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비천연 아미노산의 위치특이적 단백질 삽입을 위한 Amino Acyl-tRNA Synthetase 선별시스템 개발 (Establishment of a Selection System for the Site-Specific Incorporation of Unnatural Amino Acids into Protein)

  • 다우드 살림 이단;최인경;박중찬
    • 미생물학회지
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    • 제50권1호
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    • pp.1-7
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    • 2014
  • 생명체에서 비천연 아미노산을 단백질의 특정 위치에 삽입하는 방법으로 orthogonal suppressor tRNA와 여기에 비천연 아미노산을 특이적으로 결합시킬 수 있는 유전자 변형된 aminoacyl-tRNA synthetase (ARS)가 활용되고 있다. 이 기술개발을 위해서는 돌연변이를 유발한 ARS library로부터 비천연 아미노산만을 특이적으로 결합시킬 수 있는 변형된 ARS를 탐색하기 위한 선별시스템이 필요하다. 본 논문에서는 대장균에서 작용하는 2단계로 구성된 새로운 선별시스템을 개발하였다. 먼저 양성선별 시스템은 27번 잔기를 amber 코돈으로 치환한 Chloramphenicol acetyl transferase 유전자로 구성되어 있으며, 이유전자의 amber suppression에 의해 chloramphenicol 배지에서 생존함에 따라 활성을 나타내는 ARS를 최고 $9.0{\times}10^5$배로 농축할 수 있었다. 반면 음성선별 시스템은 대장균의 Topoisomerase II의 기능을 억제하는 단백질을 암호화하는 control of cell death B (ccdB) 유전자의 N-말단 앞에 3개의 amber 코돈을 삽입하여 제작하였다. 이 음성선별 시스템을 가진 대장균에 orthogonal pair인 Saccharomyces cerevisiae tyrosyl-tRNA synthetase (Scc TyrRS)와 amber suppressor tRNA를 형질전환하면 amber suppression으로 CcdB가 발현되어 대장균의 성장이 억제되는 것을 확인하였으며, 천연 아미노산에 대한 특이성을 가진 ARS를 효과적으로 제거하는 것을 관찰하였다. 따라서, 양성선별 및 음성선별 시스템을 순차적으로 거침으로써 무작위적으로 아미노산에 대한 특이성을 변형시킨 ARS 라이브러리로부터 비천연 아미노산을 suppressor tRNA에 특이적으로 결합하는 유전자 변형 ARS를 탐색하는데 유용하게 사용될 수 있을 것이다.

Feeding Value of Ammoniated Rice Straw Supplemented with Rice Bran in Sheep: II. In Situ Rumen Degradation of Untreated and Ammonia Treated Rice Straw

  • Orden, E.A.;Yamaki, K.;Ichinohe, T.;Fujihara, T.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제13권7호
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    • pp.906-912
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    • 2000
  • The effect of ammonia treatment and rice bran supplementation on the in situ rumen degradation of rice straw was determined using three Japanese Corriedale wethers fitted with permanent rumen cannula. About 4 g samples of diets containing 100% untreated rice straw (URS); 100% ammonia treated rice straw (ARS); 65% URS+30% rice bran (RB)+5% soybean meal (SBM) (T1); and 85% ARS+15% RB (T2) were incubated at 0, 4, 8, 16, 24, 48, 72, and 96 hours in the rumen of sheep to measure dry matter (DM), crude protein (CP) and neutral detergent fiber (NDF) degradability. The DM disappearance of ARS based diets were about 20% higher than that of URS based diets. Rice bran supplementation improved DM disappearance of URS but not on ammoniated straw. Degradation parameters showed that ammoniation increased rate (c) of straw degradation resulting to higher DM and fiber degradability but RB supplementation did not. ARS gave similar DM and CP solubility and effective rumen degradability (ED) with that of the supplemented groups indicating that ammoniation alone can give the same effect on rumen degradability of sheep receiving low quality roughage. All degradation parameters for NDF were consistently higher in ARS based-diets indicating improved fiber solubility. Rice bran supplementation did not affect degradation characteristics of the diets except on soluble DM and CP fraction (A) of URS but not on ARS.

