The 20-kHz ultrasonic irradiation was applied to investigate bacterial inactivation and antibiotic susceptibility changes over time. Applied intensities of ultrasound power were varied at 27.7 W and 39.1 W by changing the amplitude 20 to 40 to three bacteria species (Escherichia coli, Enterococcus faecalis, and Staphylococcus aureus). By 15-min irradiation, E. coli, a gram-negative bacterium, showed 1.2- to 1.6-log removals, while the gram-positive bacteria, Enterococcus faecalis and Staphylococcus aureus, showed below 0.5-log removal efficiencies. Antibiotic susceptibility of penicillin-family showed a dramatic increase at E. coli, but for other antibiotic families showed no significant changes in susceptibility. Gram-positive bacteria showed no significant differences in their antibiotic susceptibilities after ultrasound irradiation. Bacterial re-survival and antibiotic susceptibility changes were measured by incubating the ultrasound-irradiated samples. After 24-hour incubation, it was found that all of three bacteria were repropagated to the 2- to 3-log greater than the initial points, and antibiotic inhibition zones were reduced compared to ones of the initial points, meaning that antibiotic resistances were also recovered. Pearson correlations between bacterial inactivation and antibiotic susceptibility showed negative relation for gram-negative bacteria, E. coli., and no significant relations between bacterial re-survival and its inhibition zone. As a preliminary study, further researches are necessary to find practical and effective conditions to achieve bacteria inactivation.
Background: Significant increases in the bacterial resistance to various antibiotics have been found in fish farms. Non-antibiotic therapies for infectious diseases in aquaculture are needed. In recent years, light-emitting diode technology has been applied to the inactivation of pathogens, especially those affecting humans. The purpose of this study was to assess the effect of blue light (wavelengths 405 and 465 nm) on seven major bacterial pathogens that affect fish and shellfish important in aquaculture. Results: We successfully demonstrate inactivation activity of a 405/465-nm LED on selected bacterial pathogens. Although some bacteria were not fully inactivated by the 465-nm light, the 405-nm light had a bactericidal effect against all seven pathogens, indicating that blue light can be effective without the addition of a photosensitizer. Photobacterium damselae, Vibrio anguillarum, and Edwardsiella tarda were the most susceptible to the 405-nm light (36.1, 41.2, and $68.4J\;cm^{-2}$, respectively, produced one log reduction in the bacterial populations), whereas Streptococcus parauberis was the least susceptible ($153.8J\;cm^{-2}$ per one log reduction). In general, optical density (OD) values indicated that higher bacterial densities were associated with lower inactivating efficacy, with the exception of P. damselae and Vibrio harveyi. In conclusion, growth of the bacterial fish and shellfish pathogens evaluated in this study was inactivated by exposure to either the 405- or 465-nm light. In addition, inactivation was dependent on exposure time. Conclusions: This study presents that blue LED has potentially alternative therapy for treating fish and shellfish bacterial pathogens. It has great advantages in aspect of eco-friendly treating methods differed from antimicrobial methods.
전기장을 이용한 생물막 제어 기술은 기존의 소독제 및 항균제를 이용한 방법을 대체하기 위한 제어기술로써 연구되어 왔다. 본 기술은 화학적 소독제나 항균제를 사용하지 않고 전자전달을 토대로 생물막을 제어한다는 점에서 환경적으로 이로운 면이 있다. 현재까지 연구된 정기장을 이용한 생물막 제어방법은 기작에 따라 (1) 음전류에서의 정전기적 반발작용을 통한 미생물 부착 제어, (2) 양전류 상에서의 미생물 거동을 이용한 미생물 부착 제어, (3) 직접산화반응에 의한 미생물 불활성화, (4) 바이오일렉트릭 효과에 의한 생물막 불활성화 효과로 분류할 수 있다. 본 총설에서는 주요 선행연구를 통해 전기장을 이용한 생물막 제어 기술에 대하여 살펴보고, 적용사례들을 소개하고자 한다.
