• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제13권7호
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• pp.3367-3371
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• 2012

Objective: To investigate the effects of histone deacetylase 6 (HDAC6) siRNA on cell proliferation and cell apoptosis of the HeLa cervical carcinoma cell line and the molecular mechanisms involved. Methods: Division was into three groups: A, the untreated group; B, the control siRNA group; and C, the HDAC6 siRNA group. Lipofectamine 2000 was used for siRNA transfection, and Western blot analysis was used to determine the protein levels. Cell proliferation and apoptosis were characterized using a CCK-8 assay and flow cytometry, respectively. Results: HDAC6 protein expression in the HDAC6 siRNA-transfection group was significantly lower (P < 0.05) than in the untreated and control siRNA groups. The CCK-8 kit results demonstrated that the proliferation of HeLa cells was clearly inhibited in the HDAC6 siRNA transfection group (P < 0.05). In addition, flow cytometry revealed that the early apoptotic rate ($26.0%{\pm}0.87%$) was significantly elevated (P < 0.05) as compared with the untreated group ($10.6%{\pm}1.19%$) and control siRNA group ($8.61%{\pm}0.98%$). Furthermore, Western blot analysis indicated that bcl-2 protein expression in the HDAC6 siRNA-transfection group was down-regulated, whereas the expression of p21 and bax was up-regulated. Conclusion: HDAC6 plays an essential role in the occurrence and development of cervical carcinoma, and the down-regulation of HDAC6 expression may be useful molecular therapeutic method.

• 대한핵의학회지
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• 제34권2호
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• pp.144-153
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• 2000

목적: 피부세포인 A431세포주에서 방사선 조사에 의한 세포고사가 방사선량과 방사선 조사 후 경과시간에 따라서 어떻게 변하는지를 밝혀보고, 방사선에 의해 유도된 수선유전자의 발현을 방사선량별, 조사 후 경과시간별로 분석하여 세포고사와 어떤 관계가 있는지 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 한국 세포주은행으로부터 분양받은 피부상피암 세포의 일종인 A431을 Cs-137 세포조사기를 이용하여 5 Gy, 25 Gy씩 조사하고 4, 12, 48시간이 지난 다음 세포를 모아 유세포계측법을 이용하여 고사세포를 계수하였다. 또한 이 세포들을 Northern blot analysis, Western blot analysis를 시행하여 방사선량별, 경과시간별로 유전자의 변화를 분석하였다. 각 실험군간의 통계적 유의성은 SPSS 통계프로그램을 사용하여 MANOVA test에 의해 검정하였으며, p값 0.05 미만을 유의한 수준으로 판정하였다. 결과: 유세포 계측기로 측정한 고사세포의 비율은 방사선 조사 후 12시간째에 가장 유의하게 증가하였다 (p<0.01). DNA수선유전자의 발현은 5 Gy 조사 후 p53, p21, hRAD 유전자가 12시간째에 증가하였고, 25 Gy 조사 후에는 hRAD50과 p21이 12시간에 증가하였으며, p53과 GADD45는 12시간까지 별 변화가 없었으나 이후 증가하여 48시간에 가장 높은 발현을 보였다. 결론: 피부상피암세포에서 방사선에 의해 유도되는 세포고사는 방사선 조사 후 12시간에 가장 현저해지는 것을 알 수 있었으며, 이 세포고사에 DNA수선 유전자가 밀접한 관련이 있을 것으로 보이는데, 특히 최근에 발견된 hRAD50 유전자도 세포고사와 밀접한 관련이 있을 것으로 사료되었다.

• 대한암한의학회지
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• 제20권2호
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• pp.13-21
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• 2015

Objective : The objective of this study was to investigate the experimental efficacy of anti-tumor activity of the complexed herbal formula, Onbaekwon (OBW), which was derived from the literature of Traditional Korean Medicine, Dongeuibogam. Methods : Nine Cancer cell lines, LoVo, MCF-7, HepG2, AGS, A549, NCI-H69, HL-60, Sarcoma 180, LL/2, were prepared and the cytotoxicity was assessed by 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-dephenyl tetrazolium bromide (MTT) assay. Four of them, NCI-H69, HL-60, Sarcoma 180, and LL/2, showed strong cytotoxic activities and they were additionally undergone flow cytometry to find out their effects on apoptosis. ICR male mice were implanted with Sarcoma 180 intraperitoneally and divided into 8 species for each group. Control group was treated with normal saline, positive control group was treated with cyclophosphamide 8mg/kg, and experimental group was treated with OBW 1 g/kg. Results : Among 9 cancer cell lines, NCI-H69, HL-60, Sarcoma 180, and LL/2, expressed less than 0.10 mg/ml of $IC_{50}$ under 0.1~1mg/ml of OBW. NCI-H69, HL-60, Sarcoma 180, and LL/2, showed dose-dependent efficacy of apoptosis. When Sarcoma 180 cancer cell was implanted in ICR male mice and treated with the OBW, they prolonged the median overall survival for 0.8 days, from 17.5 to 18.3. Conclusion : OBW showed strong cytotoxicity to some cancer cells, which are NCI-H69, HL-60, Sarcoma 180, and LL/2, and its apoptotic activity was dose-dependent. OBW prolonged the median survival of mice implanted with Sarcoma 180. Further researches would be expected to support the efficacy of OBW.

