Ham, Seung-Shi;Park, Kun-Pyo;Park, Book-Kil;Deoghwan Oh
Preventive Nutrition and Food Science
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제2권3호
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pp.232-235
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1997
This study was investigated to determine antimutagenic effects of enzymatic browning reaction products (PEBRPs) obtained by reaction of polyphenol compouns with oxidase extracted from potato. Catechol (Ca) PEBRPs showed the strongeest inhibitor effects with 90% inhibition on benzo-($\alpha$)-pyrene(B($\alpha$)P) induced mutagenesis in Salmonella typhimurium TA98, but he least with40% inhibition on the 2-aminofluorene (2-AF) induced mutagenesis in TA98. The strong antimutagenic activities with 80% inhibition were observed in the presence of 100$\mu\textrm{g}$/plate of hydroquinone(HQ)-PEBRP on the B($\alpha$)P or 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b]indole(Trp-P-1) induced mutagenesis in TA98, whereas HQ-PEBRP showed the least antimutagenic effect on 2-AF-induced mutagenesis. The addition of 100$\mu\textrm{g}$ hydroxyhydroquinone(HHQ)-PEBRP to the plate led to approximately 82% inhibitory effects on 2-AF or Trp-P-1 induced mutagenesis in TA98, whereas the least antimutagenicity was obsrved in the4-nitroquinoline-1-oxide(4-NQO) induced mutagenesis in the presence of 100$\mu\textrm{g}$/plate of HHQ-PEBRP. More than 80% inhibiton were observed in the presence of 200$\mu\textrm{g}$/plate of Pyrogalol(Py)-PEBRP on the B($\alpha$)P or Trp-P-1 induced mutagenesis in TA98, but the least with 38% inhibition on 4-NQO induced mutagenesis in TA98. The results indicate that enzymatic browing reaction products of potato have a strong modulatory effect on mutagen induced mutagenesis in TA98.
In spore rec-assay using B. subtillus H17(rec) and M 45(rec) , the ethanol extract of buckwheat leaves showed antimutagenicity in condition of low concentrations, but its did comutagenicity in condition of high concentrations. In Ames test, the ethanol extract of buckwheat leaves reduced the mtabenicity of N-methyl-N' -nitro-N-nitrosoguaidine (MNNG), benzo (a) pyrene(B($\alpha$)P), 2-amino-fluorene(2AF), and 3-amino -1, 4-dime-thyl-5-H-pyrido(4, 3-b) indol(Trp-P-1) in Salmonella typhimurium TA98 and TA100. The ethanol extract was fractionated by hexane, ethylacetate, butanol and water. Among Them hexane fraction showed the highest inhibition rate on the mutagenicity of B($\alpha$)P, and so did chloroform fraction on the mutagenicity of MNNG in S. typhimurium Ta98 and TA100. To elucidate the antimutagenic mechanism of the ethanol extract, it was mixed and co-incubated with various metagens, S9 mix, and the bacteria with different experimental orders and different reaction times. The ethanol extract did not affect reversion rate of pre-mutated. S.typhimurium. However, when the ethanol extract was added to the mutagens before their interaction with S.typhimurium , it reduced the mutation rate to 152$\pm$12-273$\pm$18 colonies/plates in case of MNNG, and 135$\pm$13-195$\pm$10 colonies/ plates in case of B($\alpha$)P), showing strong desmutagenic activity.
Polycyclic aromatic hydrocarbons(PAHs) contents were analyzed by measuring benz(a)anthracene(BaA), chrysene(Chr), benzo(b)fluoranthene(BbF) and benzo(a)pyrene(BaP), and the related risk characterization was conducted for 113 samples out of 14 different agricultural products used for food and medicine. Detection rate of PAHs was 90.3% as a whole, and the highest one was 80.5% for BaP. The detection rate of BaP exceeding the maximum permitted concentration of Rehmanniae Radix Preparata and Rehmanniae Radix, 5.0 ㎍/kg was 1.8%, and the detection rates of BaA, Chr and BbF were within the range of 2.7~10.6%. The highest average concentration of BaA was 3.41 ㎍/kg detected from Lycii Fructus, while those of Chr, BbF, BaP and PAH4(sum of detected BaA, Chr, BbF and BaP) were 5.00, 1.79, 2.36, 12.36 ㎍/kg, respectively, detected from Rehmanniae Radix Preparata. As for the risk characterization on PAHs, the overall MOE(Margin of Exposure) values were measured within the range of 105~107, which is unlikely to cause direct health concerns, but the worring values of MOE were measured 6.57×104 for BaP and 6.10×104 for PAH4 from Rehmanniae Radix Preparata, which may require an improvement plan to reduce BaP contents.
