Kim, Hyeonjun;Tong, Xiaomeng;Choi, Sungyoung;Lee, Jeong K.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권12호
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pp.2173-2179
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2017
The intracytoplasmic membrane of Rhodobacter sphaeroides readily vesiculates when cells are lysed. The resulting chromatophore membrane vesicle (CMV) contains the photosynthetic machineries to synthesize ATP by ATPase. The light-dependent ATPase activity of CMV was lowered in the presence of $O_2$, but the activity increased to the level observed under anaerobic condition when the reaction mixture was supplemented with ascorbic acid (${\geq}0.5mM$). Cell lysis in the presence of biotinyl cap phospholipid (bcp) resulted in the incorporation of bcp into the membrane to form biotinylated CMV (bCMV), which binds to streptavidin resin at a ratio of approximately $24{\mu}g$ bacteriochlorophyll a/ml resin. The ATPase activity of CMV was not affected by biotinylation, but approximately 30% of the activity was lost by immobilization to resin. Interestingly, the remaining 70% of ATPase activity stayed constant during 7-day storage at $4^{\circ}C$. On the contrary, the ATPase activity of bCMV without immobilization gradually decreased to approximately 40% of the initial level in the same comparison. Thus, the ATPase activity of CMV is sustainable after immobilization, and the immobilized bCMV can be used repeatedly as an ATP generator.
A species of facultative photo-organotrophic, purple, non-sulfur bacterium was isolated from the 47 point at west and south coast of Korea in September 2001. Separated 13 samples of changes with red color under 28-32$^{\circ}C$, 3000 lux, anaerobe conditions for 7 days cultivated in basal medium. For pure isolation from 13 samples, we used agar-shake tube method (0.4 % agar) and separated 5 strains through 13-repetition test. EGH-24 and EGH-30 was identified as the same strain through the RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)-PCR of strain EGH-9, EGH-13, EGH-23, EGH-24, EGH-30. Four isolates cultivated in synthesis wastewater for wastewater biodegradation test. EGH-24 was selected with efficient wastwater treating strain. Based on the results obtained from morphology, nutrient requirements, major bacteriochlorophyll content, 16S-rDNA phylogenetic analysis, EGH-24 strain may be identified as a new strain of the genus Rhodobacter and named Rhodobacter sp. EGH-24.
Herbicidal activity of $\delta$-aminolevulinic acid(ALA), an intermediate for the biosynthesis of tetrapyrroles such as chlorophyll, heme, bacteriochlorophyll, and vitamin $\textrm{B}_{12}$ analogues, was examined to determine the variation in phytotoxic potential against different plant species as affected by different application methods. Seed-soaking treatment, ALA at low concentrations did not affect shoot and root lengths of test plants while at highest concentration reduced them by 20 to 30%. Alfalfa showed the most tolerant response to ALA in both pre- and post-emergence application, and followed by rice. When applied with pre-emergence, cotyledons of Chinese cabbage were severely bleached with 0.5 mM of ALA at 24 hrs after application, and root growth of rice, barnyard grass, and alfalfa was significantly inhibited with increasing of concentration. With post-emergence application, ALA at 2 to 4 mM reduced shoot and root growths of Chinese cabbage and barnyard grass completely. Herbicidal effects of ALA were more enhanced in the treatment combined with 2,2-dipyridyl sthan single application in barnyard grass and Chinese cabbage. The results suggest that alfalfa was the most tolerant to ALA among the tested plants, and that post-emergence application of ALA exhibited greatest photodynamic activity against tested plants.
For wastewater treatment and utilization of the biomass, a photosynthetic bacterium was isolated based on its cell growth rate, cell mass, and assimilating ability of organic acids. The isolate was a Gram-negative rod-shaped bacterium that contained a single polar flagellum and formed a lamellar intracytoplasmic membrane (ICM) system, including bacteriochlorophyll $\alpha$. The major isoprenoid quinone component was identified as ubiquinone Q-10, and the fatty acid composition was characterized as to contain relatively large amount of C-16:0 (18.74%) and C-18:1 (59.23%). Based on its morphology, phototrophic properties, quinone component, and fatty acid composition, the isolate appeared to be closely related to the Rhodopseudomonas subgroup of purple nonsulfur bacteria. A phylogenetic analysis of the isolate using its 16S rRNA gene sequence data also supported the phenotypic findings, and classified the isolate closely related to Rhodopseudomonas palustris. Accordingly, the nomenclature of the isolate was proposed as Rhodopseudomonas palustris KUGB306. A bench-scale photosynthetic bacteria (PSB) reactor using the isolate was designed and operated for the treatment of soybean curd wastewater.
