• 제목/요약/키워드: antiserum

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금붕어(Carassius auratus)와 연어(Oncorhynchus keta)에서 췌장괴저 바이러스(IPNV)의 분리에 대하여 (Isolation of Infectious Pancreatic Necrosis Virus from Goldfish (Carassius auratus) and Chum Salmon (Oncorhynchus keta) in Korea.)

  • 하영칠;홍순우;김미희
    • 미생물학회지
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    • 제22권2호
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    • pp.85-90
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    • 1984
  • Two viruses were isolated from kidney and spleen tissues of goldfish(Carasius auratus) and the ovarian fluid of chum salmon(Oncorhynchus keta). Both viruses replicated and produced cytopathic effect in EPC, CHSE-214, and CHH-1 cell lines at $15^{\circ}C$. The isolates were resistant to pH 3 and choloroform. Antiserum to infections pancreatic necrosis virus(IPNV) serotype VR 299 neutralized the infectivity of both of the isolates. Electron microscopy showed that the particles had typical IPNV particle morphology with average diameters of 55nm, This paper describes the first isolation of viruses infecting cultured fish in Korea.

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Olive flounder (Paralichthys olivaceus) leukocytes stimulated with poly (I:C) could kill Miamiensis avidus (Ciliophora: Scuticociliatia) only when ciliates were immobilized by antiserum

  • Kang, Yue Jai;Kim, Ki Hong
    • 한국어병학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.109-113
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    • 2018
  • The purpose of the present study was to determine whether the scuticocidal activity of olive flounder (Paralichthys olivaceus) head-kidney leucocytes can be enhanced by stimulation with polyinosine-polycytosine [poly (I:C)]. The growth of Miamiensis avidus was not affected by exposure to unstimulated or poly (I:C)-stimulated leucocytes alone, heat-inactivated immune serum alone, or unstimulated leucocytes plus heat-inactivated immune serum. However, leucocytes stimulated with poly (I:C) showed clearly high scuticocidal activity against M. avidus in the presence of heat-inactivated immune serum. Furthermore, numerous poly (I:C)-stimulated leucocytes occupied the surface of scuticociliates in the presence of the heat-inactivated immune serum, which led to lysis of scuticociliates. These results suggest that both of the stimulation of leukocytes and the immobilization of scuticociliates are necessary to kill scuticociliates by leukocytes.

동자개 Pseudobagrus fulvidraco의 난황단백질과 난황단백전구체의 분리와 면역학적 특성 (Purification and Immunochemical Characteristics of Yolk Protein and Vitellogenin in Korean bullhead Pseudobagrus fulvidraco)

  • 임상구;강봉정;한창희
    • 한국양식학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.285-293
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    • 2008
  • 본 연구에서는 동자개, Pseudobagrus fulvidraco의 난황단백질(Vitellin, Vg 난황단백전구체(Vitellogenin, Vg)를 분리하였고, 그 특성을 분석하였다. 난황단백질은 성성숙한 난소 난으로부터 gel filtration chromatography (Sephadex - G200)을 이용하여 분리되었다. 동자개의 난황단백질은 SDS-PAGE에서 분자량이 107 kDa인 1개의 subunit로 구성되어 있었고, 총 난황 단백질 분자량은 360 kDu으로_ 측정되었다. 난황단백전구체는 성숙한 수컷에 $E_2$를 삽입하여 유도하였고, anion exchange chromatography (Momo Q HR 5/5 column)을 이용하여 분리되었다. 분리된 난황단백전구체의 총 분자량은 450 kDa으로 계산되었고, 이는 SDS-PAGE하에서 110 KDa, 125 kDa와 147 kDa로 3개의 subunit로 구성되어져 있었다.

장출혈성대장균 O157:H7 유래 재조한 Intimin의 발현과 그의 면역반응 효과 (Expression of Recombinant Intimin of Escherichia coli 0157:H7 and its Effect of Immune Response)

