• 한국응용과학기술학회지
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• 제37권6호
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• pp.1535-1544
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• 2020

본 연구의 목적은 3년 이상 숙성된 재래식 된장으로부터 아민 산화 효소를 생산하는 프로바이오틱 바실러스균을 분리 동정하는 것이다. 시료로부터 분리된 바이오제닉 아민(biogenic amines, BA) 생성균은 Bacillus sp. TS09, Bacillus licheniformis TS17, Bacillus subtilis TS19, Bacillus cereus TS23, Bacillus sp. TS30, Bacillus megaterium TS31, B. subtilis TS44, Bacillus coagulans TS46 및 Bacillus amyloliquefaciens TS59 등으로 동정되었다. 한편 동일한 시료로부터 분리된 B. subtilis TS04와 TS50은 인공 위액 및 담즙액에 대한 저항성, 장내 상피세포에 대한 부착능 및 BA 생성균(Bacillus sp. TS30 및 B. subtilis TS44)에 대한 박테리오신 생산 등의 프로바이오틱 활성을 나타내었다. 게다가 B. subtilis TS04와 TS50 균주가 생산한 아민 산화 효소에 의하여 카다베린, 푸트레신 및 티라민의 생성량을 감소시킬 수 있었으므로 이들은 BA 중독 위험을 낮출 수 있는 프로바이오틱스 소재로서의 활용 가치가 높을 것으로 판단된다.

• 한국가금학회지
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• 제40권3호
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• pp.277-281
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• 2013

The experiment was undertaken to see the effects of Bacillus sp. on the growth performance and disease resistance to Salmonella sp. infections. The use of probiotic microbes in poultry is commonly practiced. In this study, Bacillus subtilis was tested using a total of 120 chicks of age of 1 day after hatching. The growth traits examined were body weight gain and feed conversion rate. And also, the Salmonella resistance of Bacillus subtilis was tested after the chicks were orally administered with Salmonella pullorum by gavage force injections. The result showed that Bacillus subtilis yielded a high feed efficiency, consequently increased growth rate. For the effect of Bacillus subtilis on Salmonella infection, Bacillus subtilis significantly improved the resistance to Salmonella pullorum infection. Various clinical symptoms of Salmonella infection were highly decreased by addition of Bacillus sp.

• 식물병연구
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• 제12권2호
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• pp.81-84
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• 2006

마늘 흑색썩음균핵병균 (Sclerotium cepivrum, Sclerotium sp.)에 대하여 생물적 방제제 Trichoderma harzianum 23 WP와 Bacillus subtilis 122 WP를 제제화하였다. 2003 년에 포장시험결과에서 태안지역은 남도마늘의 흑색썩음균핵 병균 (Sclerotium cepivrum)에 Trichoderma harzianum 23 WP 와 Bacillus subtilis 122 WP를 습분의 처리한 결과는 무처리 10.9% 비하여 4.1% 와 6.2%로 병 발생이 감소하였다. 서산지역은 서산종 마늘의 흑색썩음균핵병균 (Sclerotium sp.)에 Trichoderma harzianum 23 WP 와 Bacillus subtilis 122 WP를 습분의 처리한 결과는 무처리 17.8% 비하여 1.2% 와 2.6%로 병 발생이 감소하였다. 마늘수량은 두 지역에서 무처리에 비하여 증수되었다. 그러므로 Trichoderma harzianum 23 WP 와 Bacillus subtilis 122 WP는 마늘 흑색썩음병에 생물농약으로서 방제가능성을 나타내었다.

• 생명과학회지
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• 제13권5호
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• pp.559-568
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• 2003

본 연구는 된장 숙성 중 각종 미생물중에서 항산화 및 혈전 용해효소를 분비하는 균주를 분리 동정하고 이들 균주를 이용하여 기능성 항산화 및 혈전용해활성이 있는 된장을 제조하였다. 본 실험에서 된장에서 분리한 균주 중 1차적으로 항산화 활성 및 혈전용해 활성이 우수한 균주 BH-23을 선별하였다. 분리, 선별한 균주 BH-23은 형태학적, 생리화학적 및 생화학적 특성을 확인한 결과 Bacillus subtilis으로 잠정 적으로 결정하였고, 편의상 Bacillus subtilis BH-23으로 명명하였다. Bacillus subtilis BH-23의 최적 생육조건은 온도 $40^{\circ}C$, pH 5.0에서 가장 좋았고, 식염이 15%에서도 성장속도는 좋았다. 그리고 Bacillus subtilis BH-23의 항산화 활성 및 항혈전효소의 최적생성 조건은 본 균주의 성장조건과 거의 일치하였다. Bacillus subtilis BH-23을 이용하여 만든 제품과 시판된장과 비교 분석한 결과 Bacillus subtilis BH-23로 만든 된장은 시판된장보다 암모니아 취가 거의 없었으며 된장의 색깔도 탁하지 않았으며 풍미도 우수하였다. 따라서 Bacillus subtilis BH-23으로 만든 된장을 본래의 제품에 큰 영향이 없으면서 항산화 및 혈전용해 효소을 분비하는 기능성 된장을 제조할 수 있을 것으로 생각되어진다.

