The previous extensive in vitro studies on the antioxidative activities of a number of Korean grains, vegetables, seaweeds and mushrooms, and the various combinations of these food source exhibited a wide range of antioxidative activities, and four food mixtures composed of 5 kinds of foods (5A, 5B, 5C and 5D) were designed from 16 selective foods showing. high antioxidant effect, in vitro, to find the good combinations for the meal planning. Mixture 5B or 5C contained very high levels of total flavonoid and polyphenol, and ethanol extract from 5A, 5B or 5C showed very strong inhibitory effects against in vitro $Fe^{2+}-induced$ lipid peroxidation and ethanol extract from 5B or 5C showed remarkable DPPH radical scavenging effect and lipid peroxide-protein conjugation inhibition effect. And in vivo study was also carried out with two mixtures (5B, 5C). Powders (P5B, P5C) or ethanol extracts (E5B, E5C) of these mixtures were supplemented to Sprague-Dawley rats fed on high fat $(15\%)-high$ cholesterol $(1\%)$ semipurified diet for 5 weeks. The total antioxidant power in serum was significantly higher in P5B, P5C, E5B and E5C groups than in high fat control group, and $ascorbate-Fe^{2+}-induced$ TBARS was significantly lowered by E5B supplementation in rat liver. In liver tissue, Cu, Zn-SOD activity was significantly higher in P5B and E5B groups than in high fat control group, while catalase or GSH-peroxidase (GPx) activity was not changed by any supplementations. In kidney, Cu, ZnSOD activity was significantly higher in P5B group than in high fat control group, while GPx activity was not changed by any supplementations. Taken together, mixture 5B and 5C showed very strong antioxidative effects both in vitro and in vivo. Therefore, the ingredient Korean foods of 5B and 5C could be recommended to take a lot together for prevention from age-related chronic diseases.
The concentrations of total polyohenolic compound from extract of Paulownia tomentosa Stued. were water-soluble extract 7.98%, methanol extract 12.30% and ethanol extract 11.63%. The free radical scavenger activities of three extracts at the levels of 0.5% were higher than that of BHT(butylated hydroxytoluene). In antioxidative activities measured the concentrations of TBARS(thiobabituric acid reactive substances) in tissues microsome induced with Fe$\^$++/ascorbate, the water-soluble extract was errdctively suppressed in liver and spleen. In antioxidative activities determined by thiocyanate method against lipid peroxidation using linoleic acid, the methanol extract showed the higher compared with other extracts, but BHT showed the highest antioxidative activity. These results suggest that fruit extracts of Paulownia tomentosa Stued. showed to have relatively high concentrations of polyphenolic compounds and antioxidative activities.
콜레스테롤 함유식이(대조군)에 뽕나무(M군) 및 꾸지뽕나무(C군) 줄기껍질 수용성 추출물을 첨가하여 흰쥐에 급여시킨 후 혈청과 간장 지질 농도 및 각 조직중의 지질과산화물 함량에 미치는 영향을 검토하였다. 혈청 중성지질 농도는 대조군에 비교해서 M군에서는 유의적으로 감소하였고, C군에서는 감소경향을 보였다. C군에서 혈청 총 콜레스테롤 및 인지질 농도 및 M군에서 혈청 중성지질 농도는 대조군에 비해서 각각 저하하였다. 간장 콜레스테롤 농도는 대조군에 비해 C군 및 M군에서 저하경향을 나타내었으나, 중성지질 및 인지질 농도는 각군간에 유의적인 차이는 없었다. 흰쥐 각 조직의 생체막 지질과산화물 생성 정도의 지표인 TBARS의 상대적 농도는 뇌, 신장, 심장, 간장의 순으로 나타났다. 신장의 지질 과산화물 함량은 대조군에 비교해서 C군 및 M군에서는 유의적으로 감소하였으나, 뇌 및 간장의 지질 과산화물 농도는 오히려 유의적으로 증가하였다. 간장의 비헴철 함량은 대조군에 비해서 C군 및 M군에서 유의적으로 증가하였으며, 이러한 증가는 간장 지질 과산화물 함량 증가와 깊이 관련되는 것으로 시사되었다. 흰쥐 조직으로부터 분획한 microsome에 $Fe^{2+}$/ascorbate를 첨가하여 $37^{\circ}C$에서 반응을 시키지 않은 것(0 hr)으로부터 지질 과산화물을 측정한 결과에서는 각 군간에 유의적인 차이는 없었으나, $Fe^{2+}$/ascorbate를 첨가하여 1시간 반응시킨 간장 및 뇌 조직 microsome의 지질 과산화물은 대조구에서 현저히 증가하였다. 한편 간장 microsome에 $Fe^{2+}$/ascorbate 첨가 1시간 반응에서는 대조군에 비해 C군 및 M군에서 유의적으로 감소하였으나, 뇌 조직에서는 이러한 효과가 없었다. 이상의 결과에서 뽕나무 및 꾸지뽕나무 줄기껍질 수용성 추출물에는 혈청 중성지질 저하 작용 뿐만아니라 신장 및 간장 microsome의 지질과산화물 농도 저하작용이 인정되었다.