  • 김도균;이상래;김정우
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제46권3호
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    • pp.495-502
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    • 2004
  • 장출혈성대장균 O157:H7의 eae유전자 산물인 intimin은 장 상피세포의 부착성을 조절하는 단백질로 알려져 있다. Intimin의 C-말단 아미노산 잔기와(His)$_6$이 혼합되어 이루어진 plasmid를 작성하여 재조합 단백질(34kDa)을 발현시켰다. 발현된 재조합 intimin 단백질의 면역원성을 확인하기 위해 토끼와 산란계에서 항혈청 및 난황항체(IgY)를 제조하였다. O157:H7에서 분리한 세포외막단백질(OMPs)과 제조된 항혈청과의 western blot상의 반응에서 약 94kDa의 위치에서 양성반응을 보여 발현된 재조합 단백질의 면역원성 효과가 확인되었다. 면역원성이 확인된 단백질을 산란계에 면역한 결과, 면역 후 4${\sim}$6주 경부터 높은 수준의 항체가 형성되었다. 재조합 intimin 단백질에 대한 난황 항체의 항원결합능력 조사를 위하여 중화반응시험을 수행한 결과, 재조합 intimin 단백질에 대한 난황 항체가 O157:H7과 강하게 결합하는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구에서 발현된 재조합 intimin 단백질은 토끼와 산란계의 면역반응을 유도할 수 있는 효율적인 면역원임과 동시에 난황 항체 생산을 위한 항원으로의 이용가능성이 확인되었다.

육제품에 첨가된 대두단백 정량을 위한 면역분석법 개발에 관한 연구: 대두단백 정량을 위한 항체생산 및 특성조사 (Development of Immunoassay Systems for the Assay of Soy Protein in Meat Products; Antibody Production and Properties for the Assay of Soy Protein)

  • 김천제;김종배;김병철;이승배;정성원;신현길;고원식
    • 한국식품과학회지
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    • 제24권3호
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    • pp.204-208
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    • 1992
  • 본 실험은 가공한 육제품에 첨가된 대두단백질(soy protein)을 정량하기 위한 면역분석(Immunoassay)법의 개발을 목적으로 실시하였다. Isolated soy protein(ISP)의 whole buffer extract(WBE) 분획을 SDS 처리 후 토끼에 주사하여 생산된 항혈청의 항체역가를 indirect ELISA법으로 조사하였을 시 1 : 10,000 이상에서도 반응을 나타내었다. 시료의 처리시 SDS의 최종농도가 0.03% 이상에서는 항원-항체 반응이 심각하게 저지되었으나, 0.02% 이하에서는 거의 영향을 미치지 않았다. 본 실험에 사용한 항체는 SDS로 변성된 항원(대두단백질)은 물론 SDS를 투석으로 제거한 재생항원(renatured antigen)과도 반응하였으나 그 정도는 변성항원에 비하여 약간 낮았다. 검정곡선(calibration curve)을 indirect competitive ELISA 법으로 작성하였을 시 ISP를 100 ng/100 ml까지 측정할 수 있는 감도(sensitivity)를 얻었다.

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동종면역항혈청(同種免疫抗血淸)에 의한 제주마(濟州馬) 혈액형(血液型) 분류(分類) (Classification of the blood groups in Cheju native horses by the antiserum of isoimmunization)

  • 한방근;장덕지;김상근;송본관
    • 대한수의학회지
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    • 제32권3호
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    • pp.451-456
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    • 1992
  • Seventeen antiserum identified by stormont method were used for investigation of appearance type of red blood cell in Cheju horse. Phenotype $A_1$, A', Z, $ZZ_2$, C, K, $P_1$, Q, R, S, $U_2$, X and $N_1$ were classified by Hemolytic reaction and agglutination in $E_2$, H, J and $T_1$, Hokkaido horse and Thoroughbred horse were compared with the type of red blood cell. The results obtained are as follows ; 1. According to the appearance frequency of red blood cell the phenotypes could be classified by 6 groups among horses tested; I group : C, $A_1$, $ZZ_2$, $E_2$, S, Q, II : $P_1$, $U_2$, X, III : A', R, IV : $T_1$, K, V : H, J, VI, $N_1$, Z. 2. In group I the type of C, $A_1$ and $ZZ_2$ showed the Similar frequency among horses but the type of $E_2$, S and Q was lower in Cheju horse than Hokkaido and Thoroughbred horse. 3. In group II there was no differences in the type of $P_1$ and among three species, but Thoroughbred horse was lowest as 11.2 percent than Cheju and Hokkaido horse. 4. The type of $U_2$ and X were highest in Cheju and Hokkaido horse but lowest in Thoroughbred horse. 5. The type of A' and R observed higher appearance frequency in Hoklcaido horse but in the Thoroughbred and Cheju horse appearance ratio were Strikingly lowered. 6. The type of $T_1$ and K was shown higher appearance frequency in Cheju and Thoroughbred horse similarily but lowered in Hokkaido horse. 7. In group V the type of H and J showed similarily as 30 to 40 percent in Cheju and Thoroughbred but no observation in Hokkaido horse. 8. The type of $N_1$ and Z which are group VI was great difference between Cheju and Hokkaido horse but higher in Hokkaido than Cheju horse while there was no observation in thoroughbred horse.