• 한국키틴키토산학회지
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• 제23권4호
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• pp.228-233
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• 2018

삼림 토양 시료를 이용하여 cellulase 생산균주를 단리한 결과, Carboxymethylcellulose (CM-cellulose)를 기질로 첨가한 고체배지상에서 명확한 활성환을 형성하는 총 6종류의 cellulase 생산균주를 단리하여, 단리한 균주 유래의 16S rDNA유전자 염기서열 분석을 통하여 균주 동정을 진행하였다. 그 결과 본 연구에서 단리된 균주는 Bacillus subtilis 4종류, Bacillus amyloliquefaciens 1종류, Bacillus cereus 1종류로 동정되었다. 이 중에서 CM-cellulose에 대한 가장 높은 cellulase 활성을 보이는 Bacillus subtilis를 선정하여 Bacillus subtilis NSC로 명명하였다. Bacillus subtilis NSC 유래 cellulase는 균주 배양 36~48시간에서 가장 높은 cellulase 생산성을 보였으며, 최적 pH 및 온도를 검토한 결과, 본 균주 유래 cellulase는 pH 5.0과 $40^{\circ}C$에서 가장 높은 효소 활성을 나타내었다. 그리고, pH 4.0~5.0 조건에서 30분간 효소처리를 하여도 효소활성의 감소가 없었으며, $40^{\circ}C$까지는 30분간의 열처리에도 효소활성의 저하 없이 안정한 특성을 보였다. CM-cellulose, Alkali swollen cellulose, Sigmacell-cellulose, Alpha-cellulose, 그리고 Avicel을 기질로 기질 특이성을 한 결과 CM-cellulose에 대하여 가장 높은 효소 활성을 나타내었으며, cellulose 결정구조를 보유하고 있지않는 CM-cellulose와 Alkali swollen cellulose에 대해서는 명확한 효소활성을 보였다. 하지만, cellulose 결정구조를 보유하고 있는 Sigmacell Cellulose, Alpha-cellulose, 그리고 Avicel 기질에 대해서는 CM-cellulose 활성의 각각 8%, 8%, 그리고 4%의 매우 낮은 효소활성을 나타내었다. Bacillus subtilis NSC 유래 cellulase의 0.26 U/ml 조효소액과 0.52 U/ml 조효소액을 이용하여 CM-cellulose의 분해 특성을 검토하였을 때 두 조효소액 모두 반응 CM-cellulose에 대해 반응 120분 후에 0.43 U/ml와 0.76 U/ml의 효소 활성을 나타내었다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제10권4호
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• pp.231-237
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• 1995

해양에서 분리한 용균활성이 우수한 균주인 Bacillus subtilis SH-1의 배양특성을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Bacillus subtilis SH-1에 의한 용균효소 생산을 위한 치적조건인 1.0% glucose, 1.0% yeast extract, 1.0% NaCl, 0.02% $K_2HPO_4,\;0.002%\;MgSo_4{\cdot}7H_2O,\;0.001%\;MnSO_4{\cdot}5H_2O,\;0.0001%\;FeSO_4{\cdot}7H_2O\;(ph\;8.0)$의 배지로 $30^{\circ}C$에서 진탕배양하여 배양 28시간일 때 효소활성이 가장 높았다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권3호
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• pp.188-192
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• 1989

토양에서 분리된 알카리 내성 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA로부터 B. subtilis 207-25 에 cloning된 promoter 유전자들을 그 공여 균주로 재형질전환시킬 수 있었다. 그 결과 promoter 유전자들은 공여 균주내에서 대부분의 특성들이 B. subtilis 207-25 내에서와 유사하였다. 재조합 plasmid p-12, p-l2Bl 및 p-l2B2의 CAT 비활성은 B. subtilis 207-25의 형질전환체보다 약간 높게 나타났으며 반면 pPL708의 CAT 비활성은 Bacillus sp. YA-14에서 오히려 상대적으로. 낮게 나타났다. Chloramphenicol에 의한 induction 정도도 월등하게 높은 것으로 나타나 이를 이용한 expression vector의 유용성이 높은 것으로 생각되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제35권3호
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• pp.475-478
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• 2003

