Objectives This study was performed to evaluate the effect of Pyrola japonica extract (NJ) and its principal constituent, homoarbutin (HA) on osteoclast differentiation and gene expression and bone resorption. The osteoclastogenesis and gene expression were determined in receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL)-stimulated RAW264.7 cell. Methods In order to evaluate the effect of HA extracted from NJ on bone resorption, osteoclasts were used to be differentiated and formed by stimulating RAW264.7 cells with RANKL. Tartarate-resistant acid phosphatase (TRAP) (+) polynuclear osteoclast formation ability was evaluated, and differentiation control genes including cathepsin K, matrix metalloproteinases-9 (MMP-9), and TRAP in osteoclast differentiation were analyzed by real-time polymerase chain reaction (PCR). Immunoblotting was performed to measure the effect of mitogen-activated protein kinase (MAPK) factors on bone resorption, and the effect of osteoclasts on osteoclast differentiation was measured. Results Both NJ and high concentration of HA blocked RANKL-stimulated differentiation from RAW264.7 cell to TRAP-positive multinucleated cells. NJ reduced RANKL-induced expression of TRAP, cathepsin K. Both NJ and high concentration of HA inhibited RANKL-mediated expression of MMP-9, nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1, and cellular Jun-fos. NJ suppressed RANKL-stimulated expression of cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthase, tumor necrosis factor-alpha, and levels of interleukins. Both NJ and HA decreased bone resorption in osteoclast-induced bone pit formation model. Conclusions These results suggest that NJ and HA blocked bone resorption by decreasing RANKL-mediated osteoclastogenesis through down-regulation of genes for osteoclast differentiation.
Objectives: To select the optimal ranges showing obvious synergic anti-osteoporotic potential after adjust mixed formula consisted of Morindae Radix (MR) and Cistanchis Herba (CH) as compared with those of each single formula or risedronate sodium (RES) using bilateral ovariectomized (OVX) female mice. Methods: Fourteen groups, total eight sham or 104 OVX mice were selected based on the body weights at 34 days after OVX surgery. After that, 9 types mixed compositions, single formula of MR and CH, and RES were orally administered for 35 days. And we measured changes in body weight and gain, femur weight, bone mineral density (BMD), bone strength (failure load) and mineral content - calcium (Ca) and inorganic phosphorus (IP), osteocalcin contents and bone specific alkaline phosphatase (bALP) activities of all mice. Results: The OVX-induced estrogen-deficient osteoporotic signs were significantly inhibited by 35 days of continuous oral treatment of all treated mice as compared with OVX control mice. Especially, MR:CH 1:3 and 1:1 mixed formula treated mice showed significantly more favorable inhibitory activities against estrogen-deficient osteoporosis symptoms as compared to those of each single formula of MR and CH. Although RES also ameliorated the decreases of the femur BMD, strength and trabecular bone architectures through the inhibited the increases of bone turnover, but they did not critically influenced on the bone formations. Conclusions: The results suggest that MR:CH 1:3 mixed formula showed somewhat lower anti-resorptive effects as compared to those of RES, but they also showed bone formation effects. therefore, it is expected that MR:CH 1:3 mixture will be promising as a potent protective agents for relieving the osteoporosis in menopausal women.
이 연구는 이전에는 없던 4단계 열수 추출 공정이 사골 내 특유 이취를 효과적으로 제거하고 풍미 성분을 생성시킬 수 있는지 MS-전자코와 FT-NIR을 사용하여 분석하였다. 그 결과, 4단계 열수 추출 공정은 상대적으로 풍미 성분이 많이 생성되었고, 완제품의 경우 진공 농축 공정을 추가적으로 처리함으로써 추출액에 남아있는 지방 유래 휘발성 이취가 감소된 것을 볼 수 있었다. 또한 이렇게 약해진 이취는 생성된 풍미에 masking 되는 효과가 더해져, 다른 회사의 제품과 차별성이 있다고 할 수 있다.
