The growth. freezing resistance and electrophoretic protein patterns of carrot callus cultures were investigated following treatment with NaCl for various' intervals at 20$^{\circ}C$. Following 7 day exposure to 250 mM NaCl. freezing tolerance increased, which was measured by 2.3.5-triphenyl tetrazolium chloride (TTC) assay and fresh weight was reduced compared to control cells. Changes of electrophoretic patterns of total and boiling stable proteins were investigated using one or two dimensional gel system. Several proteins with molecular weight of 43 and 21 kDa increased by NaCl treatment. The most prominent change was detected in 21 kDa protein. The steady state level of this protein increased in NaCl treated cells, but decreased in control cells. Twenty one kDa protein was detected only in the NaCl treated cell when boiling stable protein was analyzed. The isoelectric point of 21 kDa protein was identified as 5.7. The timing of increase of 21 kDa protein was correlated to freezing resistance which implied the role of this protein in the induction of freezing resistance of the cell.
백경 가을무 자엽은 선천적으로 53kDa과 29kDa인 중탕에 강한 단백질을 소유하고 있다. 저온 스트레스를 주면 중탕에 강한 36kDa과 16.5kDa 단백질이 새로 유도되었고, 53kDa과 29kDa의 단백질은 더 증가되었다. 중탕에 강한 53kDa 단백질은 자엽을 제거한지 2시간 이내에 변성되었다. 백경 가을무 하배축에서는 자엽에서와 같이 선천적으로 중탕에 강한 53kDa 단백질이 존재하고, 스트레스를 받으면 중탕에 강한 24kDa과 18kDa 단백질이 새로 유도되었다. 장춘대형 봄무 자엽에서는 저온과 ABA 스트레스를 주면 중탕에 강한 53kDa 단백질이 유도되었고, 25kDa과 23kDa 단백질이 증가되어 백경 가을무와 장춘대형 봄무에서 스트레스에 대항하여 유도되는 중탕에 강한 단백질이 다름을 알 수 있었다. 중탕에 강한 25kDa과 23kDa 단백질의 유도는 cycloheximide에 의해 방해 되었다. 22kDa 단백질은 ABA 처리로 사라졌다가 cycloheximlde의 처리로 다시 증가되어, cycloheximide는 생체 내 단백질의 분해에도 관여하는 것으로 보인다. 장춘대형 봄무의 하배축에서 스트레스로 유도되는 단백질의 양상은 백경 가을무 하배축에서 유도되는 단백질의 양상과 유사하였다.
저온처리로 자엽과 상배축(hypocotyl)에서 설탕의 농도와 환원당(reducing sugar)의 농도가 약간 증가되었다. 저온처리 동안 총 아미노산의 농도는 계속 증가되었다. 그러나 Asp/Asn, Glu/Gln Thr, Ser, Ala 등에 친수성 아미노산과 양전하를 가진 아미노산인 Lys과 Arg들은 저온처리 동안 계속 변화되었다. 이 변화는 단백질의 합성과 분해에 관계된다. 저온처리로 자엽에서는 24, 52, 55, 56과 73.5kD 단백질이 증가되었고, 줄기에서는 55, 56, 73.5kD 단백질이 증가되었다. 자엽과 줄기에서 유도된 24, 42, 49와 52kD 단백질들은 $100^{\circ}C$에서 끓여도 변성되지 않은 채로 남아 있어서 끓임에 강한 단백질들이다. 이 단백질들이 저온에 대한 저항력을 증가시키는 역할을 한다고 본다.
It is known that the stable protein 1 (SP1) detected in aspen plants remains soluble upon boiling and that sp1 expression in transgenic aspen is resistant to salt stress. Presently, we analyzed the effect of expression of SP1 in Arabidopsis thaliana plants and their response to high temperature stress. After $45^{\circ}C$ for 16 h, relative to wild type plants, sp1 transgenic plants exhibited stronger growth and were better in several physiological properties including chlorophyII, chlorophyII fluorescence, water content, proline content, and malondialdehyde content. These preliminarily results suggest that the over-expression of SP1 may notably enhance heat-tolerant level of transgenic A. thaliana plants.
The objective of the present study was to determine the minimum alcohol (ethanol) concentration that gives rise to the coagulation of goat milk for the alcohol precipitation test, and to evaluate the physical parameters of goat milk which include alcohol and heat stability. A total of 1,295 udder-half milk samples from 648 lactating dairy goats were collected from seven farms in Jeonnam province, Republic of Korea, to determine the alcohol and heat stability. The majority (99.6%) of the samples were coagulated when 70% ethanol was added to the milk, while only 11.0% of the samples were precipitated by the addition of an equal volume of 45% ethanol. With the concentration of 65%, 60%, 55% and 50% aqueous ethanol, 99.2%, 96.8%, 81.0% and 52.8% of the milk samples were coagulated, respectively. Of 1,295 dairy goat milk samples tested for heat stability, 127 (9.8%) were coagulated by boiling. Among the 143 alcohol test-positive udder-half milk samples, 52 (4.0%) were unstable by heat test, while 1,032 (79.7%) of the 1,152 alcohol test-negative milk samples were stable by heat test. According to the results of boiling test, sensitivity and specificity of 45% alcohol precipitation test were 0.3023 (95% CI: 0.2346~0.3772) and 0.9190 (95% CI: 0.9017~0.9344), respectively. The contents of protein and the specific gravity were higher in the milk samples of 45% alcohol test-positive than in those of 45% alcohol test-negative. However, lower levels of lactose and milk urea nitrogen were observed in the milk samples of 45% alcohol test-positive compared to the alcohol test-negative milk samples. The lowest pH values ($6.73{\pm}0.20$) were shown in the 45% alcohol test-negative and heat-unstable milk samples, while the lowest values of somatic cell counts and bacterial counts were shown in the 45% alcohol test-negative and heat-stable milk samples. Results of this study suggest that the alcohol precipitation for dairy goat milk may have to be tested with ethanol concentration less than 45% for the determination of freshness and heat-stability.
A study on the processing method of anchovy hydrolysate paste (AHP) was carried out to improve the sensory quality of salted and fermented fish. Homogenized whole anchovy was hydrolyzed using commercial pretenses, Complex enzyme-2000 (CE, Pacific Chem. Co.) and Alcalase (AL, Novo), in a cylindrical vessel with 4 baffle plates and 6-bladed turbine impeller. Optimal pH, temperature, and enzyme concentration for the hydrolysis with CE and AL were $7.0,\;52^{\circ}C,\;7\%$, and $8.0,\;60^{\circ}C,\;6\%$, respectively. The rational amount of water for homogenization, agitation speed, and hydrolyzing time were $100\%\;(w/w)$, 100 rpm, and 210 min, respectively. To make the hydrolysate to paste type, it was effective to mix the additives, such as starch, soybean protein, agar, and carrageenan gum to the hydrolysate 5 min before the end of boiling at $100^{\circ}C$ for 30 min. Minimal NaCl concentration for long-term preservation was $15\%$, and this could be reduced to $12\%$ by adding $5\%$ of KCl. yield of the AHP based on the total nitrogen content was $94.6\~97.0\%,\;and\;86.0\~89.2\%$, of the nitrogen was amino nitrogen. Salinity, pH and histamine content of the AHP prepared with $12\%$ NaCl and $5\%$ KCl were $9.3\~9.9\%,\;6.1\~6.2$, and below 13 mg/100 g, respectively. The AHP was stable at $26{\pm}3^{\circ}C$ for 60 days on bacterial growth, and addition of $0.05\%$ of rosemary (Herbalox) extract was effective to inhibit the lipid oxidation of the AHP during storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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