This study was to evaluate the genotoxic effects of airborne particulate matters using single cell gell elec trophoresis (comet assay) in A549 human lung carcinoma cells. The total suspended particulate (TSP) was collected on back-up filter in Chuncheon, Kangwon Do, South Korea from April, 2003 to February, 2005. The concentrations of TSP, B(a)p and most of heavy metals seemed to be higher in spring and winter, and lower in summer. And they showed higher concentration in the commercial areas and the residential area having more traffics than in the rural area. It was found that A549 cells interacting with the organic extract of TSP showed more DNA single-strand breaks compare to untreated cells. The genotoxicity of the organic extract of TSP was increased with the pre-treatment of S-9 mixture during the culture or with the treatment of endonuclease after cell lysis. The DNA damage by the organic extract of TSP was higher in winter and the commercial area than in summer and the rural area. This study suggests that TSP, heavy metals and B(a)P analyzed showed significant variation depend on the seasons and the areas which are correlated with the DNA damage evaluated by Comet assay, indicating that genotoxic biomarker is useful for toxicological evaluation of air quality.
천연생리활성물질의 개발과 미이용자원의 효율적 재이용방안을 모색하기 위하여 13여종의 한국산 야생 버섯류를 에탄올과 물로 추출하여 각 시료추출물의 항변이원성 물질 검색을 시도하였다. B(a)P과 MNNG의 돌연변이 유발성에 미치는 야생버섯류의 에탄올 추출물과 물추출물의 항돌연변이 효과의 검토는 Salmonella typhimurium TA98과 TA100을 이용한 Ames 실험계를 이용하였으며 B(a)P에 대해 꽃구멍장이버섯(Polyporus dispansus), 깔때기꾀꼬리버섯(Cantharellus infundibuliformis), 진갈색주름버섯(Agaricus subrutilescens), 테미로버섯(Daedalea dickinsii), 목장말똥버섯 (Panaeolus papilionaceus) 및 턱수염버섯(Hydnum repandum) 등의 에탄올추출물에서 비교적 강한 항변이 원성을 나타내었다. 물추출물의 경우는 B(a)P에 대해서 턱수염버섯(Hydnum repandum)이 TA100에서 가장 강한 저해효과를 나타내었고 대부분의 시료는 낮거나 저해활성이 보이지 않았다. 직접변이원인 MNNG에 대해서는 야생버섯류의 에탄올추출물중 5종만 항변이원성이 관찰되었고, 물추출물의 경우는 꽃구멍장이버섯(Polyporus dispansus)이 가장 강한 저해효과를 보였으나 대부분의 버섯류는 낮거나 저해 효과를 거의 나타내지 않았다. 그중 직, 간접 변이원에 대해 가장 강한 저해 효과를 나타낸 꽃구멍장이 버섯의 에탄올추출물은 농도가 높을수록 항변이원성 효과가 증가하는 경향을 보였다.
To investigate the potential application of the single-cell gel electrophoresis (SCGE) assay to carp as an aquatic pollution monitoring technique, gill, liver, and blood cells were isolated from carp exposed to a direct-acting mutagen, N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG), or indirect mutagen, $benzo[\alpha]pyrene$$(B[\alpha]P)$, then the DNA strand breakage was analyzed using the assay. Based on testing 5 different cell isolation methods and 6 electrophoretic conditions, the optimized assay conditions were found to be cell isolation by filter pressing and electrophoresis at a lower voltage and longer running time (at 0.4 V/cm for 40 min). In preliminary experiments, gill and liver cells isolated from carp exposed to MNNG in vitro exhibited DNA damage signals even with 0.5 ppb exposure, which is a much higher dose than previously reported. In the gill cells isolated from carp exposed to 0.01-0.5 ppm MNNG in vivo, significant dose-and time-dependent increases were observed in the tail for 4 days. As such, the linear correlation between the relative damage index (RDI) values and time for each dose based on the initial 48-h exposure appeared to provide effective criteria for the genotoxicity monitoring of direct-acting mutagenic pollution. In contrast, the in vivo exposure of carp to 0.25-1.0 ppm of $B[\alpha]P$ for 7 days resulted in dose-and time-dependent responses in the liver cells, in which 24-h delayed responses for metabolizing activation and gradual repair after 48 h were also observed. Thus, the negative-sloped linear correlation between the RDI and time at each dose based on the initial 48 h appeared to provide more effective criteria for the genotoxicity monitoring of indirect mutagenic pollution.