Trimorphomyces papilionaceus dikaryon 으로부터 자영적인 돌연변이에 의해 분리한 이배체를 대상으로 생장속도, U. V. 광 조사 후의 생존율, U. V. 분광광도계와 Hoechst 33258 핵염색에 의한 DNA 함량등을 monokaryon 및 dikaryon 과 비교하여 결정하였다. 이배체는 dikaryon 핵의 DNA 양과 비슷하였고 monokaryon 핵의 DNA 양의 2배 정도가 되었다. Glyoxalase II 의 band 양상에서 monokayon은 한 개의 isozyme band 만을 보인 반면, 이배체와 dikaryon은 같은 위치에서 두개의 isozyme band 가 관찰되었다. 이원전개한 전기영동실험에서 dikaryon 특이 단백질은 분자량이 66.000 보다 컸으며 분자량 24,000-29,000 사이에서 이배체 특이 단백질이 존재한다.
본 연구에서는 제주도 한라산 중산간 습지대 28개소에서 IAA 및 carotenoid 생성능이 우수한 광합성 세균 1종을 최종 선발하였으며, 16S rRNA 염기서열 분석과 생리학적 특성을 조사한 결과 Rhodopseudomonas palustris JK-1 균주로 동정하였다. JK-1 균주의 최적배양조건을 선발하기 위하여 pH, 온도, 빛 및 통기 등을 포함한 여러 가지 요인들이 균주의 생장과 IAA 및 carotenoid 등 광합성색소 생성에 미치는 영향을 조사하였다. 시험결과 JK-1 균주는 명/혐기조건에서 균생장, IAA 및 광합성색소 생성이 양호하였으며 암/혐기조건에서 균생장, IAA 및 광합성색소 형성이 모두 크게 억제되었다. 명/혐기조건에서 균생장, IAA 및 carotenoid 등 광합성색소의 생산을 위한 최적 pH, 온도 및 배양회전속도는 각각 7, $30^{\circ}C$, 150 rpm, 9, $30^{\circ}C$ 및 150 rpm, 그리고 6, $25^{\circ}C$ 및 50 rpm이었다. 그리고 명/호기조건(0.5~1 vvm)에서는 명/혐기조건(0 vvm)보다 균생장 및 IAA 합성이 양호하였으나 광합성색소 형성은 크게 억제되었다. 따라서 최적배양조건은 명/혐기조건에서 pH 7, 온도 $30^{\circ}C$ 및 회전속도 100 rpm을 선발하였으며, IAA 합성을 유도한 배양액을 생육촉진 효과검증에 이용하였다. 시험결과 R. palustris JK-1 균주를 열무에 3% (v/v) 처리 시 지상부 및 지하부 건물중이 무처리 및 배지처리구 대비 각각 20~58% 및 40-28% 증가하였다.
The integrated or the two-stage (dark anaerobic and photosynthetic) fermentation processes were compared for the hydrogen production using purple non-sulfur photosynthetic bacteria, Rhodopseudomonas palustris P4. Cell growth, pH changes and organic acids and bacteriochlorophyll contents were monitored during the processes. Culture broth of Rps. palustris P4 exhibited dark-red during the photosynthetic culture condition, while yellow under the anaerobic condition without light. Rps. palustris P4 grown at the photosynthetic condition evolved 0.38 and 1.33 ml $H_2$/mg-dcw during the dark and the light fermentation, respectively, which were totally 1.71 ml $H_2$/mg-dcw at the two-stage fermentation. The rate of hydrogen production using Rps. palustris P4 grown under the dark anaerobic condition was 2.76 ml $H_2$/mg-dcw which consisted of 0.46 and 2.30 ml $H_2$/mg-dcw from the dark and the photosynthetic fermentation processes, respectively. Rps. palustris P4 grown under dark anaerobic conditions produced $H_2$ 1.6 times higher than that of grown under the photosynthetic condition. However, total fermentation period of the former was 1.5 times slower than that of the latter, because the induced time of hydrogen production during the photosynthetic fermentation was 96 and 24 hours when the seed culture was the dark anaerobic and photosynthetic, respectively. The integrated fermentation process by Rps. palustris P4 produced 0.52 ml $H_2$/mg-dcw(1.01 mol $H_2$/mol glucose), which was 20% of the two-stage fermentation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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