측정하였다. 골밀도는 0.5 및 1.0 MHz 초음파 트랜스듀서를 이용하여 측정된 음속 및 광대역 초음파 감쇠와 모두 강한 상관관계를 나타냈으며, 골밀도와 0.5 MHz 초음파 트랜스듀서를 이용하여 측정된 광대역 초음파 감쇠 사이에 가장 높은 상관관계가 존재하였다. 이와 같은 결과는 생체 외 조건의 대퇴골에서 측정된 음향특성이 대퇴골의 골밀도를 예측하기에 충분한 지표라는 것을 의미한다.
The ultimate goal of periodontal therapy is to promote the regeneration of lost periodontal tissue, there have been many attempts to develop a method to achieve this goal, hut none of them was completely successful. The purpose of this study is to evaluate the effects of Bio-Oss(R) on alkaline Phosphatase (ALP) activity in human fetal osteoblasts (hFOB1). The results of this study were as follows, in ALP Activity, 100 ${\mu}g/ml$ Bio-Oss(R) treated group showed significantly increased value than negative control group, but positive group($10^{-7}$ M dexamethasone treated group) showed the highest ALP activity at 3 day. In mineralization assay, numerous mineralized nodules were identified as darkly stained spots in 100${\mu}g/ml$ Bio-Oss(R) treated group than two control groups, whereas a small number of mineralized nodules were showed in the positive control. ALP may relate to the initial phase of bone nodule formation. On the basis of these results, this study showed Bio-Oss(R) is capable of accelerating new bone formation through hFOBl differentiation in vitro.
The ultimate goal of periodontal treatment is to regenerate the lost periodontal apparatus. Many studies were performed in developing an ideal bone substitute. Anorganic bovine-derived xenograft is one of the bone substitute, which were studied and have been shown successful for decades. The aim of this study is to evaluate the effect anorganic bovine-derived xenograft. Total of 20 patients, with 10 patients receiving only modified widman flap, and the other 10 receiving anorganic bovine-derived xenograft and flap surgery, were included in the study. Clinical parameters were recorded before surgery and after 6 months. The results are as follows: 1. The test group treated with anorganic bovine-derived xenograft showed reduction in periodontal pocket depth and clinical attachment level with statistically significance(p<0.001) after 6 months. The control group treated with only modified Widman flap showed reduction only in periodontal pocket depth with statistically significance(p<0.001) after 6 months. 2. Although periodontal probing depth change during 6 months did not show any significant differences between the test group and the control group, clinical attachment level gain and re-cession change showed significant differences between the two groups(p<0.05). On the basis of these results, anorganic bovine-derived xenograft improves probing depth and clinical attachment level in periodontal intrabony defects. Anorganic bovine-derived xenograft could be a predictable bone substitute in clinical use.
We tried to extract bone morphogenetic protein (BMP) from the freeze-dried bovine cortical bone (FBCB) for bone graft, which were defatted with chloroform-methanol for 20 days, freeze-dried at $-80^{\circ}C$ for 7 days and sterilized by ethylene oxide gas. Two kg of FBCB were pulverized in a wheel mill to $0.5-2.0mm^3$ cubic in size. The bone particles were demineralized in 0.6N HCI for 10 days at chloroform-methanol$4^{\circ}C$ and defatted with chloroform-methanol for 6 hours at room temperature, which was going to be defatting and demineralized cortical bone (DDM). For extracting BMP, DDM was agitated continuously through 72 hours with magnetic stirrer at $4^{\circ}C$ into 12 times of volume of 6 M guanidine hydrochloride (Gdn-HCl) solution containing proteinase inhibitors to protect BMP such as 2mM N-ethylaleimide, 1mM iodoacetic acid, 1mM phenylmethylsulfonyl fluoride and a sterilizer, 1mM sodium azide. The extraction procedure was repeated for three times. All extracted solution was centrifuged at 10,000 rpm for 30 min and then, the supernatant was dialyzed with 12 times of volume of deionized water at $4^{\circ}C$ for 24-72 hours, which cut off below 6,000-8,000 molecular weight. The dialyzed specimen contained crude-BMP was centrifuged, freeze-dried, and weighted. Through these processing, we could obtained $84.9\%$ as FBCB, $17.8\%$ as DDM and $0.71\%$ as crude-BMP from the wet cortical bone without cancellous bone, marrow and muscles. The crude-BMP were obtained $68.3\%$ from the first extraction, $29.6\%$ from secondary and $2.1\%$ from tertiary, respectively. It was suggested that high yield of crude-BMP migth be explained by three-time repetition of the extraction processing for crude-BMP with Gdn-Hcl sol.