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양식넙치에서 분리된 Edwardsiella tarda의 생화학적 및 혈청학적 특성에 관한 연구 (Studies on the biochemical and serological characteristics of Edwardsiella tarda isolated from cultured flounder, Paralichthys olivaceus)

  • 방종득;전세규;박수일;최윤정
    • 한국어병학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.29-35
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    • 1992
  • 1990년 7월부터 1991년 11월까지 우리나라에서 넙치 양식이 주로 이루어지고 있는 동해 및 남해안과 제주도 연안에 위치하고 있는 여러 넙치 양식장을 대상으로 넙치 에드와드병의 원인균인 Edwardsiella tarda를 분리하여, 이들의 생화학적 및 혈청학적 특성을 알아 보았다. 분리된 에드와드균은 131균주로서 이들의 생화학적 특성을 조사한 결과, 균주 모두 $H_2S$ 및 indole를 생성하고, glucose, maltose, mannose, galactose 및 fructose등의 당을 산화시키고 가스를 형성하나 xylose, sucrose, rhamnose등의 당은 분해를 시키지 못하는 등의 특성을 가지고 있었다. 분리된 131균주 중 지역별로 대표가 되는 10개의 균주를 선택하여, 혈청학적 특성을 비교한 결과 일본에서 분류되고 있는 E. tarda의 세가지 혈청형을 나타내는 항혈청 E-22(혈청형 a), SU-138(혈청형 b) 및 SU-100(혈청형 c)과 대표균주간에는 항체가 E-22항혈청에 대하여는 2560-5120의 응집를 보인 반면, SU-138 및 SU-100의 항혈청에서는 각각 40-80과 40 이하의 응집를 보여 대표균주는 E. tarda serotype a와 유연성이 깊은 것으로 나타났다. 또한 대표균주들을 10% acrylamide gel상에서 전기영동하여 세균단백질을 비교하여 본 결과, 대표 균주 모두가 단백질의 종류 및 양에 있어서 거의 동일한 것으로 나타났다.

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Modulation of Pituitary Somatostatin Receptor Subtype (sst1-5) mRNA Levels by Growth Hormone (GH)-Releasing Hormone in Purified Somatotropes

  • Park, Seung-Joon;Park, Hee-Soon;Lee, Mi-Na;Sohn, Sook-Jin;Kim, Eun-Hee;Jung, Jee-Chang;Frohman, Lawrence A.;Kineman, Rhonda D.
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제7권2호
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    • pp.79-84
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    • 2003
  • We have previously reported that expression of the somatostatin receptor subtypes, sst1-5, is differentially regulated by growth hormone (GH)-releasing hormone (GHRH) and forskolin (FSK), in vitro. GHRH binds to membrane receptors selectively located on pituitary somatotropes, activates adenylyl cyclase (AC) and increases sst1 and sst2 and decreases sst5 mRNA levels, without significantly altering the expression of sst3 and sst4. In contrast FSK directly activates AC in all pituitary cell types and increases sst1 and sst2 mRNA levels and decreases sst3, sst4 and sst5 expression. Two explanations could account for these differential effects: 1) GHRH inhibits sst3 and sst4 expression in somatotropes, but this inhibitory effect is masked by expression of these receptors in unresponsive pituitary cell types, and 2) FSK inhibits sst3 and sst4 expression levels in pituitary cell types other than somatotropes. To differentiate between these two possibilities, somatotropes were sequentially labeled with monkey anti-rat GH antiserum, biotinylated goat anti-human IgG, and streptavidin-PE and subsequently purified by fluorescent-activated cell sorting (FACS). The resultant cell population consisted of 95% somatotropes, as determined by GH immunohistochemistry using a primary GH antiserum different from that used for FACS sorting. Purified somatotropes were cultured for 3 days and treated for 4 h with vehicle, GHRH (10 nM) or FSK ($10{\mu}M$). Total RNA was isolated by column extraction and specific receptor mRNA levels were determined by semi-quantitative multiplex RT-PCR. Under basal conditions, the relative expression levels of the various somatostatin receptor subtypes were sst2>sst5>sst3=sst1> sst4. GHRH treatment increased sst1 and sst2 mRNA levels and decreased sst3, sst4 and sst5 mRNA levels in purified somatotropes, comparable to the effects of FSK on purified somatotropes and mixed pituitary cell cultures. Taken together, these results demonstrate that GHRH acutely modulates the expression of all somatostatin receptor subtypes within GH-producing cells and its actions are likely mediated by activation of AC.

