This study was designed to identify the effects of Reynoutria Japonica on antibacterial activity aganist Bordetella pertussis ATCC 9797 which is cause of whooping cough. The ethanol- and water-extracts of more than 80 oriental herbal medicine were Investigated by Kirby -Bauer method to determine their inhibitory effects on growth of B. pertussis ATCC 9797 in vitro. For that Reynoutria Japonica was selected. The ethanol-soluble extract of Reynoutria Japonica showed relatively high antivacterial activity against B. pertussis ATCC 9797. However, the water-soluble extract of Reynoutria Japonica showed no antibacterial activity. The ethanolic extract was further fractionated with organic solvents such as hexane, chloroform, and ethyl acetate, in that order. Among the fraction tested, the chloroform fraction showed the highest antibacterial activity when the ethanol-soluble extract of Reynoutria Japonica minial inhibitory concentration(MIC) was $25{\mu}g/m{\ell}l$. Results support a role far Reynoutria Japonica in inhibiting the cell growth of B. pertussis ATCC 9797, but further experimentation is required.
Filamentous hemagglutinin (FHA) is considered as an essential immunogenic component for incorporation into acellular vaccines against Bordetella pertussis, the causative agent of whooping cough. Classically, antipertussis vaccination has employed an intramuscular route. An alternative approach to stimulate mucosal and systemic immune responses is oral immunization with recombinant live vaccine carrier strains of Salmonella typhimurium. An attenuated live Salmonella vaccine sgrain($\Delta$cya $\Delta$crp) expressing recombinant FHA(rFHA) was developed. Stable expressionof rFHA was achieved by the use of balanced-lethal vector-host system. which employs an asd deletion in the host chromosome to impose in obligate requirement for diaminopimelic acid. The chromosomal $\Delta$asd mutation was complemented by a plasmid vector possessing the asd$^{+}$ gene. A 3 kb DNA fragment encoding immuno dominant regionof FHA was subcloned in-frame downstream to the ATG translation initiation codon in the multicopy Asd$^{+}$ pYA3341 vector to create pYA3457. Salmonella vaccine harboring pYA3457 expressed approximately 105kDa rFHA protein. The 100% maintenance of [YA3457 in vaccine strain was confirmed by stability examinations. Additionally, a recombinant plasmid pYA3458 was constructed to overpress His(8X)-tagged rFHA in Essherichia coli. His-tagged rFHA was purified from the E. coli strain harboring pYA3458 using Ni$^{2+}$-NTA affinity purification system.>$^{2+}$-NTA affinity purification system.
Bordetella pertussis는 유아의 호흡기감염질환인 백일해의 원인균으로 배신도입에 의해 발생률이 크게 낮아졌다. 그러나 최근에 일부 백신접종률이 높은 국가에서 증가된 백일해 발생건수가 보고되고 있으며, 그 추정 원인 중에 하나는 백신주와 유행주 사이의 유전형 흑은 혈청형 변이 이다. 따라서 분리주에 대한 변이 현황을 유전형 혹은 혈청형 분석을 통하여 확인하는 것이 필요하고 국내에서 백일해 발병증가에 대한 가능성을 추정해야 한다. 이에 본 연구에서는 $1999\sim2006$년 사이에 분리된 국내 백일해 분리균주의 변이 양상을 agglutinogen과 fimbriae에 대한 혈청형 조사를 통해 확인하였다. 그 결과 agg 1과 fim 2가 국내 분리주에서 가장 많이 발견되는 혈청형이었고, 두 항원 모두 시대에 따른 혈청형 변이 현상이 확인되었으며, 특히 agglutinogen의 경우는 백신균주(agg 1,2)와는 다른 유형(agg 1)이 증가되는 유형으로 나타났다. 그러나 fimbriae의 경우는 백신균주(fim 2)와 동일한 유형이 증가되어 차이를 나타내었다. 이러한 결과는 백일해 발병증가가 나타나는 국가들에서도 확인되는 현상으로 국내에서의 백일해 발병증가에 대한 보다 정확한 예측을 위해서는 항원결정기 유전자에 대한 변이정도 및 정상인에서의 항체가 분포양상 등에 대한 연구가 필요할 것으로 사료된다.
