• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제35권2호
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• pp.87-94
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• 1997

우리 나라에서 가장 감염자가 많은 기생충인 간흡충의 현 감염에 특이한 항원 분획을 찾고자 면역이적법을 이용하여 감염자의 혈청을 검색하였다. 실험적으로 토끼에서 얻은 간흡충 성충의 조항원에 시스테인계 단백질분해효소 억제제인 I-64를 첨가하였을 때 큰 분자량의 분획을 가장 잘 보존하여 200-14 kDa의 범위에 20개 이상의 분획을 관찰하였다. 이 조항원을 이용하여 경북 상주군 주민의 혈청을 면역이적법으로 검사하였다 대변검사, 피내반응검사, 효소면역법검사(ELISA)를 이 용하여 검사한 73명 중 충란양성자 49명의 혈청 내에 특이 IgG와 IgE 항체가 생성되었고, IgM과 IgA 항체는 특이하게 반응하지 않았다. 여러 항원 분획 중에서 43, 34, 28-25 kDa 항원이 현 감 염에 특이한 분획이고. 항체와 반응한 94, 80, 72, 68, 64, 62, 52, 47, and 40 kDa 분획은 특이하지 않은 분획임을 확인하였다. 추후에 각 항원과 이에 대한 혈청반응에 대하여 특성을 더 연구 할 필요가 있으며, 특히 치료후 추적검사를 통하여 혈청내 항체의 소실을 구명하여야 할 것이다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제30권4호
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• pp.323-328
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• 1992

질트리코모나스의 항원 분석을 시행하기 위하여 병원성이 화인된 질트리코모나스(Trichamonas vaginnlis) 6개주(HY-1,2,3,9,10,13)의 항일을 sodium dodecyl sulfate - polyacrlyamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) 한 결과 Coomassie brilliant blue 염색상에서 peptide의 밀도 차이를 제외하고는 주간에 동일한 단백질 분포양상을 보였으며, 12kDa에서 170kDa까지 약 35개 정도의 분획이 관찰되었다. 또한 질트리코모나스 HY월주를 항원으로 하고 질트리코모나스 6개주에 대해 면역된 마우스의 항혈청을 이용하여 enzyme-linked immunoelectrotransfer blot(EITB)을 시행한 결과 각 주마다 서로 다른 반응양상을 보였으며, 51kDa과 96kDa에서 질트리코모나스의 특이한 공통 반응대가 관찰되었고, 각기 다른 6개주의 항원에 대해 HY-1주의 항혈청으로 ETTB한 결과 HY-1 함원(homologous antigen)과의 반응 양상과 타항친(heterologous antigen)과의 반응 양상간의 특이한 차이는 관찰할 수 없었다. 이상의 결과로 보아 질트리코모나스 각 주의 항원은 항인-항체 반응에서 주간에 이종(antigenic heterogeneity)을 형성하고 있는 것으로 보였으며, 41, 47, 55, 74 및 94kDa에서 질트리코모나스애 특이한 공통반응대를 보었으며, 이 부분이 숙주-기생충의 상 호관계에 있어서 중요한 의의를 내포하고 있을 것으로 생각된다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제14권3호
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• pp.1635-1642
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• 2013

Helicobacter pylori antigen was prepared from an isolate from a patient with a duodenal ulcer. Serum samples were obtained from culture-positive H. pylori infected patients with duodenal ulcers, gastric ulcers and gastritis (n=30). As controls, three kinds of sera without detectable H. pylori IgG antibodies were used: 30 from healthy individuals without history of gastric disorders, 30 from patients who were seen in the endoscopy clinic but were H. pylori culture negative and 30 from people with other diseases. OFF-GEL electrophoresis, SDS-PAGE and Western blots of individual serum samples were used to identify protein bands with good sensitivity and specificity when probed with the above sera and HRP-conjugated anti-human IgG. Four H. pylori protein bands showed good (${\geq}$ 70%) sensitivity and high specificity (98-100%) towards anti-Helicobacter IgG antibody in culture-positive patients sera and control sera, respectively. The identities of the antigenic proteins were elucidated by mass spectrometry. The relative molecular weights and the identities of the proteins, based on MALDI TOF/TOF, were as follows: CagI (25 kDa), urease G accessory protein (25 kDa), UreB (63 kDa) and proline/pyrroline-5-carboxylate dehydrogenase (118 KDa). These identified proteins, singly and/or in combinations, may be useful for diagnosis of H. pylori infection in patients.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제31권1호
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• pp.43-48
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• 1993