초고압의 미생물에 대한 살균 효과는 다른 제어 방법을 더 적용함으로써 증대 될 수 있다. 본 연구의 목적은 식품 산업에서 중요한 세균 포자들을 tert-butylhydroquinone (TBHQ)를 처리하여 초고압 살균효과를 증진시킴을 알아보고자 한다. Clostridium sporogenes, Bacillus cereus, Bacillus subtilis의 포자를 준비하였다. Dimetylsulfoxide(DMSO)에 용해시킨 TBHQ 200 ppm을 함유한 포자액을 650 또는 700 MPa로, 54-72$^{\circ}C$에서 5분간 처리하였다. 세균 포자의 사멸은 초고압 처리 이후에만 일어났다. Bacillus subtilis 포자가 B. cereus나 C. sporogenes 포자보다 초고압에 의해 더 많이 사멸되었다. C. sporogenes 포자의 사멸은 Bacillus 포자에 비해서 초고압에 의한 germination이 더 일어나면서 이루어 졌다. Bacillus 포자는 54$^{\circ}C$에서 초고압 처리 때 보다 72$^{\circ}C$에서 처리했을 때 더 많이 사멸되었다. 하지만 germination에 의한 사멸은 70$^{\circ}C$에서 감소되었다. 포자를 DMSO와 초고압, TBHQ와 초고압의 병용 처리를 했을 때, 특히 54$^{\circ}C$에서는 포자 사멸이 덜 일어났다. 세균 포자의 사멸에 대한 좀 더 나은 이해를 위해서는 초고압에 의한 germination 과 다른 포자 억제 물질과의 상호 작용에 대한 메커니즘 연구들이 필요하다.
Gamma irradiation was evaluated for its in vitro and in vivo antibacterial activity against a postharvest bacterial pathogen, Erwinia carotovora subsp. carotovora (Ecc). Gamma irradiation in a bacteria cell suspension resulted in a dramatic reduction of the viable counts as well as an increase in the amounts of DNA and protein released from the cells. Gamma irradiation showed complete inactivation of Ecc, especially at a dose of 0.6 kGy. In addition, scanning electron microscopy of irradiated cells revealed severe damage on the surface of most bacterial cells. Along with the morphological changes of cells by gamma irradiation, it also affected the membrane integrity in a dose-dependent manner. The mechanisms by which the gamma irradiation decreased the bacterial soft rot can be directly associated with the disruption of the cell membrane of the bacterial pathogen, along with DNA fragmentation, results in dose-dependent cell inactivation. These findings suggest that gamma irradiation has potential as an antibacterial approach to reduce the severity of the soft rot of paprika.
Bacterial virus f2 and its RNA were examined to elucidate the mode of ozone utilizing sucrose density gradient analysis and electtron microscopic techniques. the inactivation kinetics of the virus f2 by ozonation showed that the viruses were inactivated during the first 5 sec of the reaction and were further inactivated at a slower rate during the next 10 min at 0.09 and 0.8mg/l ozone concentrations. The virus coat was broken by ozonation into many pieces of protein subunits and the adsorption of the viruses to the host pili was inversely related to the extent of the breakage of the virus. The viral RNA was released from the virus particles during ozone, but ozone inactivation of the RNA enclosed in the protein coat could not ruled out the possibility that the RNA was secondarily sheared by a reaction with the broken coat protein.