The properties of ideal retrograde filling materials include the ability to seal the root canal system in three dimensions and well tolerated by periradicular tissues. Biocompatibility testing has been done mainly with cytotoxicity tests using cell culture. Little attention has been paid to the potential adverse influence on the inflammatory and immune reaction in the periapical tissue. The purpose of this study was to investigate the effects of retrograde filling materials on human mononuclear cells in vitro. Freshly mixed and set specimens from six materials (Z100, Tetric Ceram, Fuji II, Fuji II LC, F2000, Compoglass Flow, and ZOE) were eluated with cell culture medium for 24 hours. Cytotoxic effects of these extracts were evaluated by determining cell viability and enzyme activity using MTT and lactate dehydrogenase (LD). The production of inflammatoy bone resorptive cytokine, TNF-${\alpha}$ was measured from human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) exposed to the extracts by means of Endogen Human TNF-${\alpha}$ ELISA kit (Wobrun, MA, U.S.A.). Eluates and diluted (1 : 10) eluates with cell culture medium from freshly mixed Fuji IT had cytotoxic effects on mononuclear cells using MTT and LD. However, eluates from set Fuji II were not cytotoxic. Eluates form set ZOE exhibited cytotoxicity with LD test. TNF-${\alpha}$ levels were high in eluates from freshly mixed Fuji II and Z100. Diluted eluates from freshly mixed Z100 and F2000 stimulated the production of TNF-${\alpha}$. However, there were no significant difference in TNF-${\alpha}$ levels compared to controls. These results indicate that some materials could possibly stimulate bone resorption in the periapical tissue by means of the production of bone resorptive cytokine.
We investigated the nutritional characteristics of the uncooked Skipjack tuna Katsuwonus pelamis frame (U-STF) as a basic resource for preparing flavor-enriching concentrates. The bone rate based on the fish frame (FF) was 53.2% in U-STF, thus lower than those of cooked skipjack tuna frame (C-STF), the uncooked salmon frame (U-SF), and beef leg bone (BLB). The composition of FF had 48.6-58.0% moisture, 18.4-21.3% crude protein, 7.0-15.0% crude lipid, and 12.8-22.1% ash. Compared to the proximate composition of BLB, that of FF was higher moisture and crude protein but lower solids, crude lipids, and ash. The total amino acid contents of FF was 17.6-20.8 g/100 g, which was higher than that of BLB. The levels of calcium and phosphorus of FF were 4.7-8.5 g/100 g and 2.4-4.2 g/100 g, respectively, thus lower than those of BLB. The brix concentration of FF extract was $5.0-8.2^{\circ}$, being highest in U-STF extracts, followed by extracts of U-SF and then extracts of C-STF. Our results indicate that U-STF is an optimal resource for preparing flavor-enriching concentrates.
This study was designed to know the effect of kimchi on the hematological and immunological parameters in vivo and in vitro, respectively. To study the effects of kimchi on the hematological parameters, rats(S.D., male) were divided into 4 groups and fed diets containing of 3%, 5% and 10% kimchi or kimchi free diet(control) for 6 weeks. The results of CBC(complete blood cell) tests obtained from the bloods of rates were as follows ; In 10% kimchi group, the level of WBC(white blood cells), RBC(red blood cells), Hgb(hemoglobin), Hct(hematocrit) were increased significantly than those of control group(p<0.05). MCV(mean corpuscular volume), one of the red cell indices, was also increased significantly in the animals fed 10% kimchi(p<0.05). RDW(Red cell distritution width) and PCT(plateletcrit) was lowest in 10% kimchi group(p<0.05). To examine the effects of kimchi on immune cell growth in vitro, three types of mouse immune cells-spleen cells, bone marrow cells, thymus cells-were cultured with extracts of salted Chinese cabbage, fresh kimchi and fermented kimchi(for 1 week) for 12 or 20 days. Control was supplemented with PBS(phosphate buffer saline) excluding kimchi extract. The results of spleen cell, bone marrow cell, and thymus cell cultures showed similar tendency: control medium accelerated death of cells, extracts of salted Chinese cabbage reduced the rate of cell death, and extracts of fresh kimchi and fermented kimchi promoted cell growth. From these results, it could be suggested that kimchi possibly has an effect on the hematopoietic ability and increases immune cell development and growth in vivo.