번데기동충하초(Cordyceps militaris(L. ex fr.) Link)의 수소전자공여능 및 항돌연변이원성을 살펴본 결과 부탄을 분획물과 에틸 아세테이트 분획물에서 수소전자공여능이 다른 시료에 비해 2배 이상 높게 나타났다. 항돌연변이원성 실험결과에서는 직접변이원인 MNNG, 4NQO 그리고 간접변이원인 B($\alpha$)P, Trp-P-1에 대해서 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 보였다. MNNG(0.4 $\mu\textrm{g}$/plate)의 경우 S. typhimurium TA100 균주에서는 시료농도 200 $\mu\textrm{g}$/plate에서 에탄을 추출물이 78.1%인데 반해 부탄을, 물 분획물에서는 각각 90.4%와 87.6%로 매우 높은 억제효과가 나타났다. 4NQO(0.15 $\mu\textrm{g}$/plate)에 대한 S. typhymurium TA98 균주의 경우 에틸 아세테이트 분획물의 경우 80.4%였고, TA100 균주에서는 부탄을 분획물이 88.6%의 억제효과를 보였다. 또한 간접변이원의 경우 B($\alpha$)P(10 $\mu\textrm{g}$/plate)을 사용한 경우 에틸 아세테이트와 부탄을 분획물은 시료농도 200 $\mu\textrm{g}$/plate에서 85% 이상의 높은 억제율을 나타내었다. Trp-P-1(0.15 $\mu\textrm{g}$/plate)에서는 TA98 균주의 경우 200 $\mu\textrm{g}$/plate 농도에서 핵산 분획물과 부탄을 분획물이 각각 90.2%, 87.6%로 높은 억제율을 보여주었고, TA100 균주에 대해서는 에틸 아세테이트 분획물이 90.1%로 억제효과가 가장 높게 나타났다. 또한 같은 농도에서 부탄올과 물 분획물에서 각각 87.0%와 75.4%의 억제율을 나타내었다. 번데기동충하초 에탄을 추출물 및 분획물은 시료 농도증가에 따라 TA98과 TA100 균주 모두에서 각 변이원에 대한 돌연변이 억제효과도 증가하였다.
Water extracts of persimmon leaf tea(PLTE), green tea(GTE) and oolong tea(OTE), at the con centration used for human consumption, were examined for inhibitory effects on the mutagenicity of major classes of dietary and environmental mutagens including indirect acting mutagens, B[ ]P (benzo[ ]pyrene), IQ(2 amino 3 methylimidazo[4,5 f]quinoline), 2 AA(2 aminoanthracene) in the presence of S9 mix and direct acting mutagen, 4 NQO(4 nitroquinoline 1 oxide) without S9 mix, using the modified Ames Salmonella/microsome assay. PLTE, GTE and OTE showed very potent and concentration dependent antimutagenic effects against indirect acting mutagens B[ ]P and IQ. At the maximum concentration(16,200 g/plate) of each tea extract, number of colonies decreased in a dose dependent manner up to 82~100%. Similar inhibition of PLTE, GTE and OTE were seen at higher concentration in the mutagenicity of the 2 AA following an initial increase in the activity at lower concentration. However, the mutagenicity of the direct acting mutagen 4 NQO were not suppressed at lower concentration of the three tea extracts, and higher concentration of the tea extracts enhanced mutagenic activity of the mutagen. There were no differences in the mode of antimutagenesis between PLTE, GTE, and OTE, in both Salmonella typhimurium TA98 and TA100 strains against the same mutagen. In conclusion, the water extracts of persimmon leaf tea, green tea and oolong tea possess marked antimutagenic potential against a variety of important dietary and environmental indirect acting mutagens, but the activity was not observed against the direct acting mutagens. These results suggest that the mode of inhibitory action may not have resulted from direct interaction between tea extracts and the mutagens, but rather from indirect metabolic inactivation of mutagens by tea extracts.