• 한국식품영양과학회지
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• 제32권7호
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• pp.1108-1113
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• 2003

본 연구에서는 방사선 손상 경감효과를 나타내는 기호식품을 발굴하고자 국내에서 주로 음용되고 있는 녹차의 방사선 손상 경감효과를 확인하기 위하여 고선량 및 저선량 방사선을 마우스에 조사하고 소장움 생존, 내재성 비장 조혈세포집락 형성 및 apoptosis 유발 등을 관찰하였으며, 그 효과를 방사선 방호효과가 알려져 있는 diethyldithiocarbamate(DDC)와 비교$.$관찰하였다. 생존 소장움의 수는 방사선 조사 전 녹차 투여군(경구투여군 : p<0.01, 복강내 투여군 : p<0.01) 및 DDC 투여군(p<0.005)에서 유의성있게 증가되었다. 내재성 조혈세포집락 형성은 방사선 조사 대 조군에 비하여 조사 전 복강내 투여한 군(p<0.05)에서만 유의성 있는 증가를 나타냈으며, DDC 투여군에서는 효과를 관찰할 수 없었다. 방사선에 의한 apoptotic cell의 형성은 방사선 조사 전 녹차 투여군(경구 투여군 : p<0.005, 복강내 투여군 : p<0.05)및 DDC투여군 (p<0.005)에서 통계적으로 유의성 있게 감소되었다. 이상의 결과에서 녹차의 방사선 손상 경감효과를 조혈세포의 생존과 회복, 소장움 세포 생존 및 방사선에 의한 apoptosis 유발억제를 통하여 확인하였으며, 이는 독성이 적은 천연물이라는 관점에서 방사선 손상 경감 음료로서 적용이 가능할 것으로 사료되며 추후 유효 분획 및 성분에 관한 연구가 요구된다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제39권3호
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• pp.77-81
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• 2015

본 연구에서 배아의 생식세포 동결에 가장 흔히 쓰이고 있는 두 가지 동결 보호제, 즉 DMSO와 EG의 독성을 비교하고자 생쥐 수정란 모델을 이용한 실험을 하였다. 생후 6주령의 암컷 생쥐 $F_1$ hybrid mice에 10 IU의 PMSG를 복강 주사하여 과배란을 유도하고, 2-세포기 배아를 획득하고 DMSO와 EG 각각 노출시킨 후, 배양을 하였다. 배반포의 전체 세포수는 2-세포기 단계에서 DMSO($68.1{\pm}24.1$)로 EG($81.2{\pm}27.0$) 혹은 control($99.0{\pm}18.3$)(p<0.001) 처리구에 비해서 유의적으로 낮았다. DMSO 처리구가 EG 처리구에 비해 세포수가 적었다. DMSO($15.4{\pm}1.5$)와 EG($10.2{\pm}1.4$) 두 처리구는 대조구($6.1{\pm}0.9$, p<0.0001)와 비교해서 배반포에서 세포사 비율이 더 높음을 확인했다. 또한, DMSO 처리구는 EG 처리구(p<0.001)보다 더 많은 세포사멸된 세포가 확인되었다. DMSO 또는 EG 처리군과 대조군 사이에는 배아 부화율에 있어서 차이가 있었으며, 이는 배아에 대한 동결 보호제의 잠재적인 독성을 확인한 결과였다. 이번 연구에서 장기간 처리했을 때 EG 처리군보다 DMSO 처리군에서 배아발달과 세포수가 저하된 것은 DMSO의 독성이 더 높을 것으로 사료된다.

• 한국임상수의학회지
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• 제19권2호
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• pp.153-158
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• 2002