우골대체 Ca공급원으로서 참다랑어 골분과 이의 가공처리된 형태에 따른 Ca이용성을 흰쥐의 골격대사에 근거하여 비교하였다. 실험군은 \circled1 정상칼슘(0.5%)을 급여한 CC(CaCO$_3$; 대조군) \circled2 TB(bluefin tuna bone powder) \circled3 CT(citrated bluefin tuna bone powder) \circled4 BB(bovine bone powder) \circled5 CL(calcium lactate, 유산칼슘) \circled5 저칼슘을 급여한 LC(0.15% CaCO$_3$, 탄산칼슘)으로 구별하였다. 우골분을 섭취한 BB군의 체중 증가가 유의하게 높았으며, 구연산 처리된 참다랑어 골분(CT) 및 칼슘부족 식이를 급여한 LC군에서 체중증가가 낮았다. 식이 섭취량도 우골분(BB)군에서 가장 높았으며, 구연산처리된 참다랑어 골분(CT)군과 유산칼슘(CL)군에서 유의하게 낮은 섭취량을 보였다. 저칼슘식이인 LC군은 변으로 배설되는 양이 다른 정상식이군에 비해 최소화되어 흡수율이 최고치를 나타냈으나 칼슘 보유량은 가장 낮았다. 뇨 칼슘배설량은 정상칼슘군 중 참다랑어 골분(TB)군에서 유의하게 낮았고 유산칼슘(CL)군에서 높은 값을 보였지만 체내 칼슘보유량은 칼슘급원에 따른 차이를 보이지 않았다. 칼슘급원에 따른 변 칼슘 배설량과 칼슘흡수량은 차이가 없었다. 혈중의 calcitonin농도는 저칼슘군(LC)을 비롯한 탄산칼슘(CC)군과 유산칼슘(CL)군에서 유의하게 낮았으며, 참다랑어골분(TB)군, 구연산처리된 참다랑어골분(CT)군, 우골분(BB)군에서는 높은 수치를 보였고, PTH와 osteocalcin 농도는 실험군 간에 차이를 보이지 않았다. 뇨의 DPD 수치는 LC군(저칼슘식이군)에서 유의하게 높았고, 정상수준의 칼슘을 섭취한 각 군에서는 차이를 나타내지 않았다. 대퇴골의 습윤무게는 참다랑어골분(TB)군과 구연산처리 된 참다랑어 골분(CT)군에서 높은 수치를 나타내었고, 건조후의 무게는 저칼슘군(LC)을 제외한 정상수준의 칼슘 투여군 간에 차이가 없었다. 대퇴골의 회분 함량은 정상수준의 칼슘식이군들에 비해 저칼슘식이인 LC군에서 유의하게 낮았다. 체중 100g 당의 대퇴골의 칼슘함량은 저칼슘식이(LC)군에서 유의적으로 낮았고 칼슘급원에 따라 차이를 나타내지 않았다. 대퇴골의 골밀도 측정 결과 저칼슘식이인 LC군은 정상식이군에 비해 골밀도가 유의하게 낮았으며, 동일한 정상수준의 칼슘이 공급된 실험군 사이에서는 참다랑어골분(TB)군의 골밀도가 가장 높은 수치를 보였다. 본 연구결과 여러 가지 칼슘급원에 따른 흰쥐의 골격대사는 큰 차이를 나타내지 않았으며, 저칼슘군과의 차이가 두드러져 양적인 면에서의 칼슘공급의 중요성을 지적할 수 있겠다. 대퇴골의 중량이나 회분, 칼슘 및 대퇴골의 골밀도 결과로 보아 참다랑어 골분은 탄산칼슘군이나, 기존에 칼슘 급원으로 사용해 오던 우골분수준으로 뼈의 건강유지 면에서 긍정적인 가치를 부여할 수 있는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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