13종의 한국산 야생버섯 추출물의 항돌연변이 효과의 검토는 S. typhimurium TA98과 TA100을 이용한 Ames 실험계로 확인하였다. 그 결과, 직접변이원인 MNNG에 대해 산속그물버섯 아재비와 구름버섯의 메탄올 추출물은 TA100에서 90-94%의 강한 항변이원성을 보였고, 갓버섯과 구름버섯의 열수 추출물도 58-61%의 저해효과를 보였다. 간접변이원인 B(a)P에 대해서는 TA98과 TA100에서 구름버섯과 턱받이금버섯 메탄올 추출물이 가장 강한 저해효과를 나타내었고, 열수 추출물중 잔피막흑주름버섯과 수원무당버섯은 TA98에서 60-70% 정도의 저해활성을, 갓버섯은 TA100에서 45% 정도의 돌연변이 억제효과를 볼 수 있었고, 나머지 버섯시료는 저해활성을 거의 보이지 않았다. 한편 야생버섯 메탄올 추출물 0.5mg/mL 투여시 결장암세포인 HT29에 대해 그물버섯, 산속그물버섯아재비, 방패외대버섯, 황소비단그물버섯, 구름버섯, 턱받이금버섯, 덕다리버섯에서 55-78% 이상의 억제 효과를 보였고, 1 mg/mL의 시료농도에서는 11종의 버섯에서 50% 이상의 억제 효과를 나타내었다. 간암세포인 HepG2에서 대해서는 방패외대버섯 메탄올 추출물 1 mg/mL에서만 58.4%의 저해능을 보였고, 나머지 시료에서는 45% 정도의 낮은 저해활성을 보였다. 혈액암세포주인 U937의 경우도 그물버섯, 산속그물버섯아재비, 수원무당버섯, 황소비단 그물버섯, 밀버섯, 잔피막흑주름버섯 메탄올 추출물에서 60% 이상의 높은 저해 활성을 나타내었다. 구름버섯 열수추출물의 경우 HepG2와 U937에 대해서 53-65% 정도의 비교적 높은 저해활성을 보였고, 대부분의 버섯 열수 추출물은 40%이하의 낮은 저해활성을 보였다. 정상 임파구에 대해서 야생버섯 추출물 0.5-1 mg/mL 농도에서 75-80% 이상의 생존율을 보여, 야생버섯 추출물을 1 mg/mL 농도로 처리할 경우 암세포에 대한 높은 억제효과에 비해 정상세포에 대해서는 비교적 낮은 독성을 가짐을 확인하였다.
이 연구에서는 우리나라에서 유기성 슬러지의 배출량이 많은 6개 주요 산업 업종의 54개 사업장에서 채취한 98개 폐수처리 슬러지에 대하여 PAHs 함량을 조사하였다. 슬러지에 대한 해양배출허용기준과 비교시 C업종의 슬러지는 Nap에 대하여 제1기준과 제2기준을 모두 초과하는 시료가 1건, PC업종의 슬러지에서 Ant와 Fla에 대하여 제2기준을 초과하는 시료가 1건 있었다. ${\Sigma}_{16}PAHs$는 PC> C > CD> PP >WS > FB업종의 순으로 높았다. 슬러지의 육상 이용시 ${\Sigma}_{16}PAHs$ 함량농도를 규제하는 EU와 덴마크의 기준과 비교하였을 때 EU의 기준은 PC업종에서 1건, 덴마크 기준은 C업종과 PC업종에서 각 1건의 시료가 초과하였다. 7종 발암성 PAHs에 대한 ${\Sigma}_7PAHs$은 상대적으로 PC, CD, C업종에서 높게, PP, WS업종에서 낮았으며, FB업종에서는 검출되지 않았다. 슬러지에서의 PAHs의 농도에 대한 ANOVA 분석결과 발생업종과 채취시기에 의한 영향은 없는 것으로 나타났다. 개별 PAHs간 상관분석결과 4-ring 이상의 HMW PAHs 농도간에 상관성이 높았다. ${\Sigma}_{16}PAHs$와는 0.7 이상의 높은 상관성을 갖는 PAHs는 Acy, Ant, Fla, B(a)A, B(f)F, B(a)P 이었다. 주성분분석의 결과 98개의 슬러지는 전체 데이터의 약 70%의 설명력을 갖는 두 개의 주성분에 의해 세 개의 그룹으로 특성별로 분리될 수 있었다. 국내/외 선행연구와의 비교 결과 ${\Sigma}_{16}PAHs$는 스위스의 연구 결과와 비슷하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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