Women's aging made a functional decline at ovary, This functional problem causes estrogen deficiency and many disorders, such as, sexual dysfunction, obesity, osteoporosis, urinary incontinence, skin and all body's aging, etc. We determined the ameliorative effects of some herbal extracts mixture on postmenopausal symptoms in ovariectomized Sprague Dawley rats. Nine-weeks-old female rats were ovariectomized and treated with singled pomegranate extracts (0.40, 1.20 g/kg/day) and mixed pomegranate extracts (1.08, 3.24g/kg/day) for 8 weeks. Oral administration of pomegranate extracts for 8 weeks were increased serum estradiol level and improved the serum osteocalcin, ALP activity and bone specific ALP level. And pomegranate extracts were reduced body weight, adipose tissue. Uterus weight in treated group tended to improve. In addition, the concentrationl of triglyceride and total cholesterol were lower after 8 weeks. HDL-cholesterol levels improved with does-dependency in treated groups. Collagen level on skin and cartilage showed a slight increase at treatment for 8 weeks. $^{\infty}These$ results showed that both of singular extract treatments and extracts mixture treatments were effective on general postmenopausal symptoms at overiectomized rats, and especially, the mixture treatments were more effective than singular treatment. $^{\infty}In$ conclusion, these herbal extracts' mixture showed improvement effect in general factors related with postmenopausal disorders.
The objective of this study was to investigate the inhibitory effect of taurine and alendronate on the osteoclast differentiation. Osteoblasts and bone marrow cells from 1-2 day old mouse were co-cultured in 10% fetal bovine serum - minimal essential media (FBS-MEM). Osteoclast differentiation was induced by adding the sonicated extracts of Porphyromonas gingivalis (P.gingivalis). Osteoclasts were identified using tartrate resistant acid phosphotase staining (TRAP). Alendronate of 10$^{-7}$, 10$^{-6}$, 10$^{-5}$M and taurine of 500, 1000, 1500$\mu\textrm{g}$/ml were added respectively. The cytotoxic effects of alendronate and taurine were examined using MTT(3-(4,5-dimethylthiazol -2-yl-2,5-diphenyltetrazo- lium bromide) method. After culturing with the sonicated extracts of P.gingivalis, the amounts of IL-6 in the culture supernatant were measured and compared using the ELISA method. The results were as follows : 1. Osteoclasts were differentiated at the concentration of 0.01~0.1$\mu\textrm{g}$/ml sonicated extracts of P.gingivalis. (P<0.05). 2. Alendronate inhibited osteoclasts differentiation at the concentration of 10$^{-5}$ M when the concentration of sonicated extracts of P.gingivalis was 0.01$\mu\textrm{g}$/ml. 3. Taurine inhibited osteoclasts differentiation at the concentration of 1500$\mu\textrm{g}$/ml when the concentration of sonicated extracts of P.gingivalis 0.01$\mu\textrm{g}$/ml. 4. In cytotoxic test (MTT test), no cytotoxic effect was evident in all concentrations of alendronate and taurine. 5. Taurine (10$^{-5}$M) and alendronate(1500$\mu\textrm{g}$/ml) did not change the amounts of IL-6 induced by sonicated extracts of P.gingivalis significantly.