We describe the construction and immunobiological properties of a novel whooping cough vaccine candidate, in which the aroQ gene, encoding 3-dehydroquinase, was deleted by insertional inactivation using the kanamycin resistance gene cassette and allelic exchange using a Bordetella suicide vector. The aroQ B. pertussis mutant required supplementation of media to grow but failed to grow on an unsupplemented medium. The aroQ B. pertussis mutant was undetectable in the trachea and lungs of mice at days 6 and 12 post-infection, respectively. Antigen-specific antibody isotypes IgG1 and IgG2a, were produced, and cell-mediated immunity [CMI], using interleukin-2 and interferon-gamma as indirect indicators, was induced in mice vaccinated with the aroQ B. pertussis vaccine candidate, which were substantially enhanced upon second exposure to virulent B. pertussis. Interleukin-12 was also produced in the aroQ B. pertussis-vaccinated mice. On the other hand, neither IgG2a nor CMI-indicator cytokines were produced in DTaP-vaccinated mice, although the CMI-indicator cytokines became detectable post-challenge with virulent B. pertussis. Intranasal immunization with one dose of the aroQ B. pertussis mutant protected vaccinated mice against an intranasal challenge infection, with no pathogen being detected in the lungs of immunized mice by day 7 post-challenge. B. pertussis aroQ thus constitutes a safe, non-reverting, metabolite-deficient vaccine candidate that induces both humoral and cell-mediated immune responses with potential for use as a single-dose vaccine in adolescents and adults, in the first instance, with a view to disrupting the transmission cycle of whooping cough to infants and the community.
Pertussis is a highly contagious respiratory tract disease caused by $Bordetella$$pertussis$ infection. The clinical manifestation of this infection can be severe enough to cause death. Although pertussis has been supposed to be a vaccine-preventable disease ever since the widespread vaccination of children against pertussis was started, since the 1990s, cases of pertussis and related fatalities are on the rise, especially in countries with high vaccination coverage. In Korea, there have been no deaths due to pertussis since 1990, and the vaccination rate continues to be approximately 94%. However, the number of pertussis cases reported to the Korea Center for Disease Control and Prevention has tended to increase in the 2000s, and in 2009, there was an obvious increase in the number of pertussis cases reported. This review aims to present the latest information about the pathogenesis, diagnosis, treatment, and prevention of pertussis.
Acellular pertussis vaccine has been used widely in Korea since 1984. However, because many of the former generations were not inoculated with pertussis vaccine, they may infect infants with pertussis. With this background, we investigated the prevalence of pertussis antibodies in all age groups. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to assess IgG antibodies to pertussis toxin (PT) and filamentous hemagglutinin (FHA) and bacterial agglutination (BA) to assess antibodies to agglutinogen were compared on 842 serum samples which were donated from 11 hospitals in Seoul area. In comparison with age groups under 20 years, antibodies of adults against PT and FHA were maintained. But antibodies against agglutinogen showed no pattern in all age groups. Antibodies to PT were correlated with antibodies to FHA. There was no significant difference in antibody levels between male and female (p<0.05).
목적: 본 연구에서는 6개월 미만의 영아를 대상으로 백일해의 기초적인 역학조사를 확인하고자 단일 기관에서 실시하였다. 방법: 2011년 10월부터 2013년 4월까지 분당 차병원에 내원한 진찰 당시 호흡기계 증상을 보여서 입원한 생후 6개월 미만의 영아들을 대상으로 비인두 흡입물로 B. pertussis PCR 또는 배양검사를 시행하였다. 또한 respiratory syncytial virus, adenovirus, metapneumo-virus, rhinovirus, parainfluenza virus, influenza A, B virus 포함한 호흡기 바이러스들에 대한 multiplex RT-PCR 검사를 시행 후 분석하였다. 결과: 대상 환아 수는 총 79례였으며 환아 연령 중앙값은 2개월이었고 대부분 진단은 급성 세기관지염(60%)이거나 폐렴(28%)이었다. B. pertussis 이 확인된 경우는 13례(16%)였으며 환아 연령 중앙값은 2개월이었다. B. pertussis 이 확인된 13례 중 7례(53%)에서 respiratory syncytial virus가, 1례(7%)에서 influenza A virus가 확인되었다. B. pertussis 이 확인된 13증례 중 DTaP 접종력 없는 증례는 6례(46%)이었고 DTaP 백신 1회 접종한 증례는 6례(46%)이었고 DTaP 백신 2회 접종한 증례는 1례(8%)이었다. 결론: 호흡기계 증상들을 보이는 입원한 생후 6개월 미만의 영아의 원인 병원체 중 B. pertussis 이 16%를 차지하였다. 6개월 미만의 영아들에 대한 향후 전국적인 다 기관이 포함된 역학적 감시 활동이 필요할 것으로 사료된다.
B형 간염바이러스의 표면항원, 파상풍, 디프테리아균의 toxoid, 백일해의 혼합백신인 PDT-Hepa의 효능을 실험하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 시험물질을 기니픽에 접종하였을 때 B형 간염 바이러스의 표면 항원과 파상풍 및 디프테리아균의 toxoid에 대한 항체형성이 뚜렷이 관찰되었으며, 항체형성의 정도는 접종용량에 비례하였다. 백일해의 경우는 시험물질을 마우스에 접종시킨 후 마우스에 감수성이 있는 Bordetella pertussis 18323주로 직접 공격 접종하여 이 균에 대한 방어력이 형성되어 있음을 관찰하였으며, 이러한 방어정도는 투여 용량에 비레함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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