요꼬가와흡충증은 주로 은어회를 먹어 감염되는 흡충증으로서 소장염(소장염)을 일으켜 피로 감, 복통, 설사 등 중상이 나타나며 말초혈액 호산구증가를 동반한다. 이 흡충중은 대변에서 충란을 검출하여 진단하나 급성 장염으로 발현하는 환자의 일부에서는 대변검사로 충란을 발견 할 수 없어 보조적인 진단으로 특이항체검사가 필요한 경우가 있다. 이 실험은 요꼬가와흡충증 의 특이항체검사의 가치를 검토하고 검사에서 항원으로 사용하는 피낭유충 생리식염수 추출액 내 특이항원 단백질을 찾기 위하여 실시하였다. 항원으로는 요꼬가와흡충 피낭유충의 추출액을 사용하였고 감염 및 대조혈청은 인상적으로 급성 요로가와흡충증으로 진단한 환자 11명, 간질 (간질) 환자 5명, 간흡충 환자 5명, 폐흡충 환자 5명과 대조군 11명의 것을 사용하였다. 항체 검사로 효소면역측정 법으로 특이 IgG항체를 검사한 결과 임상적으로 진단한 요꼬가와흡충증 환자 11명중 10명이 양성반응을 나타내었다. 요꼬가와흡충 항원에 대하여 다른 흡충 감염자 혈청도 교차반응을 보였으나 동종항원에 대하여 가장 높은 흡광도를 나타내었다. 따라서 특이항체검사에서는 여러가지 흡충항원에 대한 항체검사를 동시에 검사할 필요가 있다고 판단하였다. 항원 구성 단백질을 관찰하기 위하여 7.5-15% gel에서 SDS-PAGE한 결과 항원에서 주(주)단백질대 14개 이상을 구별할 수 있었다. SDS-PAGE/immunoblot을 실시하여 요꼬가와흡충증에서만 반응하는 특이항원대를 검색한 바, 항원 단백질대 대부분이 다른 흡충증 환자 혈청과 교차반응을 나타내었으나 66 및 22 kDa 단백질대는 교차반응이 제일 적어 특이항원 단백질이라고 판단하였다.

• 대한수의학회지
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• 제32권2호
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• pp.195-205
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• 1992

The soluble antigen profiles and antigenic specificities of Leptospira interrogans serovars icterhaemorrhagiae, canicola, pomona and hardjo were examined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, crossed immunoeletrophoresis and immunoblotting. The profiles of protein, glycoprotein and fraction containing N-acetylglucosamine of 4 serovars were compared. The protein profiles of 4 serovars were very similar except the range of 14,400 to 30,000 daltons. Molecular weight of glycoprotein of L, pomona was lower than other serovars. L canicola showed extra N-acetylglucosamine bands having molecular weight of 82,000 and 90,000 daltons. In crossed immunoelectrophoresis, a close antigenic relationship was found between L icterohaemorrhagiae and L canicola. In immunoblottings conducted with soluble antigens and rabbit antisera of 4 serovars, Leptospira interrogans serovars possessed cross-reactive antigens and serovar-specific antigens. The molecular weights of serovar-specific antigens were 45,000, 82,000 and 90,000, 31,000 and 24,000 daltons in L icterohaemorrhagiae, L canicola, L pomona, and L hardjo, respectively.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제38권3호
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• pp.145-150
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• 2000

Antigenic components in the crude extracts of Spirometra mansoni plerocercoid were analyzed in early experimental infections and in IgG subclass observed in clinical sparganosis. By IgG immunoblot, sera obtained serially from experimental mice, fed 5 spargana each, were reacted with the crude extracts. Protein bands at 36-26 kDa and 103 kDa showed positive reactions since two weeks after infection. In a differential immunoblot, in which a monospecific antibody against sparganum chymase at 36 kDa was pre-treated, the reactions at 36-26 kDa disappeared, indicating that the sparganum chymase and its degradation products invoked IgG antibody reactions. When 69 patients sera of human sparganosis were examined for their IgG subclass responses, IgG4 levels showed the highest reaction which was followed by IgG 1 The IgG4 antibody also reacted mainly with 36-31 kDa protease. These results indicate that 36 kDa chymase of 5. nansoni plerocercoid is the main antigenic component inducing Ige antibody response in early stage of experimental sparganosis and for specific IgG subclass reactions in human sparganosis.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제26권4호
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• pp.245-254
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• 1988