The antimutagenic and antigenotoxic effects of ethanol, methanol, water and non-heating ethanol extract of Ligularia fischeri were investigated using Ames test and micronucleus test. Four solvent extracts by themseleves did not induce mutagenesis. The four extract of 200㎍/plate showed approximately 84.7%, 77.1%, 72.5% and 71% inhibitory effect on the mutagenesis induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) and 67.9%, 66.8%, 64.6% and 56% inhibition on the mutagenesis by 4-nitroquinoline-1-oxide(4NQO) against TA100 strain, whereas 70.2%, 60.9%, 61.9% and 52.8% inhibitions were observed on the mutagenesis induced by 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b]indol(Trp-P-1) in the presence of 200㎍/plate. TA100 strain was more sensitive than TA98 strain by four kinds of extracts on antimutagenesis. The effects of Ligularia fischeri extracts on the frequencies of micronucleated poly chromatic erythrocytes(MNPECs) induced by MNNG were investigated in the bone marrow. Ten, 20, 40 and 80mg g/kg of each extract were administered to animals immediately after injection of MNNG and the exposure time was 36 hours. Inhibitory effects of Ligularia fischeri ethanol extracts were 12%, 35.3%, 58.8%, and 57%, in the presence of 20, 40, 60 and 80mg/kg, respectively whereas methanol extracts showed 15.5%, 32.7%, 50.8%, and 57.9% inhibitory effects, respectively. Both extracts showed enhanced antimutagenic and antigenotoxic effects. These results showed a good correlation between antimutagenic effects in in vitro and in in vitro assay.
Transforming growth factor ${\beta}(TGF-{\beta})$는 많은 세포의 증식, 분화 및 여러가지 세포기능에 대해 다양한 조절기능을 갖고 있는 multifunctional polypeptide로 알려져 있다. $TGF-{\beta}$는 골기질에 상당량 존재하며 골조직 대사에 대해 광범위한 영향을 나타낸다. 여러가지 연구결과에 의해 기질과 연관된 $TGF-{\beta}$는 골세포 자체의 산물로 여겨지고 있으나 골조직세포군중 어느종류의 세포가 $TGF-{\beta}$를 형성하는지에 대해서는 논란이 되고 있다. 본 연구는 $TGF-{\beta}$를 형성하는 골조직세포를 규명하고 $TGF-{\beta}$가 서로 다른 세포들에 미치는 영향을 관찰하고자 하였다. 본 실험에 필요한 특정골조직세포군을 얻기 위하여 백서태자두개관을 연속효소처리하여 수집한 골조직세포군의 생화학적 특성규명을 시행하였다. 효소 처리후 초기에 유리되는 세포는 섬유아세포의 특성을 보이며 후기에 유리되는 세포는 acid 및 alkaline phosphatase 활성과 부갑상선호르몬, calcitonin, prostaglandin $E_{2}$에 대한 c-AMP의 반응 및 교원 단백질합성등을 통해 볼때 조골세포유사세포로 보여진다. 골조직과 두개관세포 추출물의 Polyacrylamlde gel과 immunoblot analysis에 의해 골조직내에 $TGF-{\beta}$의 존재와 골세포에 의한 $TGF-{\beta}$의 생성을 확인하였다. 두개관 세포 추출물의 분석에서 모든 세포군에서 $TGF-{\beta}$가 합성되는 것을 관찰하였다. 외부에서 $TGF-{\beta}$를 가한 경우 무혈청 배지에서 골조직 증식에 대해 두가지 양상의 반응을 보였다. 조골세포 유사세포에서는 촉진하는 반응을 보였으나 섬유아세포군에서는 억제반응을 나타냈다. 반면에 교원 및 비교원 단백질 합성에 있어서는 모든 두개관세포군이 촉진반응을 보였다. 단백질 합성증가는 교원단백에 특이성이라기 보다는 일반적인 증가로 보여진다. 또한 단백질합성증가에 대한 $TGF-{\beta}$의 영향은 세포증식과의 관련성이 없는 것으로 사료된다. 결국 골세포에 의한 $TGF-{\beta}$의 생성과 여러 세포군에 대한 서로 다른 작용으로 보아 $TGF-{\beta}$는 autocrine과 paracrine 양상으로 세포기능을 조절함으로써 골조직 대사를 조절하는 중요한 기능을 발휘하는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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