벼검은줄오갈병바이러스 외피단백질 유전자 단백질 발현과 항혈청 제작 (In Vitro Expression and Antibody Preparation of Rice black-streaked dwarf virus Coat Protein Gene)

  • 이봉춘;조상윤;배주영;김상민;신동범;김선림
    • 식물병연구
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    • 제22권1호
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    • pp.32-37
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    • 2016
  • 본 연구에서는 RBSDV의 외피단백질 P10을 코드하는 S10을 E. coli에서 발현시켰다. RBSDV-miryang isolate (GenBank JX994211)로부터 추출한 게놈 dsRNA을 주형으로 S10의 특이적인 primer를 사용하여 P10의 N-말단영역(1-834 nt, 1-278 aa)을 RT-PCR에 의해 증폭하였다. 증폭된 RBSDV S10-N (1-834 nt)을 발현 벡터 pET32a(+)에 클로닝하여 E. coli BL21(DE3)에서 발현시킨 후 Ni-NTA affinity column으로 발현된 단백질을 정제하였다. 정제된 단백질을 면역 동물에 주사하여 항혈청을 제작하였다. 제작된 항혈청은 Western blot 및 ELISA 분석으로 RBSDV와의 특이성을 확인하였다. 본 연구에서 RBSDV 한국 isolate의 항혈청이 제작되었으며 금후 혈청학적 연구의 좋은 재료로 활용될 수 있을 것으로 기대한다.

한국산 나리류에서 분리한 바이러스에 관한 연구 I. Broad Bean Wilt Virus 및 Cucumber Mosaic Virus (Studies on Viruses Isolated from Lilium spp. In Korea I. Broad Bean Wilt Virus and Cucumber Mosaic Virus)

  • 장무웅;정재동
    • 한국식물병리학회지
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    • 제3권3호
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    • pp.223-235
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    • 1987
  • 황색 모자이크 괴저조반, 위축, 기형, colour breaking의 병미을 나타내고 있는 나리류를 한국의 남부지역에서 채집하였다. 전자현미경에 의해 2종의 바이러스 입자가 분리되어, 이들의 기주범위, 혈청반응, 조즙액중의 부활화 한계, 진딧물의 전반성, 감염엽세포에 있어서 바이러스 입자의 소재양식에 의하여 2종의 바이러스를 동정하였다. Broad bean wilt virus(BBWV) : 이 바이러스는 즙액접종에 의해 8과 23종의 검정식물에 감염이 확인되었다. 복숭아혹진딧물에 의해 쉽게 전반되었다. 내열성은 $70\%$, 내희석성은 1,000배, 내보존성은 6일이였다. 바이러스 입자의 형태는 직경 약 28nm의 소구형이다. 혈청시험에서 본 바이러스는 BBWV의 항혈청과 특이적인 반응대를 형성했다. 병엽절편의 전자현미경적관찰에서는 엽육세포의 세포질, 액포, 핵내에서 바이러스 입자의 응집괴 및 결정배열상이 확인되엇고, 특히 세포질내에서는 vesicular body의 발달이 확인되었다. Cncumber mosaic virus(CMV) : 이 바이러스 입자의 형태는 직경 약30nm의 소구형이다. 본 바이러스 CMV-Y의 항혈청과 특이적인 반응대를 형성했다. 감염엽조직의 전자현미경적관찰에서는 엽육세포의 세포질 및 액포내에서 바이러스 입자의 응집괴 도는 결정배열상이 확인되었다. BBWV와 CMV를 건전한 나리류(Lilium tigrium, L. concolor, L. auratum)에 재접종한 결과 BBWV의 접종주에서는 가벼운 병징 또는 colour breaking를 나타내었고, CMV의 접종수에서는 황색 모자이크 또는 괴저조반을 나타냈다.

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