유구낭미충(이하 낭미충)(Cysticercus cellulosae)에서 추출한 조항원으로 낭미충증(cysticercosis), 스파르가눔중(sparganosis) 및 포충중(hydatidosis) 환자 및 정상인 혈청내 IgG 항체와의 혈청학적 반응을 ELISA 및 EITB 방법으로 추적하였다. ELISA에서 낭미충의 조항원 단백은 스파르가눔중 환자 혈청과의 교차 반응도 보였고, 포충증 환자 혈청에 대해서는 낭미충 환자 혈청보다 오히려 높은 흡광도(O.D.)를 보였다. 낭미충 조항원을 SDS-PAGE로 전기영동한 결과 260 KDa∼22 KDa 범위에서 31개의 polypeptide band를 얻었으며 이 중 11개의 분획이 강한 염색성을 나타내었다. 낭미충 조항원과 낭미충중 환자 혈청과의 EITB 반응에서 22개의 항원대가 관찰되었으며 이 중 104 KDa, 82 KDa, 78 KDa 및 59 KDa는 모든 검사 혈청에서 인지되었다. 또 22개의 항원대 중 12개는 정상인 혈청에서도 반응이 관찰되어 교차반응하는 비특이성 항원 성분으로 해석되었다. 낭미충 조항원과 스파르가눔증 환자 혈청과의 반응에서 11개의 항원대가 인지되었으며 이 중 낭미충증 환자 혈청과 교차반응하는 9개의 항원대가 인지되었다. 나머지 163 KDa 및 131 KDa 항원대는 스파르가눔 환자에서만 동정되었다. 낭미충 조항원과 포충증 환자 혈청과의 반응에서는 21개의 항원대가 인지되었는데, 이 중 63 KDa는 포충증 환자에서만 인지되었고 나머지는 낭미충증 환자 혈청과 교차반응하는 항원대이었다. 한편 낭미충 조항원 중 104 KDa, 82 KDa, 72 KDa, 59 KDa및 34 KDa는 낭미충증, 스파르가눔증 및 포충중 환자와 정상인의 혈청에서도 모두 교차반응을 일으키는 항원이었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제27권1호
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• pp.1-8
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• 1989

폐흡충증의 진단은 객담검사법이 가장 확실한 진단 방법이기는 하지만 폐흡충이 폐에 기 생한 경우에도 충란 검출이 어려울 때가 있으므로 혈청학적 진단법이 이용되고 있다. 혈청학적 진단법에 사용되는 항원인 기생충 추출물, 즉 조항원은 분류학적으로 유사한 기생충과 서로 공유하고 있는 공통 항원 때문에 교차 반응을 일으키는 경우가 있다. 이 연구는 발육단계 별 폐흡충에서 만든 조항원을 SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)로 전기영동한 다음 EITB(enzyme-linked immunoelectrotransfer blot)를 이용하여 항원대별 항원성 및 특이성을 관찰하여 시기별로 채취한 고양이 혈청에 대한 특이 반응대를 관찰해 보고자 시행하였다. 실험에 사용한 항원은 실험적으로 고양이에 감염시켜 3, 5, 8및 12주 만에 얻은 폐흡충의 식염수 추출액 (SEPn; n=감염된 시기)이며 3∼20% linear gradient gel에서 SDS-PAGE하였다. Silver stain결과 폐흡충 조항원은 최소한 30개 이상의 band들로 구성되어 있었는데 각 발육단계 에 공통된 항원대로 203, 63, 35, 21, 19, 13 kDa band들이 관찰되었고, 단계별로 차이점도 관찰 되었다. SEPl2에서는 새로운 229 kDa band가 관찰되었다. 주요 항원대에 대하여 EITB를 한 결과 각 항원과 감염 후 5주 이상 된 혈청과 공통적으로 반응한 항원대는 203, 115, 91, 85, 67, 63, 48, 39, 35 및 25 kDa band들이었고, 8주 이상 된 혈청과의 반응에서는 19, 13및 10 kDa 항원대와 공통적으로 일관성 있게 반응하였다. SEP12는 12주 된 혈청과 229 kDa에서 특이하게 반응하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제26권2호
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• pp.73-86
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• 1988