Sorghum TCP transcription factor MULTISEED1 affects grain yield regulating at pedicellate spikelet fertility

  • Lee, Young Koung;Jiao, Yinping;Gladman, Nicholas;Chopra, Ratan;Burow, Gloria;Burke, John;Xin, Zhanguo;Ware, Doreen
    • 한국작물학회:학술대회논문집
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    • 한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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    • pp.25-25
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    • 2017
  • Inflorescence architecture mainly contributes to final grain yield in crops. Sorghum inflorescence is basically composed of one fertile sessile spikelet (SS) and two infertile pedicellate spikelets (PS). To identify regulatory factors involved in the inflorescence architecture, we screened an EMS mutagenesis population from the pedigreed sorghum mutant library. We found inflorescent architecture mutants, named as multi-seed mutants, msd, with gained fertile ability in PS and also an increased number of floral branches. In natural sorghum populations, it is not common that are fertile. A detailed dissection of developmental stages of wild type and msd1 mutant described that the PS in wild type do not have floral organs, including ovary, stigma, filament and anther, while the msd1 mutants generate intact floral organ in the sessile spikelet. We found MSD1 encoded a TCP transcription factor using bulk segregant analysis (BSA) of F2 population, and was a strongly enriched expression during inflorescence developmental stages. We proposed that MSD1 functions to suppress floral organ maintenance at PS during inflorescence development in Sorghum. To explore the regulatory network associated with PS fertility, whole genome expression profiling was performed at 4 different developmental stages in 6 various tissue types between wild type and msd1. Taken together, we demonstrated that MSD1 was involved in the plant hormone and maybe influenced program cell death in PS via the activation of plant hormonal pathway.

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고효율 효모 유전자 운반체의 개발 (Construction of the Stable and High Copy Number Yeast Vectors)

  • 김태국;최철용;노현모
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제16권6호
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    • pp.476-483
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    • 1988
  • 효모 유전자 운반체의 유형을 특징지우는 ARS1 (autonomous replicating sequence), CEN3 (centromere), 2 $\mu$m OR (yeast plasmid의 origin of replication)의 DNA 절편을 재조합하여 만든 유전자 운반체들의 형질전환력, 안정도 및 운반체 수를 효모균주 SHY4(cir$^+$)와 NNY1(cir$^{\circ}$)에서 비교 조사하였다. CEN3를 갖는 유전자 운반체는 매우 안정하나 세포당 수가 하나로 매우 낮으며 2 $\mu$m OR과 ARS1 을 동시에 갖는 유전자 운반체는 안정할 뿐만 아니라 세포당 수도 높으며 균주내에 존재하는 2 $\mu$m 플라스미드는 2 $\mu$m OR을 가지는 유전자 운반체의 복제에 영향을 준다는 사실을 알 수 있었다.

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Holstein 젖소의 호흡기 질병 백신에 대한 면역반응성과 전장 유전체 연관 분석 연구 (Genome-wide association study on immune-response for improving healthiness in Holstein dairy cattle)