The effects of initial concentration and pulsed pressurization on the inactivation of Clostridium sporogenes spores suspended in deionized water were determined during thermal processing $(TP;\;105^{\circ}C,\;0.1MPa)$ and pressure-assisted thermal processing $(PATP;\;105^{\circ}C\;and\;700MPa)$ treatments for 40 min and 5min holding times, respectively. Different inoculum levels $(10^4,\;10^6\;and\;10^8CFU/ml)$ of C. sporogenes spores suspended in deionized water were treated at $105^{\circ}C$ under 700MPa with single, double, and triple pulses. Thermally treated samples served as control. No statistical significances (p>0.05) were observed among all different inoculum levels during the thermal treatment, whereas the inactivation rates $(k_1\;and\;k_2)$ were decreased with increasing the initial concentrations of C. sporogenes spores during the PATP treatments. Double- and triple-pulsed pressurization reduced more effectively the number of C. sporogenes spores than single-pulse pressurization. The study shows that the spore clumps formed during the PATP may lead to an increase in pressure-thermal resistance, and multiple-pulsed pressurization can be more effective in inactivating bacterial spores. The results provide an interesting insight on the spore inactivation mechanisms with regard to inoculum level and pulsed pressurization.
For the field application of dielectric barrier discharge plasma reactor in nutrient solution culture, a filtration-DBD (dielectric barrier discharge) plasma reactor was investigated for the Ralstonia solanacearum which causes bacterial wilt in aquiculture. The filtration-DBD plasma reactor system of this study was consisted of filter, plasma reactor, reservoir. The DBD plasma reactor consisted of a quartz dielectric tube, discharge electrode (inner) and ground electrode (outer). The experimental results showed that the inactivation of R. solanacearum with filter media type in filter reactor ranked in the following order: anthracite > fiber ball > sand > ceramic ball > quartz ceramic. In filtration + plasma process, disinfection effect with the voltage was found to small. In disinfection time of 120 minutes, residual R. solanacearum concentration was 1.17 log (15 CFU/mL). When the continuous disinfection time was 120 minute, disinfection effect was thought to keep the four days. In sporadic operation mode of 30 minutes disinfection - 24 hours break, residual R. solanacearum concentration after five days was 0.3 log (2 CFU/mL). It is considered that most of R. solanacearum has been inactivated substantially.
A new and effective formulation using antagonistic bacteria, Burkholderia cepacia YC5025 in vegetable oil was developed for the biocontrol of anthracnose. The bacterial population in the formulation was maintained to 5x10/sup7/ cfu/ml upto 60 days at room temperature. Control efficacy of the formulation for anthracnose was over 80% by spraying of diluted suspension(x1,000) in growth chamber tests. On the contrary, the bacterial suspension in distilled water or bacterial culture broth containing same number of spores as the formulation had low control efficacy around 40% even 2-weeks storage after preparation. The shelf-life of the formulation was longer than that of bacterial preparation using clay minerals such as talc or bentonite. The mechanisms of newly developed bacterial formulation are possibly the formation of water film on the surface of cucumber leaves and inactivation of the bacteria in the vegetable oils during storage. Further field tests and improvements with new liquid bacteiral formulation need to be done for practical application.
A dielectric barrier discharge (DBD) plasma reactor was investigated for the inactivation of Ralstonia Solanacearum which causes bacterial wilt in aquiculture. The DBD plasma reactor of this study was divided into power supply unit, gas supply unit and plasma reactor. The plasma reactor consisted of a quartz dielectric tube, discharge electrode (inner) and ground electrode (outer). The experimental results showed that the optimum 1st voltage, 2nd voltage, air flow rate and pH were for 100 V (1st voltage), 15 kV (2nd voltage), 4 L/min, and pH 3, respectively. At a low 1st voltage, shoulder and tailing off phenomena was observed. The shoulder phenomenon was decreased as the increase of 1st voltage. R. Solanacearum disinfection in the lower air flow rate was showed shoulder and tailing off phenomenon because the active species generated less. Under optimum condition, shoulder and tailing off phenomenon was reduced. When the 2nd voltage was less than 7.5 kV, tailing off phenomenon was observed and this was not vanishes even though the increase of the disinfection time. The inactivation efficiency increased as the increase of air flow rate, however, the efficiency decreased when the air flow rate was above 4 L/min. R. Solanacearum disinfection at pH 3 showed somewhat higher than in pH 11. The pH effect of R. Solanacearum deactivation is less than the impact on other factor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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