간흡충(Clonorchis sinensis)의 조항원(WWA), 정제항원(ABA)의 민감도와 특이도를 비교해 보는 한편, 발육단계별로 충란 항원(EGA)-피낭유충 항원(MEA)-성충 항원(WWA)의 단백질 구성물질의 차이를 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)로 관찰하고 이들 항원의 유용성을 효소면역반응(enzyme-linked immunosorbent assay: ELISA)으로 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 간흡충의 조항원으로부터 정제된 항원(ABA)은 항체와 결합한 결합항원(affinity-purified antibody(IgG) binding antigen:ABA)으로서 Ouchterlony 반응으로 간흡충 감염 가토혈청과 4개의 침모대 (WWA는 7개)를 형성하였다. WWA의 major protein들은 분자량 16,300∼18,500 및 28,000∼29,000 dalton의 Polypeptide band였고, ABA는 분자량 18,000∼21,000 및 29,000∼31,000 dalton의 단백질로 다소의 차이를 보였다. ELISA시첩에서 ABA는 WWA에 비해 현저히 민감도가 낮았다. WWA와 ABA에 대한 폐흡충 감염 사람혈청의 ELISA 정사에서 WWA는 Ouchterlony 양성자 8예중 3예에서 교차반응을 나타내었으나 ABA는 교차반응을 나타내지 않았다. 간흡충의 발육단계별 항원 단백질의 분자량 범위는 WWA 11,000∼80,000, MEA 15,000∼100,000, EGA 15,000∼200,000 dalton이었다. 주류원 단백질의 분자량은 EGA는 각각 36,600 (band No. 22), 38,500(No. 20), 64,000(No. 9), 62,000(No. 10), 54,500(No. 11), 53,000(No. 12) dalton, MEA는 각각 65,600(No. 3), 44,700 (No.7), 43,900(No. 8) dalton, WWA는 각각 16,300∼18,500(No. 31-32), 28,000∼29,000(No. 25), 11,000w13,000 (No. 35) 및 31,000(No. 24) dalton이었다. 즉, MEA와 EGA가 WWA보다 고분자의 단백질로 구성되어 있었다. 각 발육단계별 항원의 항원성은 ELISA 반응으로 볼 때 WWA가 가장 높았고, MEA는 약한 항원성만을 나타내었으며 EGA는 음성이었다. WWA와 간흡충 감염 가토혈청은 감염 4∼6주에 OD>1.0, 12주 이후 항체가의 plateau를 나타내었으나 MEA는 Ouchterlony 반응에서 EGA와 함께 음성반응을 보였다. ELISA에서도 중감염군(12∼20주)에서만 OD>0.6으로 미약한 항원성이 인정되었으며 경감염군은 전감염기간중 OD<0.6를 나타내었다. 이상의 결과로 보아 성충 항원이 가장 강력한 함원성 물질을 포함하고 있음이 명백하다고 생각된다. 그러나 성충 조항원은 면역진단에 사용할 겹우 타흡충과의 빈번한 교차반응이 예상되므로 민감도 및 특이도가 높은 정제 항원물질을 분리하는 일이 중요하다고 생각된다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제37권4호
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• pp.243-248
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• 1999

The present study analyzed serum IgG subclass antibody reaction to major antigenic bands of Clonorchis sinensis to investigate improvement of its serodiagnosis. Of the four subclass antibodies, IgG1 and IgG2 antibodies were produced but not specific, IgG3 antibody was least produced, and IgG4 antibody was prominent and specific. The serum IgG antibody reaction to any of 43-50, 34-37, 26-28, and 8 kDa bands was found in 65.5％ of 168 egg positive cases while IgG4 antibody reaction was found in 22.0％ of them. The positive rates of IgG and IgG4 antibodies were directly correlated with the intensity of infection. All of the sera from heavily infected cases over EPG 5,000 showed positive reaction for specific IgG and IgG4 antibodies. The specific serum IgG4 antibody disappeared within 6 months after treatment. The bands of 35 kDa and 67 kDa cross-reacted with IgG antibodies but not with IgG4 antibodies in sera of other trematode infections. The present findings suggest that serum IgG4 antibody reaction to 8 kDa band is specific but not sensitive. Any method to increase its sensitivity is required for improved serodiagnosis.