  • 하승민;이동희;이상명;채정일;서강석
    • 한국동물위생학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.217-225
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    • 2019
  • To detect Single nucleotide polymorphisms (SNP) markers associated with Bovine viral diarrhea virus (BVDV) and Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) S/P ratio in Korean Holstein dairy cattle, Genome-wide association study (GWAS) was performed using Illumina BovineSNP50 Beadchip. The number of phenotype data and genotype data were 107, and 294. respectively. Phenotype data were collected for four periods (0 week, 1 week, 4 week, 24 week) after having vaccinated (0 week no vaccinated period). A total of 36,257 SNPs was remained after quality control had been done by PLINK. The result of GWAS showed 6 SNP markers (BTB-01704243, BTB-01594395, ARS-BFGL-NGS-118070, ARS-BFGL-NGS-111365, BTA-65410-no-rs, Hapmap38331-BTA-61256) under BVDV and 4 SNP markers (ARS-BFGL-NGS-109861, Hapmap53701-rs29017064, ARS-BFGL-NGS-71055, BTA-11232-no-rs) under BRSV. And also, 10 candidate genes found through 10 SNP markers (TBX18, CEP162, PAFAH1B1, METTL16, BRCA1, RND2, POLK, ENSBTAG00000051724, ADAM18, NRG3).

강제 흡출식 복사선 차폐장치가 온실의 기온측정에 미치는 영향 (Effects of an Aspirated Radiation Shield on Temperature Measurement in a Greenhouse)

  • 정영균;이종구;윤성욱;김현태;안은기;서재석;윤용철
    • 생물환경조절학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.78-85
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    • 2019
  • 본 연구에서는 본 연구실에서 자체적으로 제작한 비교적 제작이 간편하고 비용이 저렴한 강제 흡출식 복사선차폐장치(Aspirated Radiation Shield; ARS)로 측정한 실측 데이터를 바탕으로 장치의 성능과 온도 및 상대습도의 측정오차에 대하여 보고하고자 연구를 수행하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. ARS장치와 진주기상대에서 측정한 최대, 평균 및 최저온도의 범위는 각각 $2.0{\sim}34.1^{\circ}C$$0.4{\sim}31.5^{\circ}C$, $-6.1{\sim}22.2^{\circ}C$$-5.8{\sim}22.0^{\circ}C$, $-14.1{\sim}16.3^{\circ}C$$-14.0{\sim}15.1^{\circ}C$범위로 나타났다. 최대기온의 최저 및 최고온도에서 각각 $1.6^{\circ}C$$2.6^{\circ}C$정도 교내에서 측정한 값이 약간 높게 나타난 것을 제외하면, 두 기관에서 측정한 온도에 큰 차이가 없는 것을 알 수 있었다. 표준온도계의 측정값과 검증한 결과, ARS장치로 측정한 온도가 표준온도계에 비해 $-2.0^{\circ}C$정도 낮거나 $1.8^{\circ}C$보다 높게 나타나났다. 표준온도계와 상관분석 한 결과, 결정계수는 0.99정도였다. 팬의 유무에 따른 온도의 경우, 전체적으로 팬이 없는 경우가 최고, 평균 및 최저온도가 각각 $0.5{\sim}7.6^{\circ}C$, $0.3{\sim}4.6^{\circ}C$$0.5{\sim}3.9^{\circ}C$정도 높게 나타났다. 그리고 ARS장치와 진주기상대에서 측정한 일평균 상대습도는 전체적으로 ARS장치로 측정한 값이 약간 높은 경향이 있고, 특히 상대적으로 6월 27일, 7월 26일, 29일, 8월 20일에 측정한 값이 각각 5.7%, 5.2%, 9.1% 및 5.8%정도로 다소 높게 나타났지만, 두 기관의 월별 평균치는 2.0~3.0%정도로 미미한 수준이었다. 또한 ARS장치와 아스만 통풍습도계로 측정한 상대습도는 전체적으로 -3.98~+7.78%정도의 범위 내에 있는 것으로 나타났다. 진주기상대와 아스만 통풍습도계로 측정한 상대습도를 상관분석 결과, 결정계수가 각각 0.94 및 0.97정도로써 높은 상관관계를 보였다.