청국장의 이취를 저하시키기 위하여 Bacillus subtilis K-20에 의하여 제조된 청국장을 분리 배양하여 마늘, 양파 등의 재료를 균질화시킨 후 재료성분이 다른 조건으로 발효 및 후숙하였다. 본 실험의 청국장과 시중 M제품의 향미를 관능 평가한 결과 K-20d, K-20e, K-20f로부터 청국장 특유의 냄새가 저해되었다. 특히 볶은 마늘과 양파를 첨가한 시료에서는 피자향의 우수한 향미 성분을 얻었다. 기능성 청국장은 위생적인 균주 개발이 중요한데, 본 실험의 청국장이 시중 M-청국장보다 contamination이 낮게 나타났다. 청국장의 이취를 제거하기 위하여 재료를 볶지않은 구룹, 볶은 구룹을 비교한 결과 총균수에는 별다른 형태와 차이가 없었다. 분리정제한 Bacillus subtilis K-20의 청국장과 시중 M-청국장을 비교할 때 10배이상 높은 균주을 얻을 수 있었다. 본 연구에 의한 청국장은 기능성을 보유하면서 냄새를 억제시켜 또한 향미를 부여하였으므로 기능성 식품으로 평가할 수 있다. 금후의 연구는 Bacillus subtilis K-20이 혈전용해효소인 fibrin과 apoptosis의 생화학적인 특징인 DNA fragmentation를 분석할 필요가 있다. 이상의 좋은 결과를 얻어낼 때 향미성이 높은 Bacillus subtilis K-20의 청국장으로부터 기능성 식품 및 의약용 개발의 기초자료를 얻을 수 있음을 시사한다.

• Current Research on Agriculture and Life Sciences
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• 제31권1호
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• pp.30-37
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• 2013

Bacillus subtilis and Bacillus amyloliquefaciens are closely related species that share a similar genomic background, and are both known to secrete large amounts of proteins directly into a medium. The extracellular proteomes of two strains of Bacillus subtilis and two strains of Bacillus amyloliquefaciens were compared by 2-D gel electrophoresis during the late exponential growth phase. The relative abundance of some minor protein spots varied among the four strains of Bacillus. Over 123 spots of extracellular proteins were visualized on the gel for B. subtilis CH 97, 68 spots for B. subtilis 3-5, 230 spots for B. amyloliquefaciens CH 51, and 60 spotsfor B. amyloliquefaciens 86-1. 2D gel electrophoresis images of the four Bacillus strains showed significantly different protein profiles. Consistent with the 2D gel electrophoretic analysis, most of the B. subtilis proteins differed from the proteases secreted by the B. amyloliquefaciensstrains. Among the proteins identified from B. subtilis, approximately 50% were cytoplasmic and 30% were canonically extracellular proteins. The secreted protein profiles for B. subtilis CH 97 and B. subtilis 3-5 were quite different, as were the profiles for B. amyloliquefaciens CH 51 and 86-1. The four proteomes also differed in the major protein composition. The B. subtilis CH 97 and B. amyloliquefaciens CH 51 proteomes both contained large amounts of secreted hydrolytic enzymes. Among the four strains, B. subtilis 3-5 secreted the least number of proteins. Therefore, even closely related bacteria in terms of genomic sequences can still have significant differences in their physiology and proteome layout.

• 미생물학회지
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• 제55권2호
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• pp.131-142
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• 2019

본 연구에서는 우리나라 전통 발효 된장 내 바이오제닉 아민 함량을 측정하고 이들 아민의 축적을 억제할 수 있는 프로바이오틱 바실러스균을 분리하였다. 된장 내 세균수, pH, 적정산도, 염도 및 바이오제닉 아민 함량은 시료마다 유의한 차이가 있었다. 된장에서 분리된 바실러스균 중에서 Bacillus (B.) licheniformis DB102, B. subtilis DB203, B. stearothermophilus DB206, Bacillus sp. DB209, Bacillus sp. DB310, B. coagulans DB311, B. cereus DB313, B. amyloliquefaciens DB714, Bacillus sp. DB917, B. cereus DB 915, B. subtilis DB1020 및 Bacillus sp. DB1022는 바이오제닉 아민 생성능이 있는 것으로 확인되었다. 반면, 바이오제닉 아민 분해균은 Bacillus sp. DB403, Bacillus sp. DB407, B. subtilis DB517, B. licheniformis DB612 및 B. subtilis DB821로 동정되었다. 특히, Bacillus sp. DB407과 B. subtilis DB821은 인공 소화액에 대한 저항성, 장관 상피세포에 대한 부착능, 항생제에 대한 내성 및 바이오제닉 아민 생성균에 대한 항균 활성 등의 프로바이오틱 특성을 나타내었다. 결론적으로 이들 두 프로바이오틱 바실러스균은 바이오제닉 아민이 낮은 대두 발효 식품 제조에 적합한 스타터로 사료된다.