• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권2호
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• pp.275-280
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• 2001

Bacteriocin J105 is a proteinaceous inhibitory substance produced by Latococcus latis subsp. lactis j105 isolated from Kimchi. Bacteriocin J105 was purified to homogeneity by the pH-dependent adsorption-desorption method and reverse-phase HPLC from the culture broth of Lactococcus lactis subsp. lactis J105. Purification of bacteriocin J105 resulted in a 1.47-fold increase in the specific activity and the recovery was 1.5%. Its molecular mass measured by the electrophoretic pattern in the sodium, dodecyl sulfate polyacrylamide gel was about 3.4 kDa. It was stable at $121^{\circ}C$ for 15 min at pH between 2 and 4. However, at pH above 5, bacteriocin was rapidly inactivated. Twenty-one residues from the N-terminal portion of bacteriocin J105 were sequenced using sequence analysis of lantibiotics. Bacteriocin J105 showed significant homology with known nisin A from lactic acid bacteria.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권3호
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• pp.209-214
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• 1991

Lactococcus sp. 1112-1 균주가 생산하는 bacteriocin을 정제하고 특성을 조사하였다. CM-sephadex ion exchange column chromatography, Sephadex G-50 gel filtration, SDS-PAGE를 행함으로서 수율 16.2 정제도 123배의 단일물질을 얻었다. 이 물질은 열에 비교적 안정하여 $60^{\circ}C$에서 60분간 열처리 할 때 38의 잔존활성을 유지하였으며 알카리쪽에서는 비교적 불안정하여 pH 8.0에서 48시간 처리시 77의 활성을 소실하였다. 이 물질은 26개의 아미노산 잔기를 이루고 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권6호
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• pp.523-528
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• 1998

본 연구에서는 토마토에서 bacteriocin 생산균주를 분리하여 균주동정 및 bacteriocin 정제를 행하였다. 분리균주는 Gram 염색, catalase test, 포자생성유무, API 20 STREP. kit 등을 통하여 Enterococus faecium으로 잠정 동정하였다. 분리균주가 생산하는 항균성물질은 Gram 양성 세균인 Listeria manocytogmes, Leuonostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum, Streptococus agalartiae, Streptococus pyrogenes, Gram 음성 세균인 Pseudomonas aeruginosa등에 대해서 항균력을 나타내었다. 단백질 분해 효소인 proteinase K에 의해서 그 활성이 소실되고, catalase에 의해서는 항균력이 유지되므로 단백질성 bacteriocin임을 확인할 수 있었다. Bacteriocin 정제를 위하여 ethanol침전, CM Sepharose CL-6B 양이온교환 chromatography, Sephacryl S-100 HR gel filtration의 순으로 정제하여 초기 배양액의 bacteriocin활성 대비 35.8배의 정제도를 얻었다. 13% SDS-polyacrylamide gel전기 영동을 통하여 단일 band를 확인할 수 있었으며 분자량은 약 51 kDa 정도_로 추정되었다. Crude bacteriocin의 열 안정성은 10$0^{\circ}C$에서 1시간 처리하였을 때의 잔존활성이 3.3%로 비교적 낮았으며, pH에 대해서는 pH2~7에서 비교적 안정하였다. Bacteriocin의 항균작용을 알아보기 위하여 피검균인 Leu. mesenteroides를 초기농도 1.0$\times$$10^{9}$ CFU/$m\ell$로 접종한 배지에 bacteriocin을 첨가하여 배양하였을 때 4시간 이후에 완전히 사멸되므로 bacteriocidal 작용을 하는 것으로 추정되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제7권6호
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• pp.409-416
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• 1997

Leuconostoc sp. LAB145-3A isolated from kimchi produced a bacteriocin which was active against food pathogens, such as Listeria monocytogenes, Enterococcus faecalis, and E. faecium. Bacteriocin production occurred during the early exponential phase of growth and was stable upto the late stationary phase of growth. Optimum conditions for bacteriocin production were $37^{\circ}C$ with an initial pH of 7.0. The bacteriocin of LAB145-3A was sensitive to proteases, but stable for solvents, pH change and heat treatment. It was stable even at autoclaving temperature for 15 min. The bacteriocin exhibited a bactericidal mode of action against Lactobacillus curvatus LAB170-12. The bacteriocin produced by Leuconostoc sp. LAB145-3A was purified by CM-cellulose cation exchange column chromatography and Sephadex G-50 gel filtration. The purification resulted in an approximate 10,000-fold increase in the specific activity. Approximately 4% of the initial activity was recovered. Purified bacteriocin exhibited a single band on the SDS-PAGE with an apparent molecular weight of 4,400 daltons. This bacteriocin was named leucocin K. Leuconostoc sp. LAB145-3A had two residential plasmids with molecular sizes of 23 kb and 48 kb. A comparison of plasmid profiles between LAB145-3A and its mutants revealed that the 23 kb plasmid (pCA23) was responsible for bacteriocin production and immunity to the bacteriocin in Leuconostoc sp. LAB145-3A.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제14권3호
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• pp.233-237
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• 1999