Arsenite Oxidation by Bacillus sp. Strain SeaH-As22w Isolated from Coastal Seawater in Yeosu Bay

  • Chang, Jin-Soo;Kim, In-S.
    • Environmental Engineering Research
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    • 제15권1호
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    • pp.15-21
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    • 2010
  • This study was conducted to evaluated seawater bacteria and their seasonal characteristics in the arsenic contaminated coastal seawater of Yeosu Bay, the Republic of Korea. Arsenite-oxidizing bacteria play an important role in the seawater of the arsenic contaminated bay, with a variety of arsenic resistance system (ars) genotypes being present during summer. Specifically, Bacillus sp. strain SeaH-As22w (FJ607342), isolated from the bay, were found to contain the arsB, arrA and aoxR type operons, which are involved in arsenic resistance. The isolated bacteria showed relatively high tolerance to sodium arsenite (III; $NaAsO_2$) at concentrations as high as 50 mM. Additionally, batch seawater experiments showed that Bacillus sp. strain SeaH-As22w completely oxidized 1 mM of As (III) to As (V) within 10 days. Ecologically, the arsenic-oxidizing potential plays an important role in arsenic toxicity and mobility in As-contaminated coastal seawater of Yeosu Bay during all seasons because it facilitates the activity of Bacillus sp. groups.

딸기재배 스마트 온실용 온습도 계측시스템의 성능평가 (Analyzing the Performance of a Temperature and Humidity Measuring System of a Smart Greenhouse for Strawberry Cultivation)

  • 정영균;이종구;안은기;서재석;김현태;윤용철
    • 생물환경조절학회지
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    • 제28권2호
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    • pp.117-125
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    • 2019
  • 본 연구는 기존에 사용하여 왔고, 최근에 온습도의 정확도를 검증하였던 강제 흡출식 복사선 차폐장치(Aspirated Radiation Shield; ARS)와 모 기업(A 회사)에서 개발한 시스템으로 측정한 온습도를 비교하여 성능을 검토한 후, 시스템의 성능을 개선할 목적으로 수행되었다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 딸기의 무성도가 두 계측시스템에 영향을 미친 경우를 제외하면, 전체적으로 볼 때 플레이트 2개의 시스템이 1개보다 복사선 차폐효과가 미미하지만 좋은 것으로 나타났다. 그리고 A회사의 시스템과 ARS장치로 측정한 최고온도의 전체적인 범위는 각각 $20.5{\sim}53.3^{\circ}C$$17.8{\sim}44.1^{\circ}C$정도로써 A사 제품이 $2.7{\sim}9.2^{\circ}C$정도 높게 나타났고, 일별 최대 편차는 $12.2^{\circ}C$ 정도였다. 평균온도의 경우, 두 기관의 전체적인 범위는 각각 $12.4{\sim}38.6^{\circ}C$$11.8{\sim}32.7^{\circ}C$정도로써 A사 시스템이 $0.6{\sim}5.9^{\circ}C$정도 높게 나타났고, 일별 최대 편차는 $6.7^{\circ}C$정도였다. 최저온도의 경우도 각각 $4.2{\sim}28.6^{\circ}C$$2.9{\sim}26.4^{\circ}C$정도로써 A사 제품이 $1.3{\sim}2.2^{\circ}C$정도 높게 나타났고, 일별 최대 편차는 $2.9^{\circ}C$정도로써 두 기관의 장치로 측정한 온도에 편차가 있는 것으로 나타났다. 또한 상대습도의 경우, A회사와 ARS장치로 측정한 평균상대습도의 전체적인 범위는 각각 52.9~93.3% 및 55.3~96.5%정도로써 A회사의 시스템이 ARS장치보다 2.4~3.2%정도 낮게 나타나는 경향을 보였다. 그러나 일별로 비교하여 보면, 최대 18.0%정도 A회사의 시스템이 낮게 나타나는 날도 있었다. 결국 상대습도도 온도와 마찬가지로 미미하긴 하지만 두 기관의 장치로 측정한 온도에 편차가 있는 것으로 나타났다.