The objective of present study was to investigate the anti oxidative and hepatoprotective effects of tomato extracts. Total antioxidant capacity and total antioxidant response were 5.5 and $19.8{\mu}g$ Trolox equivalent per mg of tomato extract, respectively. DPPH radical scavenging activity of tomato extracts ($10mg\;ml^{-1}$) was 70% as compared to 100% by pyrogallol solution as a reference. The effect of the tomato extracts on lipid peroxidation was examined using rat liver mitochondria induced by iron/ascorbate. Tomato extracts at the concentration of $0.5mg\;ml^{-1}$ significantly decreased TBARS concentration. Tomato extracts prevented lipid peroxidation in a dose-dependent manner. The effect of the tomato extracts on reactive oxygen species (ROS) generation was examined using cell-free system induced by $H_2O_2/FeSO_4$. Addition of $1mg\;ml^{-1}$ of tomato extracts significantly reduced dichlorofluorescein (DCF) fluorescence. Tomato extracts caused concentration-dependent attenuation of the increase in DCF fluorescence, indicating that tomato extracts significantly prevented ROS generation in vitro. The effect of tomato extracts on cell viability and proliferation was examined using hepatocyte culture. Primary cultures of rat hepatocytes were incubated with 1mM tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) for 90 min in the presence or absence of tomato extracts. MTT values by addition of tomato extracts at the concentration of 2, 10, and $20mg\;ml^{-1}$ in the presence of t-BHP were 13, 33 and 48%, respectively, compared to 100% as control. Tomato extracts increased cell viability in a dose-dependent manner. These results demonstrate that tomato extracts suppressed lipid peroxidation and t-BHP-induced hepatotoxicity and scavenged ROS generation. Thus antioxidant and hepatoprotective effects of tomato extracts seem to be due to, at least in part, the prevention from free radicals-induced oxidation, followed by inhibition of lipid peroxidation.
본 논문에서는 당뇨에 의한 CYP2El의 유도와 이에 따른 지질과 산화의 증가에 비타민 C가 미치는 영향을 간 소포체와 미토콘드리아에서 알아보고자 하였다. Cy-tochrome P450의 함량은 간 소포체와 미토콘드리아 모두에서 정상과 당뇨간에 차이를 보이지 않았고, 비타민 C의 공급은 영향이 없었다. Superoxide anion에 의한 지질과 산화에 가장 큰 영향을 끼친다는 CYP2El에 대하여 immunoblotting으로 그 함량을 알아본 결과, 간 소포체 CYP2El이 당뇨에서 증가하고 비타민 C의 보강은 50mg/d의 공급으로도 현저한 감소를 보여 간 소포체 P450의 함량과는 다른 결과를 나타냈다. 간 미토콘드리아의 경우 소포체와 동량(20$\mu\textrm{g}$)의 단백질을 loading하였는데 CYP2El의 발현을 볼 수 없었다. 간 소포체와 미토콘드리아 NDMA demethylase의 활성이 정상군과 당뇨군에서 유의적인 차이를 보이지 않았으나, 250mg/d의 비타민 C 공급시 간 소포체에서는 유의적으로, 간 미토콘드리아에서는 유의적이지는 않으나 감소하였다. NDMA demethylase의 활성은 CYP1El의 함량을 반영한다고 알려져 있는데 본 연구에서는 동일한 pattern으로 진행되지는 않은 듯하다. NADPH-cyto-chrome c reductase의 활성은 NDMA demethylase의 활성과 양의 상관관계를 보였다. 따라서, 비타민 C의 공 급은 당뇨에 의한 CYP2El의 유도를 감소시키고 NDMA demethylase, NADPH-cyto-chrome c reductase와 같은 약물대사계 효소의 활성을 감소시켜 지질과 산화를 낮출 것으로 사료된다 그러나, 비타민 C의 공급량에 따라 조금씩 다른 결과를 보여 당뇨에 있어 가장 좋은 효과를 보일 수 있는 최적의 비타민 C 보강량을 결정하는 연구가 요구된다. 당뇨군에서 지질과 산화의 지표인 thiobar-bituric acid reactive substances(TBARS)의 함량이 간 소포체에서 유의적으로 증가하였고, 비타민 C의 공급랑에 의존하여 TBARS의 함량이 감소하였다. TBARS의 함량은 NDMA demethylase의 활성과 양의 상관관계를 보여 CYP2E1이 당뇨의 지질과 산화에 영향을 끼친다고 생각된다. 이러한 비타민 C의 항산화 효과는 비타민 C 자체의 항산화 능력, 비타민 E와 glutathione 같은 다른 항산화제의 절약 효과, CYP2El의 유도 저하를 통하는 것으로 생각되며 그중 어떤 것에 가장 큰 영향을 받는 지는 아직 알려지지 않았고 더욱 많은 연구가 요구된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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