Ovaries from total 192 slaughtered cows(154 Korean native cows and 38 Holstein cows) were collected during the slaughtering process in Kimhae, Changyoung and Yangsan abattoirs in Kyungnam province from January 2001 to January 2002. In order to investigate incidence of the ovarian cysts, anatomical, histological observations were performed and also TUNEL methods and PCNA antibody by immunogistochemical methods for diagnostic accuracy of cysts in a few ovaries were applied. Apoptotic positive cells by TUNEL method appeared not or a few in cystic walls but appeared more number in normal large follicular walls and the proliferative positive cells by PCNA antibody appeared numerous in normal large follicular walls but not or a few in cystic walls. The incident rates of ovarian cysts were 19.5% in Korean native cows and 18.4% in Holstein cows. The incident rates of ovarian cysts in Holstein cows were lower than that of Koran native cows. The incident rates of follicular cysts and luteal cysts in Korean native cows were 11.7% and 7.8% respectively. The incident rates of follicular cysts and luteal cysts in Holstein cows were 10.5% and 7.9%, respectively. Higher incidence proportions of ovarian cysts according to seasons in Korean native cows were ordered as spring (29.8%), autumn (21.4%) winter (14.3%) and summer (6.7%). Rates of cows with single cyst and multiple cysts were 63.3%(19 heads /30 heads) and 36.7%(11 heads/30 heads) in 30 cystic Korean native cows, respectively. Cystic cows with corpus luteums were 50.0%(15 heads) in 30 Korean native cows and 42.9%(3 heads) in 7 dairy cows, respectively. Among 15 cystic Korean native cows with corpus luteums, rates of cows with single corpus luteum were 66.7%(10 heads) and rates of multiple corpus luteum were 33.3%(5 heads ), respectively. The average diameter of cysts and corpus luteums in cystic ovaries were 21.0$\times$17.1 mm and 18.1$\times$13.8 mm in 30 Korean native cows and 20.6$\times$17.7 mm and 19.3 $\times$ 14.9 mm in 7 Holstein cows, respectively. So the average sizes of cysts in cystic ovaries were larger than those of corpus luteums.

• 생명과학회지
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• 제14권1호
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• pp.61-66
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• 2004

식용식물 Capsicum annuum L., Lactucs dentata Makino., Sedum sarmentosum Bunge, Perilla frutescens Brit., Agastache rugosa Kuntz, Equisetum arvense L., Chrysanthemum coronarium, Arctium lappa, Cinnamomum camphora Sibe.들의 MCF-7 mammary gland adenocarcinoma cell line에 대한 증식억제효과를 관찰하기 위해 MTT 비색정량법을 이용하였다. 그 결과 Cupsicum annuum L. 추출시료를 첨가한 경우에 MCF-7세포의 성장은 현저한 감소를 보였으며, 결과에서 분명한 항암효과를 관찰할 수 있었다. 특히 Capsicum annuum L. leaf은 1 $\mul/ml$ 첨가에서 35,3%의 증식억제효과를 보였고, 2.5 $\mul/ml$에서 42.9%, 7.5 $\mul/ml$에서 94.8%의 세포성장억제를 관찰할 수 있었다. Capsicum annuum L. fruit unripen 추출물 10 $\mul/ml$에서 75%, 25 $\mul/ml$에서 80%의 성장억제률을 보였다. Equisetum arvense L. 와 Lactuca dentata Makino. var. flaviflora Makino에서도 세포성장이 억제됨을 관찰할 수 있었으며, Lactuca dentata Makino. var. flaviflora Makino추출시료 첨가군에서는 10 $\mul/ml$ 첨가에서 30%, 25 $\mul/ml$에서 52%의 성장억제률을 보였다. Equisetum arvense L.은 10 $\mul/ml$ 첨가군에서 11%, 25 $\mul/ml$에서 25%의 성장억제률을 보였다. 배양세포의 형태변화를 관찰해 본 결과에서도, 첨가시료가 Capsicum annuum L. leaf인 경우 착상이 어렵고 3일부터는 세포탈락과 세포파괴가 일어나기 시작하여 6일째엔 거의 모든 세포에서 세포사현상이 관찰되었다. 그리고 Capsicum annuum L. fruit unripen와 Lactuca dentata Makino. var. flaviflora Makino 추출액을 첨가한 경우에도 배양4일에 세포의 변형과 성장지연이 관찰되었으며, 8일째에 파괴되기 시작하여 배양14일과 19일에 많은 세포사현상의 파편들이 관찰되었다. Equisetum arvense L.는 배양4일에 세포성장은 지연되었으나 여전히 잘 자랐으며 일부세포에서 변형이 관찰되었다. 12일째에도 성장은 계속되었고 일부세포만이 변형을 보였으며 18일째에도 비슷한 결과로 관찰되었다.