Intravenous levetiracetam versus phenobarbital in children with status epilepticus or acute repetitive seizures

  • Lee, Yun-Jeong;Yum, Mi-Sun;Kim, Eun-Hee;Ko, Tae-Sung
    • Clinical and Experimental Pediatrics
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    • 제59권1호
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    • pp.35-39
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    • 2016
  • Purpose: This study compared the efficacy and tolerability of intravenous (i.v.) phenobarbital (PHB) and i.v. levetiracetam (LEV) in children with status epilepticus (SE) or acute repetitive seizure (ARS). Methods: The medical records of children (age range, 1 month to 15 years) treated with i.v. PHB or LEV for SE or ARS at our single tertiary center were retrospectively reviewed. Seizure termination was defined as seizure cessation within 30 minutes of infusion completion and no recurrence within 24 hours. Information on the demographic variables, electroencephalography and magnetic resonance imaging findings, previous antiepileptic medications, and adverse events after drug infusion was obtained. Results: The records of 88 patients with SE or ARS (median age, 18 months; 50 treated with PHB and 38 with LEV) were reviewed. The median initial dose of i.v. PHB was 20 mg/kg (range, 10-20 mg/kg) and that of i.v. LEV was 30 mg/kg (range, 20-30 mg/kg). Seizure termination occurred in 57.9% of patients treated with i.v. LEV (22 of 38) and 74.0% treated with i.v. PHB (37 of 50) (P=0.111). The factor associated with seizure termination was the type of event (SE vs. ARS) in each group. Adverse effects were reported in 13.2% of patients treated with i.v. LEV (5 of 38; n=4, aggressive behavior and n=1, vomiting), and 28.0% of patients treated with i.v. PHB (14 of 50). Conclusion: Intravenous LEV was efficacious and safe in children with ARS or SE. Further evaluation is needed to determine the most effective and best-tolerated loading dose of i.v. LEV.

꽃사슴에 있어서 육림부산물 사일리지, 칡 사일리지 및 갈잎건초 급여에 따른 건물채식량, 소화율 및 질소출납의 비교 (Comparison of Dry Matter Intake, Digestibility, and Nitrogen Balance in Spotted Deer (Cervus nippon) fed Forest by-product Silage, Arrowroot (Pueraria thunvegiana) Silage and Oak Browse (Quercus aliena) Hay)

  • 전병태;김언현;이상무;김경훈;문상호
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제44권1호
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    • pp.87-94
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    • 2002
  • 본 실험은 육림부산물 발효사료의 사슴용 사료가치를 평가하기 위해 꽃사슴에게 육림부산물 사일리지(FBS), 칡 사일리지(ARS) 및 수입 갈잎건초(OLH)를 급여하여 건물채식량, 소화율 및 질소출납을 상호 비교하였다. 건물소화율은 ARS가 가장 높았고 OLH가 가장 낮아 처리구간에 유의성(P$<$0.05)이 인정되었다. 조단백질 소화율의 경우는 OLH구가 FBS와 ARS구에 비해 현저히 낮은(P$<$0.05) 소화율을 나타냈다. 조섬유 소화율의 경우는 FBS가 가장 높고 OLH가 가장 낮았다. 건물채식량은 OLH가 가장 높아 ARS와의 사이에는 유의성(P$<$0.05)이 인정되었으나 FBS와의 사이에는 인정되지 않았다. 그러나 체내에서 이용 가능한 가소화 건물채식량으로 환산했을 경우 차이가 거의 없었다. 체내에 축적된 질소와 섭취질소에 대한 축적질소의 비율은 처리구간에 유의성은 인정되지 않았으나 FBS가 가장 높아 체내 질소의 이용효율이 가장 좋았던 것으로 평가되었다. 결과적으로 육림부산물 사일리지는 다양한 사료자원으로 구성되어 사슴의 기호성이 양호하고 높은 소화율과 건물채식량 및 영양소의 체내 이용성을 나타내고 있어 사슴용 사료로서 충분한 가치를 갖고 있는 사료자원으로 평가되었다.