Lactobacillus sp. GM7311을 MRS broth에 배양하여 배양 상등액으로부터 n-propanol/acetone처리 , ion-exchange chromatography, gel filtration 및 SDS-PAGE를 이용해 박테이로신을 부분 정제하였다. 정제 과정 중 가장 큰 문제점은 n-propanol 과 acetone등의 유기용매 처리 단계에서의 급격한 활성 감소로서 회수율은 48.0%를 나타내었다. 거러나 이후 CM-cllulose를 통한 ion-exchange chromatography와 Sephacryl HR-100에 의한 gel filtration 과정을 거치면서 활성이 크게 증가하여, 비활성 뿐만 아니라 정제도에서도 493배의 증가를 얻을 수 있었으며 최종 회수율은 8.3%였다. SDS-PAGE로 정제도를 확인했을 때 분자량 약 8,200과 2,500의 2개의 band를 관찰할 수 있었으며, 2개의 band를 각각 나누어 활성을 측정한 결과 두 부분 모두 활성이 있는 것으로 나타나 Lactobacillus sp. GM7311이 2가지 성분의 박테리오신을 생산하는 것으로 추정할 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제29권3호
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• pp.155-161
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• 2001

Lactrococcus sp. HY449균줄르 M17-glucose broth에 배양하여 배양 상등액으로부터 propanol-actone 침전 ion-exchange chromatography gel-filtration chromatography 및 reverse-phase chroamtography 등을 통하여 비활성 25,600,000 BU/mg 인 순수한 bacteriocin 을 정제하였다. 정제 과정 주에서 ion-exchange chromatography 단계에 서는 35.3%의회수율이 7.3%로 감소하였다. Reverse-Phase chromatography에선 3.3%의 회수율을 보였고 활성도는 413.5배로 증가하였다. Tricine-SDS 전기영도 결과 bacteriocin 은 단일 밴드로 나타났으며, N-말단 아미노산 서열 분석을 수행한 결과 $NH_2$-IIe-Leu-Pro-GIn로 확인되었다. 아미노산조정 분석결과를 바탕으로 분자량을 예측한 결과 본 bacteriocin은 32개의 아미노산으로 이루어져 있으며 분자량은 3.6kDa인 것으로 추정되었다.

• 한국유가공학회:학술대회논문집
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• 한국유가공기술과학회 1996년도 추계 제43회 유가공 심포지움
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• pp.30-34
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• 1996

Twenty seven strains of Lactobacillus acidophilus among 92 isolated from fecal contents of humans, pigs, calves, chickens, rodents and turkeys demonstrated inhibitory attributed to bacteriocin(s). The bacteriocin(s) were heat stable and nondialyzable proteinous compounds and exhibited narrow inhibitory spectra of activity. Neither hydrogen peroxide nor low pH were responsible for inhibitory action. All of the producer strains were resistant to their own bacteriocin or bacteriocin(s) produced by other strains. The bacteriocins from several strains from different host species were purified for further characterization. The bacteriocin(s) all exhibited similar characteristics.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제20권4호
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• pp.211-216
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• 2005

E. faecium MJ-14 균주의 배양 상등액에 $50\%$ 황산암모늄을 처리한 결과, 박테리오신 활성은 3,840 BU/mL으로 배양 상등액에 비해 6배 증가되었고 회수율은 약 $60\%$에 이르렀다. 이온교환크로마토그래피에 의해 용출된 획분 중 $48\∼76$번에서 항균 활성이 나타났으며, 용출물의 비활성은 35.7배 증가하였고, 회수율은 약 $41\%$였다. 그리고 겔 크로마토그래피에 의해 비활성 127,293 BU/mg인 박테리오신 단백질을 정제하였으며, 이 때 정제도는 114배, 수율은 $36\%$였다. 정제된 박테리오신 단백질을 SDS-FACE한 결과. 항균 활성을 나타내는 4.3 kDa과 5.8 kDa의 분자량을 확인하였다.

• 한국생명과학회:학술대회논문집
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• 한국생명과학회 2007년도 제48회 학술심포지움 및 추계국제학술대회
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• pp.68.2-68.2
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• 2007

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• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제10권4호
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• pp.539-543
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• 2000

A new bacteriocin, named lacticin 10790, was purified from Lactococcus lactis subsp. cremoris KFCC 10790 by sequential adsorption, immobilized metal-affinity, cation-exchange, and $C_{18}$ reverse-phase chromatographies. The molecular mass of the bacteriocin was estimated to be between 3,000 and 3,500 Da. Lacticin 10790 showed a broad antimicrobial spectrum against many gram-positive bacteria. The bacteriocin was stable to heat and in the pH range between 2 and 6. Lacticin 10790 was destroyed by digestion with proteases and exhibited a bactericidal mode of action. An amino acid composition analysis of purified lacticin 10790 revealed a high concentration of hydrophobic amino acids. The N terminus of the bacteriocin was found to be blocked, upon analysis by Edman degradation. The results suggest that lacticin 10790 is a class I bacteriocin.