• 대한수의학회지
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• 제49권1호
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• pp.17-22
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• 2009

The effect of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang (BZYQT) on the changes of ultraviolet (UV) light B radiation-induced apoptotic sunburn cell (SBC) and epidermal ATPase-positive dendritic cell (DC) in SKH1- hr or ICR mouse were investigated. The mice were treated with UVB (200 mJ/$cm^2$) and were sacrificed 24 h later. BZYQT (50 mg/kg of body weight) or vehicle (saline) was given i.p. at 36 and 12 h before irradiation, and 30 min after irradiation or BZYQT cream (0.2%) or cream base (vehicle) was topically treated at 24 h and 15 min before irradiation, and immediately after irradiation. The skin of SKH1-hr mouse prepared from the back of untreated mice exhibited about 0.3 SBC/cm length of epidermis, and 24 h after UV irradiation, the applied areas show an increased number of SBCs. But the frequency of UVB-induced SBC formation was reduced by intraperitoneal injection of BZYQT extract (p < 0.01). The numbers of DC in normal ICR mouse were 628.00 ${\pm}$ 51.56 or 663.20 ${\pm}$ 62.58 per $mm^2$ of ear epidermis. By 1 day after UVB treatment, the number of ATPase-positive cells/$mm^2$ were decreased by 39.0% or 27.1% in i.p. or topical application group with vehicle. Treatment of BZYQT was associated with increase of 33.9% in i.p. group (p < 0.05) or 2.7% in topical application group in the number of ATPase positive cells compared with the irradiation control group. The results presented herein that BZYQT administration could reduce the extent of skin damages produced by UVB.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제28권6호
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• pp.1007-1021
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• 2018

Cancer represents one of the most significant threats to human health on a global scale. Hence, the development of effective cancer prevention strategies, as well as the discovery of novel therapeutic agents against cancer, is urgently required. In light of this challenge, this research aimed to evaluate the effects of several potent bioactive peptides and proteins contained in crocodile white blood cell extract (cWBC) against LU-1, LNCaP, PC-3, MCF-7, and CaCo-2 cancer cell lines. The results demonstrate that 25, 50, 100, and $200{\mu}g/ml$ cWBC exhibits a strong cytotoxic effect against all investigated cell lines ($IC_{50}$ $70.34-101.0{\mu}g/ml$), while showing no signs of cytotoxicity towards noncancerous Vero and HaCaT cells. Specifically, cWBC treatment caused a significant reduction in the cancerous cells' colony forming ability. A remarkable suppression of cancerous cell migration was observed after treatment with cWBC, indicating potent antimetastatic properties. The mechanism involved in the cancer cell cytotoxicity of cWBC may be related to apoptosis induction, as evidenced by typical apoptotic morphology features. Moreover, certain cWBC concentrations induced significant overproduction of ROS and significantly inhibited the $S-G_2/M$ transition in the cancer cell. The molecular mechanisms of cWBC in apoptosis induction were to decrease Bcl-2 and XIAP expression levels and increase the expression levels of caspase-3, caspase-8, and p53. These led to a decrease in the expression level of the cell cycle-associated gene cyclin-B1 and the arrest of cell population growth. Consequently, these findings demonstrate the prospect of the use of cWBC for cancer therapy.

• Journal of Radiation Protection and Research
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• 제40권1호
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• pp.65-72
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• 2015

방사선 노출에 따른 피부손상의 기본이론들은 정립되어 있지만, 정확한 기전에 관해서는 알려지지 않은 실정이다. 본 연구에서는 감마선 조사 후 용량 및 시간에 따라 돼지 피부의 장애를 육안 및 조직학적인 변화를 통해 평가하고 cyclooxygenase(COX)-2 발현 정도를 비교하고자 하였다. 미니돼지의 등 쪽 피부에 20-70 Gy 감마선을 국소조사 후 12 주 동안 육안적인 변화를 관찰하고 생검을 통해 조직학적인 변화를 관찰하였다. 방사선 조사 후 피부의 기저세포층에서의 세포자멸사와 표피층의 두께 변화를 평가하였고 COX-2 발현 정도를 면역염색을 통하여 비교하였다. 방사선 조사 후 피부 장애는 용량이 증가할수록 피부손상이 더욱 심하였으며 초기에 발적 소견을 보이다가 50 Gy 이상 조사군에서는 미란과 궤양으로 이어졌다. 조직학적인 변화는 육안적인 소견과 일치하였다. 방사선 조사 후 3일부터 기저세포에서 세포자멸사가 관찰되었으며 기저세포수의 감소가 유발되었으며 이러한 변화는 용량이 증가할수록 더욱 증가하였다. 방사선 조사 후 표피층의 두께는 3일 무렵에 일시적으로 증가하다가 점차 감소하였으며 20, 30, 40 Gy 조사 군에서는 다시 회복되는 소견이 관찰되었으나 50, 70 Gy 조사 군에서는 다시 회복되지 못하고 표피창의 두께 소실을 보였다. 방사선 조사 후 피부에서의 COX-2 발현은 피부손상정도와 일치하게 관찰되었다. 방사선 조사 후 COX-2 발현은 방사선의 용량이 증가할수록 발현이 증가하였고 시간이 증가할수록 증가하였다. 이러한 조직학적인 변화와 함께 방사선 손상을 일으키는 신호전달에 관여하는 COX-2 발현이 방사선조사 용량에 비례하여 증가하며 이러한 단백질의 발현은 피부손상과 관련성이 높은 것으로 사료된다.